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1、 2015届毕业生毕业论文巴音布鲁克草场不同季节苔草的营养成分变化规律研究学生姓名 学 号 所属学院 动物科学学院 专 业 动物科学 班 级 动科15-1 指导教师 塔里木大学教务处制目 录1 前言11.1 巴音布鲁克草场及巴音布鲁克草（苔草）发展利用现状11.1.1 巴音布鲁克草场概况11.1.2 苔草开发利用的现状12 实验目的13 材料与方法23.1 采样方法23.2 苔草营养成分测定方法及指标23.2.1 干物质的测定23.2.1.1 仪器设备23.2.1.2 操作步骤23.3.2 粗蛋白的测定23.3.2.1 仪器设备23.3.2.2 试剂及其配制23.3.2.3 操作步骤23.3.
2、3 粗脂肪的测定32.3.3.1 仪器设备33.3.3.2 试剂组成及其配制33.3.3.3 操作步骤33.3.4 粗纤维的测定33.3.4.1 仪器设备33.3.4.2 试剂及其配置33.3.4.3 操作步骤33.3.5 中性洗涤剂（NDF）与 酸性洗涤剂（ADF）测定43.3.5.1 仪器设备43.3.5.2 试剂及其配置43.3.5.3 操作步。43.3.6 粗灰分的测定43.3.6.1 仪器设备43.3.6.2 试剂及其配置43.3.6.3 操作步骤43.3.7 钙的测定43.3.7.1 仪器设备43.3.7.2 试剂组成及其配制53.3.7.3 操作步骤53.3.8 磷的测定53.3
3、.8.1 仪器设备53.3.8.2 试剂组成及其配制53.3.8.3 操作步骤54 结果与分析64.1 春夏秋冬四个季节比较64.2 同一季节不同牧场比较64.3 同一牧场不同季节比较75 结论7参考文献8致谢9巴音布鲁克草场不同季节苔草的营养成分变化规律研究艾孜再姆乌拉伊木（塔里木大学动物科学学院 新疆 阿拉尔 843300）摘要：本研究通过测定巴音布鲁克草原不同分场苔草中的干物质、能值、粗蛋白、粗脂肪、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗纤维、粗灰分、钙、磷的含量，从而得出：春季科克乌松分场苔草营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到9.35% ，粗纤维含量达到26.82% ，比其它两个分场对比来说粗
4、蛋白质含量最高，粗纤维含量最低，还有中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量也比其它分场最高。夏季那拉提分场苔草营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到8.91%，粗纤维含量达到21.28%，比其它两个分场对比来说粗蛋白质含量最高，粗纤维含量最低，还有中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量也比其它分场最高。秋季科克乌松分场苔草比其它分场生长多一些：其中，粗蛋白含量达到4.98%，粗纤维含量达到22.07%，其它两个分场基本上不生长的。冬季科克乌松分场苔草营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到7.05 %，粗纤维含量达到21.16% ，比其它两个分场对比来说粗蛋白质含量最高，粗纤维含量最低，还有冬季科克乌松分场苔草中性洗涤
5、纤维、酸性洗涤纤维含量也比其它分场最高。关键词：巴音布鲁克草场；不同季节；苔草；营养成分；变化规律1 前言1.1 巴音布鲁克草场及巴音布鲁克草（苔草）发展利用现状1.1.1 巴音布鲁克草场概况巴音布鲁克草原，位于新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县西北、天山山脉中部的山间盆地中，四周为雪山环抱，海拔约2500米，面积23835平方公里，是中国第二大草原，仅次于内蒙古额尔多斯草原。巴音布鲁克蒙古语意为“富饶的泉水”，草原地势平坦，水草丰盛，是典型的禾草草甸草原，也是新疆最重要的畜牧业基地之一。巴音布鲁克草原是巴音布鲁克区生态系统的主体，是该区畜牧业发展的重要物质基础和农牧民赖以生存的基本生产资料，是巴州
6、最大的绿色生态屏障，同时也是南疆重要的生态防线。近年来，由于受全球气候变暖现象的影响，加上过度开发、超载过牧，巴音布鲁克草原90以上的草地已经出现了不同程度的鼠害、沙化，重度退化的已达40，生态危机已经成为该区实现脱贫致富奔小康的重大障碍。遏制巴音布鲁克草原退化，恢复巴音布鲁克草原生态，不仅关系到巴音布鲁克区各族人民群众的生存和全面建设小康社会的步伐，而且关系到巴州、伊犁等地区经济的可持续发展。1.1.2 苔草开发利用的现状苔草，属莎草科苔草属，多年生草本，具根状茎，秆三棱柱形。本属约1300种，如寸草苔、粗喙苔草、黑穗苔草、黑花苔草、弯囊苔草、舌叶苔草等苔草。旱生根茎型多年生草本，山地草原植
7、物。生长于山地的阳坡、半阳坡。常与针茅（Stipa capillata）、沟羊茅（Festuca valesiaca）和超旱生半灌木蒿属植物（Artemisia sp）一起组成干草原或荒漠草原群落。苔草广布与世界各地，常为草甸，高寒草甸优势植物高寒草甸，这种草甸常用作放牧场。巴音布鲁克草原草种类丰富，主要的是苔草类，覆盖率80%左右。苔草属多年生草本植物，它的根系十分发达，再生能力强，刈割后有极强的再生的能力。苔草营养较为丰富，干物质含粗蛋白10.1%，粗脂肪5.0%，NDF66.2%，ADF35.7%，粗灰分6.6%，而且产量高，每亩可产干物质260公斤左右。季节性洪水也给苔草带来了丰富的营
8、养物质，再加上湖区本身日照充足，降雨充沛，气候适宜，使得苔草的生长非常繁茂。仅1217m高程的湖滩草洲即可年产鲜草154万t。目前，沿湖对苔草资源的利用主要有：第一，苔草刈割后作为燃料或者沤肥。相关研究表明，苔草占湖区能源总量的7.54%，占生活用能的1%，每年苔草用于堆肥还田的量约59.94万t，直接用做燃料，能量转换率一般只有10%，最高不超过20%，这对这一优质资源是极大的浪费。第二，在草洲上直接放牧，如放牧水牛，鹅等。这种方式较为粗放，对苔草资源易过度利用，而且由于管理粗放，饲养周期长，饲料利用率低，容易造成苔草资源的浪费。第三，在枯水期将苔草刈割，集约化饲养。1.3开发利用苔草资源的
9、重要性随着土地资源的日益紧张，人畜争粮、环境污染等问题日益严重，着重发展节粮型畜牧业是当前我国畜牧业发展的一个大方向。要改变目前传统畜牧业对粮食的严重依赖，合理开发利用粗饲料资源，是实施这项项战略决策的突破口。从动物的生理方面讲，粗饲料的合理开发利用也是必然的。对于单胃动物而言，粗饲料的作用主要体现在以下几个方面：第一，维持单胃动物的胃肠道的正常蠕动。饲料中的粗饲料可以通过机械作用或者发酵后的产物来影响胃肠道的蠕动和消化，繁殖动物更是需要通过摄入一定量的粗饲料来排空胃肠道。第二，提供一定的能量。粗饲料经过大肠发酵产生的VFA可以满足机体胃肠需要的10%-30%。第三，刺激动物胃肠道的发育。第四
10、，改善胴体品质，适当增加粗饲料的采食，可以减少脂肪沉积，提高瘦肉率。第五，饲料纤维的代谢效应。粗纤维可以刺激消化液如胃液，胰液，胆汁分泌（5）。而对反刍动物的饲料，粗饲料是必不可少的。2 实验目的通过测定巴音布鲁克草原不同分场苔草中的干物质、能值、粗蛋白、粗脂肪、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗纤维、粗灰分、钙、磷的含量，比较巴音布鲁克草场不同季节部分分场苔草的营养成分，寻找苔草营养成分变化规律。3 材料与方法3.1 采样方法本实验中的草样都是被2014年科克乌松分场、那拉提分场、巴音布鲁克分场采来的，这些草样是通过自然风干法风干，用粉碎机粉碎，过40目筛，待分析用。3.2 苔草营养成分测定方法
11、及指标3.2.1 干物质的测定3.2.1.1 仪器设备感量0.0001g分析天平1台，直径40mm以上的称量瓶2个，药勺1把，直径20cm干燥器1个，短柄坩埚钳1把，宽2cm，长18cm的白色硬纸带2条，恒温干燥箱（公用）；3.2.1.2 操作步骤（1）将洁净已用铅笔编好号的称瓶置于1052的恒温干燥箱内干燥1h。用坩埚钳取出称瓶，迅速盖好盖瓶，放入干燥器内，冷却30min。用纸带取出称瓶，放在分析天平上称重。同法再烘1h，称重。（2）在已恒重的称瓶内，加入分析样本2g左右，准确至0.0001g。（3）把盛有样本的称瓶置于1052的恒温干燥箱内，红56h，取出，盖好瓶盖，放入干燥器内，冷却30
12、min，称重。同法再烘1h，取出冷却30min称重，直至前后两次重量差不超过0.001g为恒重。3.3.2 粗蛋白的测定3.3.2.1 仪器设备100mL消煮管1个、直径7cm的定性滤纸3张、感量0.0001g的分析天平1台、25mL量筒和10mL量筒各一个、100mL容量瓶3个、25mL酸式滴定管一个、三角瓶3个、20mL和10mL大肚吸管各一支、感量0.2g的粗天平1台、洗瓶2个、半微量凯式蒸馏装置1套、1500W的消煮炉1台。3.3.2.2 试剂及其配制（1）500mL分析纯浓H2SO4（2）混合催化剂：称量0.4g CuSO45H2O，6g无水硫酸钠于研钵中研成均匀的粉状，装入瓶中备用
13、。（3）饱和NaOH：40g NaOH溶于100mL蒸馏水中，装入瓶中备用。（4）2%硼酸溶液：称量10g化学纯硼酸，溶于500mL蒸馏水中。（5）甲基红-次甲基蓝混合指示剂：称量1.25g甲基红和0.825g次甲基蓝混溶于1000mL90%的酒精溶液中，转入瓶中备用。（6）0.01mol/L的HCl标准溶液：用移液管量取分析纯浓盐酸0.9mL，加入蒸馏水稀释至1000mL定容至容量瓶。3.3.2.3 操作步骤1、消化（1）将100mL的消煮管洗净，用记号笔在管口上编号。（2）称量0.51g样品（准确至0.0001g）倒入到消化管底部，注意不要沾到消化管壁上。（3）称量2.5g混合催化剂至于消
14、化管底部，不要沾到消化管壁上。（4）用洁净的量筒量取浓硫酸20mL，慢慢倒入消煮管内（注：不要沾到消化管壁上），使样品全部被浓硫酸脱水炭化。（5）称量2.5g混合催化剂和20mL浓硫酸至于一支空消化管内，作为空白对照组。（6）将所有消化管至于自动消煮机上消煮10h以上，直至所有样品变为浅蓝色或者无色为止。2、蒸馏（1）将洗净的半微量凯氏蒸馏装置安装好，并检查每个结合处是否严密以及冷凝系统的流水情况。（2）煮沸蒸汽发生器中的水（蒸汽发生器中的水加入数滴甲基红和H2SO4，使水呈粉红色，并保持此颜色，否则补加H2SO4），并接通冷凝管的水流。（3）将15mL左右的蒸馏水通过进样口注入反应室，塞好入
15、口玻璃塞，留少量水做液封。通入蒸汽，蒸馏5min，以洗涤反应室和进样口。切断反应室的蒸汽供应（此时切记一定要保证蒸汽发生装置中的蒸汽能够顺畅的排出，否则会出现危险！），由于反应室外层蒸汽冷凝较快，造成负压，使反应室的液体自动流入反应室外层，将废液排出。（4）争取洗净的250mL三角瓶一个，用移液管加2%硼酸溶液20mL放入三角瓶中，加2滴甲基红-次甲基蓝混合指示剂。将三角瓶放在冷凝管的蒸汽通管下，使冷凝管的下端浸入硼酸溶液内。（5）用移液管取10mL消化液，通过进样口慢慢放入反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样口，塞好入口玻璃塞。取饱和NaOH溶液加入进样口，微微打开玻璃塞，使碱液慢慢流入反应室，反
16、应室液体呈淡蓝色或者棕色，否则说明NaOH量不足，应再加饱和NaOH溶液，使呈淡蓝色或棕色为止，加少量蒸馏水冲洗进样口，并使进样口中的液体慢慢流入反应室中，（注意：再加入碱及碱加足后冲洗进样口的过程中，进样口内自始至终要有液体存在），留少量液体做水封，以防止漏气。通入蒸汽，反应室内的液体沸腾之后开始计时，蒸馏5分钟，使氨通过冷凝管而被三角瓶中的硼酸吸收。移下三角瓶，使冷凝管的下端离开液面，继续空蒸1min，用洗瓶内的蒸馏水冲洗冷凝管下口的外部，洗液均流入吸收液，将三角瓶移开蒸馏装置，以备滴定。（6）蒸馏完后，洗涤反应室。3、滴定用0.01mol/L的HCl标准液滴定，至溶液由蓝绿色变为紫红色时
17、即到达终点。记录所消耗的HCl标准溶液的体积，空白滴定相同。3.3.3 粗脂肪的测定3.3.3.1 仪器设备脱脂滤纸15张、高称量瓶15个、干燥器1个、长柄镊子1个、感量0.0001g的分析天平1台、表面皿5个、粗脂肪测定仪1台。3.3.3.2 试剂组成及其配制无水乙醚4瓶。3.3.3.3 操作步骤1、称样的包装及提取脂肪的准备（1）滤纸包的准备：用脱脂滤纸称样1g左右，准确至0.0001g，包好，用脱脂棉线缠好，用铅笔编号。（2）将包好并编号的滤纸包在1052干燥箱内烘4h，取出放入干燥器内，盖好干燥器盖子，冷却30min，再次称重，准确至0.0001g。同法再烘1h，冷却30min，称重。
18、直至前后两次重量相差不超过0.0005g为恒重。2、粗脂肪的提取（1）将包好干燥好的滤纸包放入烧杯内，往烧杯内加入乙醚，密封过夜。（2）移开粗脂肪测定仪的的冷凝管，用镊子把样包装入抽脂腔，由抽脂腔上口加乙醚。当加至虹吸管高度时，乙醚自动流入盛醚瓶。再加乙醚到抽脂腔的2/3处即可。将冷凝管与抽脂腔结合。（3）开通电源抽提脂肪，抽提8h。（4）自抽提腔呢取数滴乙醚于洁净平面皿上，使乙醚挥发，如无残痕，则样品中的粗脂肪已被抽提净。（5）提取完毕，待乙醚刚刚回流到盛醚瓶，取开冷凝器，用长柄镊子取出滤纸包，放入原称量瓶内，使残留的乙醚挥发。3、残样包的干燥将残样包转入干燥箱内，干燥箱门打开1/5，在10
19、0105烘至乙醚完全挥发后，关闭箱门，在1052烘2h，放入干燥器冷却30min，称重。同法再烘1h，冷却30min，称重，直至两次前后重量差不超过0.0005g。3.3.4 粗纤维的测定3.3.4.1 仪器设备800mLl高脚烧杯、感量0.0001g的分析天平、电热恒温箱（可控制温度在130）、高温炉（电加热，可控制温度在550600）、30mlL古氏坩埚、电热板（可控温）和电炉、消煮器：有冷凝球的高型烧杯（800mL）或有冷凝管的锥形瓶、吸滤瓶及漏斗、滤器：200目尼龙网、干燥器。3.3.4.2 试剂及其配置（1）0.2550.005mol/l硫酸溶液（1.25%H2SO4）配制：在100
20、0ml容量瓶中先装入约800ml蒸馏水，然后用吸管吸取比重1.84的化学纯硫酸7.1ml放入到容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。（2）0.3130.005mol/L NaOH溶液（1.25%NaOH）。配制：溶解化学纯NaOH 1.25g为1000mL。3.3.4.3 操作步骤操作可简单概括为：称样酸煮过滤碱煮过滤烘干炭化，具体操作如下：（1）称样：称取12g试样，准确至0.0002g，转移至高型烧杯。称取2g左右试样，准确至0.0001g，放800mL的高型烧杯中。（2）用量简量取事先加热近沸的0.255mol/L 硫酸溶液200ml，先倒入烧杯中少量，将试样湿润，再沿杯壁四周全部加入。（
21、3）立即将高型烧杯置于电炉上加热，使其在1min内煮沸，在烧杯上安装好冷凝球，然后在电热板上微沸30min。要避免样本粘附于液面以上。（4）准确煮沸30min后，迅速用扎有滤布抽滤漏斗抽滤，将抽滤漏斗随液面下沉，争取在移离电炉后的10min内把硫酸溶液全部抽完，若因同时酸处理的样本多或样本难以抽滤，10min内不能将硫酸抽完时，应加200mL蒸馏水，改变硫酸浓度。酸液抽净后，每次用蒸馏水冲洗烧杯和残渣，搅拌后抽滤。如此重复洗涤45次，直至杯中溶液呈中性（以蓝色石蕊试纸检查）为止。抽滤时若发生滤布被残渣堵塞现象，可用蒸馏水用力冲击堵塞的残渣。必要时，可截断抽气通路，取下抽滤漏斗，由漏斗柄向内吹气
22、，把堵塞的残渣吹入烧杯内。（5）将烧杯中的水分抽尽，截断抽气通路，用沸热的0.313N NaOH溶液冲洗抽滤漏斗上吸附的样本残渣入原烧杯。抽滤漏斗洗净后，沿烧杯四周加入沸热的NaOH 溶液至标记处。按步骤3、4，加热、抽滤、洗涤，直至洗至中性（用红色石蕊试纸检查）为止。（6）将残渣全部转移到铺有已知重量的定量滤纸的布氏漏斗中。在转移残渣过程中，注意不要将滤纸捅破或将残渣转移到滤纸外。定量滤纸用铅笔编号，在105下烘1h，在干燥器中冷却30min，称重。（7）用20mL乙醇分三次洗涤布氏漏斗中的残渣。（8）用乙醚洗残渣，直到洗涤液无色为止（一般34次即可）。（9）将滤纸连同残渣取下，放入到洗净的
23、编号坩埚中，在空气放置数分钟，使醇醚挥发，然后放入1052干燥箱中干燥34h（干燥时坩埚盖半开）取出，迅速盖好坩埚盖放入到干燥器中冷却30min，称重。同法再放入干燥箱内烘干1h，冷却30min，称重，直至前后两次重量差不大于0.001g为恒重，取较低值进行计算，为m1。（10）将坩埚放在电炉上炭化，然后移至茂福炉，在55020条件下灼烧1h，取出，放在干燥器内冷却30min，称重。再灼烧30min，取出，在干燥器内冷却30min称重，直至前后两次重量差不大于0.001g为恒重，取较低值进行计算，为m2。3.3.5 中性洗涤剂（NDF）与 酸性洗涤剂（ADF）测定3.3.5.1 仪器设备同粗纤
24、维测定3.3.5.2 试剂及其配置1、中性洗涤剂（3%二十烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠和6.8g硼酸钠放入1000mL烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g二十烷基硫酸钠和10mL乙二胺四乙酸二钠；再称取4.56g无水磷酸氢二钠置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000mL，其PH值约为6.97.12、酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基演化铵溶于1000Ml 1.00molL 硫酸溶液中，搅拌溶解，必要时过滤。3、1.00molL硫酸：量取约27.87mL浓硫酸徐徐加入已装有500mL蒸馏水的
25、烧杯中，冷却后无损地转移至1000mL容量瓶中，定容，标定。4、无水亚硫酸钠：化学纯，136.04。5、丙酮：化学纯，58.08。6、十氢化萘：化学纯，138.24。3.3.5.3 操作步。1、中性洗涤纤维测定（1）准确称取1g试样准确至0.0001g，置于直筒烧杯中，加入100mL中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。（2）将烧杯套上冷凝装置后置于电炉上，在510min内煮沸，并持续保持微沸1h。（3）煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入。并用水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液中性为止。（4）用20mL丙酮冲洗
26、二次，抽滤。（5）将玻璃坩埚置于105烘箱中烘3h后，在干燥器中冷却30min称重，直称至恒重。2、酸性洗涤纤维测定（1）准确称取1g试样置于直筒烧杯中，加入100mL酸性洗涤剂和数滴十氢化萘。（2）同中性洗涤纤维测定步骤。（3）趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。（4）用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。（5）同中性洗涤纤维测定步骤。3.3.6 粗灰分的测定3.3.6.1 仪器设备感量0.0001g分析天平1台、2530mL带盖坩埚瓷质15个、干燥器1个、长柄和短柄坩埚钳各一个、茂锅炉1个。3.3.6.2 试剂及其配置1、0.5%
27、氯化铁墨水：称0.5g FeCl36H2O 溶于100mL蓝墨水中。2、1：3 HCl溶液：取一份浓盐酸加蒸馏水3份。3.3.6.3 操作步骤1、在带盖的瓷坩埚内加入1：3 HCl溶液10ml，在电炉上煮沸约5min，分别用自来水和蒸馏水洗净，烘干。2、用蘸笔蘸取氯化铁墨水，在坩埚和坩埚盖上编号（二者编号一致）。3、把坩埚放入55020茂福炉内灼烧30min（盖子开启约1/3）。切断电源，打开炉门，用预热过的长柄坩埚钳将坩埚锅盖和坩埚分别取出，放在瓷盘内，在空气中冷却至红热消退（为12分钟用手背靠近坩埚时仍微发热），用短柄坩埚钳将坩埚取出，放在分析天平上称重，准确至0.0001g。按上述方法重
28、复灼烧和称重，直至前后两次重量差不超过0.0005g为恒重。4、用分析天平在恒重的坩埚内加分析样本2g左右，准确至0.0001g。坩埚内的样本应疏松，不可太厚，否则不易氧化。5、将称有试样的坩埚放在电炉上，拧开电炉使样本慢慢炭化至无烟。切记高温过度，以防明火燃烧，或由于剧烈干馏，使部分样本被逸出的气体带走。另外，温度过高，饲料中的硅酸盐呈熔融状态，将饲料颗粒包裹，在其表面形成保护层，使其内部的有机质不能氧化，所以炭化温度不可过高。6、炭化结束（即样本不再冒烟），用坩埚坩将坩埚从电炉上取下，按灼烧坩埚时的位置放入到茂福炉中。接通电源，使炉温上升，在55020条件下灼烧23h，用同于灼烧空坩埚时的
29、方法，把坩埚取出，冷却30min，称重，然后将坩埚放到茂福炉内再灼烧1小时，冷却30min，称重。直至前后两次重量差不超过0.001g为恒重，取最低值进行计算。7、将坩埚及灰分保存好以备作钙、磷的测定。3.3.7 钙的测定3.3.7.1 仪器设备凯氏烧瓶15个、100mLl容量瓶15个、25mL移液管2个、滴定管1个、250mL三角瓶15个、漏斗15个、玻棒2个。3.3.7.2 试剂组成及其配制1、盐酸：分析纯，1：3水溶液：1份浓盐酸加3份蒸馏水，混匀。2、硫酸：分析纯，1：3水溶液：1份浓盐酸加3份蒸馏水，混匀。3、硝酸：化学纯。4、氨水：分析纯，1：1及1：50水溶液。5、4.2%草酸铵
30、溶液：称取4.20g草酸铵溶于100mL蒸馏水中。6、甲基红指示剂：0.1g甲基红溶于100mL 95% 乙醇中。7、0.05mol/Ll 高锰酸钾溶液：准确称取分析纯高锰酸钾1.6g左右溶于1000mL 蒸馏水中，煮沸10min，放置过液，以玻璃丝过滤（最初数滴放弃），保存在棕色瓶中。3.3.7.3 操作步骤1、试样处理取测灰分是保留的灰分，加1：3 HCl 溶液10mL和数滴浓HNO3，小心煮沸，随即滤入100mL容量瓶中，以热蒸馏水洗涤坩埚及漏斗中的试纸，待滤液冷却至室温后，用蒸馏水定容，摇匀备用。2、样本中钙的测定（1）草酸钙的沉淀用移液管准确吸取灰化法或消化法制备的样本溶液2025m
31、L（溶液取量决定于样本中钙的含量，以耗用0.05mol/L KMnO4 标准溶液25mL左右为宜）放入250mL三角瓶中。瓶内加入2滴甲基红指示剂，溶液即呈红色。再一滴滴加入1：1氨水溶液至溶液由红色转变为黄色。再一滴滴加入1：3盐酸溶液至溶液由黄色恰变成红色（此时pH2.53.0）为止，加蒸馏水100ml，将溶液加热煮沸（注意勿使溶液外溅）。在热熔液中慢慢滴入热的4.2%草酸铵溶液10mL（边搅拌边加）。如溶液由红色转变为黄色或桔黄色，则再需滴加1：3盐酸至溶液又转变为红色为止，将溶液煮沸34min（注意勿使外溅），使溶液中草酸钙沉淀颗粒增大，易于沉淀，放置溶液过夜（或在水浴上加热2h）使草
32、酸钙沉淀更完善。（2）草酸钙沉淀的洗涤次日用定量滤纸过滤（每次倾倒滤液只需加满滤纸的1/3，否则白色沉淀向上移至滤纸边缘，造成损失），弃去滤液。用1：50氨水溶液冲洗三角瓶及滤纸上的草酸钙沉淀68次，直到沉淀中草酸根离子为止（用洗净试管接滤液23mL，在滤液中加1：3硫酸数滴，将试管加热至7585，滴加KMnO4溶液1滴，若溶液呈微红色，且30秒不褪色，说明草酸根被洗净，否则继续用1：50氨水冲洗。冲洗沉淀中草酸铵时，应沿滤纸边缘想下加氨水溶液，以使沉淀集中在滤纸中心。每次加氨水职能加到滤纸的下1/3，以免沉淀向滤纸的边缘移动。每次加氨水冲洗时，待漏斗中液体漏净后再加，如此进行，可较快洗净沉淀
33、中的草酸根离子。（3）滴定将滤纸连同沉淀一起移入原来的三角瓶中，加1：3硫酸溶液10mL，蒸馏水50mL。然后将三角瓶中加热至7585，立即用0.05mol/L KMnO4溶液进行滴定，至溶液呈微红色且30秒不褪色时即为终点，记录KMnO4溶液的体积。同时做空白测定。3.3.8 磷的测定3.3.8.1 仪器设备有10mL比色池，可在420nm下测吸光度的分光光度计、1000mL容量瓶、50mL带塞比色管、15mL刻度移液管、10mL移液管。 3.3.8.2 试剂组成及其配制（1）酸：化学纯，1：1 水溶液（2）硝酸：化学纯；（3）钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵（分析纯）1.25g，加硝酸250m
34、L。另取钼酸（分析纯）25g ,加蒸馏水400mL使之溶解，在冷却条件下将后者倒入前面的溶液，并加蒸馏水稀释至1000mL，摇匀备用。（4）标准磷溶液：将磷酸二氢钾（分析纯）105 下烘干1h，干燥器中冷却30min后，准确称取0.2195g溶于少量蒸馏水，无损转入1000mL容量瓶，加浓硝酸3mL，然后以蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用。此溶液中1mL含500g。3.3.8.3 操作步骤（1）样本处理取测灰分是保留的灰分，加1:3 HCl 溶液10ml和数滴浓HNO3，小心煮沸，随即滤入100mL容量瓶中，以热蒸馏水洗涤坩埚及漏斗中的试纸，待滤液冷却至室温后，用蒸馏水定容，摇匀备用。（2）标准曲线
35、的绘制准确吸取标准磷溶液0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，15.0mL于50mL容量瓶中，分别加入钒钼酸铵显色剂10mL。用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静置10min。以10mL溶液作参比，用10mm比色池、在420nm波长下，用分光光度计比色，测定各种溶液的光密度。以磷含量为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线。（3）试样测定准确吸取试样分解液110mL（含磷量50500克）于50mL容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10mL，定容至刻度。以空白试剂溶液为参比，按标准曲线绘制步骤显色和比色，测定样本液的光密度。由标准曲线查出试样分解液的含磷量。4 结果与分析4.1 春夏秋
36、冬四个季节比较表1 春夏秋冬四个季节比较编号干物质（%）能量(g/J)粗脂肪（%）粗蛋白（%）CF含量（%）ADF含量（%）NDF含量（%）粗灰分（%）Ca（%）P（%）BZC93.386344.03.096.7022.1446.2169.33 5.751.000.04BZCcs93.636092.02.026.8031.3248.2567.235.401.200.03BZCcs93.626709.01.269.3526.8247.9265.877.001.700.06平均93.546381.72.127.6226.7647.4667.486.051.300.04BZ-X96.6712326.
37、07.058.1417.6128.0061.185.600.360.04BZ-X93.939052.07.576.0117.7225.8455.447.360.680.04BZ-X96.278430.05.078.9121.28 30.03 65.786.460.480.03平均95.629936.06.567.6918.8727.9660.806.470.510.04BZ-Q94.6611669.06.575.7121.7831.8163.248.620.580.0394.4112682.0 7.924.2622.3735.3865.308.820.700.03 平均94.5312175.5
38、7.244.9822.0733.5964.278.720.640.03BZD93.436944.01.608.7022.1746.4862.376.901.200.05BZDcs93.155909.01.625.4020.1638.4665.789.002.000.05BZDcs93.677464.01.645.9032.1245.8765.434.001.800.03BZD93.747301.02.317.4021.3252.2467.835.601.500.03平均93.516904.51.82 6.8524.0245.7665.356.371.620.04备注：“BZ”代表巴州，“C”代
39、表春季，“X”代表夏季，“Q”代表秋季，“D”代表冬季，“”代表巴音布鲁克分场，“”代表科克马松分场，“”那拉提分场。“CF”代表粗纤维，“ADF”酸性洗涤，“NDF”中性洗涤。由表 1 可知，苔草夏季营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到7.69%，粗纤维含量达到18.87%，比其它三个季节对比来说粗蛋白质含量最高，粗纤维含量最低，还有NDF、ADF含量也比其它季节最高，所以苔草四个季节中夏季营养较为丰富。4.2 同一季节不同牧场比较编号干物质（%）能量(g/J)粗脂肪（%）粗蛋白（%）CF含量（%）ADF含量（%）NDF含量（%）粗灰分（%）Ca（%）P（%）BZC93.386344.03.0
40、96.70 22.1446.2169.335.751.000.04 BZCcs93.636092.02.026.8031.3248.2567.235.401.200.03平均93.506218.02.556.7526.7347.2368.285.571.100.03BZCcs93.6226709.01.269.3526.8247.9265.877.001.700.06BZ-X96.6712326.07.058.1417.6128.0061.185.600.360.04BZ-X93.939052.07.576.0117.7225.8455.447.360.680.04BZ-X96.278430.
41、05.078.9121.2830.0365.786.460.480.03BZ-Q94.6611669.06.575.7121.7831.8163.248.620.580.0394.4112682.07.924.2622.3735.3865.308.820.700.03平均94.5312175.57.244.9822.0733.5964.278.720.640.03BZD93.436944.01.608.7022.1746.4862.376.901.200.05BZDcs93.155909.01.625.4020.1638.4665.789.002.000.05平均93.2964.26.51.6
42、17.0521.1642.6364.077.951.600.05BZDcs93.677464.01.645.9032.1245.8765.434.001.800.03BZD93.747301.02.317.4021.3252.2467.835.601.500.03平均93.707382.51.986.6526.7253.5566.634.801.650.03表2 同一季节不同牧场比较由表 2 可知，（1）春季科克乌松分场苔草营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到9.35% ，粗纤维含量达到26.82%，比其它两个分场对比来说粗蛋白质含量最高，粗纤维含量最低。还有NDF、 ADF含量也比其它分场最高
43、，所以苔草三个分场中春季季科克乌松分场苔草营养较为丰富。（2）夏季那拉提分场苔草营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到8.91%，粗纤维含量达到21.28%，比其它两个分场对比来说粗蛋白质含量最高，粗纤维含量最低，还有NDF、ADF含量也比其它分场最高，所以苔草三个分场中夏季那拉提分场苔草营养较为丰富。（3）秋季科克乌松分场苔草比其它分场生长多一些：其中，粗蛋白含量达到4.98%，粗纤维含量达到22.07%，其它两个分场基本上不生长的。（4）冬季科克乌松分场苔草营养价值较高：其中，粗蛋白含量达到7.05%，粗纤维含量达到21.16%，比其它两个分场对比来说粗蛋白质含量最高，粗纤维含量最低，还有ND
44、F、ADF含量也比其它分场最高，所以苔草三个分场中冬季科克乌松分场苔草营养较为丰富。4.3 同一牧场不同季节比较表3 同一牧场不同季节比较牧场编号干物质（%）能量(g/J)粗脂肪（%）粗蛋白（%）CF含量（%）ADF含量（%）NDF含量（%）粗灰分（%）Ca（%）P（%）巴音布鲁克分场BZC93.386344.03.096.7022.1446.2169.335.751.000.04BZCcs93.636092.02.026.8031.3248.2567.235.401.200.03平均93.506218.02.556.7526.7347.2368.285.571.100.03BZ-X96.6712326.07.058.1417.6128.0061.185.600.360.04科克乌松分场BZCcs93.626709.0 1.269.35 26.8247.920 65.877.00 1.70 0.06 BZ-X93.939052.07.576.
