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1、第一章 组织学绪论,一、组织学的研究内容和意义 组织学:是研究机体微细结构和 相关功能的科学。其研 究内容包括细 胞、组织 和器官系统三部分,又称 显微解剖学。,细胞:是人体结构和功能的最小 单位,由细胞膜、细胞质和 细胞核构成。在电子显微 镜下还可以观察到细胞内 部更细微的结构,即超微 结构。,在电子显微镜下细胞膜的结构表现“两暗夹一明”的单位膜结构,组织:结构相同或相似的细胞群及 细胞外基质构成组织,人体 的组织可分为四大类型,即 上皮组织,结缔组织,肌组织 和神经组织。器官:不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。系统:若干功能相关的器官构成系统。,1.光学显微镜(简称光镜)的发明
2、与细胞、组织概念的提出 裸眼分辨率:0.2mm 光镜分辨率:0.2m 即 210-6 m2.细胞学说的提出和组织学的建立 3.电子显微镜(简称电镜)的发明和超微 结构的发现 电镜分辨率:0.2nm 即 210-10 m4.当代组织学,二.组织学的发展简史和当代组织学,1.对组织学内容的审视角度2.注意形态与功能的统一3.注意培养观察与空间思维 的能力,三.组织学的学习方法,(一)光学显微镜技术 1.石蜡切片术 取材和固定;脱水和包埋;切片和染色;封片。HE染色:为组织学最常用的染色 法,即苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining),其中,苏木精为碱性染料主要使,
3、四.组织学技术简介,细胞核内的染色质及细胞质内的核糖体染成紫蓝色;伊红为酸性染料主要使细胞质和细胞外基质中的成分染成红色。嗜碱性:组织结构对于碱性染料亲和力强的性质。嗜碱性结构可被苏木精染成紫蓝色。嗜酸性:组织结构对于酸性染料亲和力强的性质。嗜酸性结构可被伊红染成红色。,中性:组织结构对于两种染料亲和 力都不强的性质,HE染色着 色淡。其他切片技术:火棉胶包埋,冰冻 切片,涂片,铺片,磨片。其他染色法:硝酸银神经细胞(黑),醛复红弹性纤维(紫),甲苯胺蓝肥大细胞(紫 红色),1.透射电镜术 电子密度高:当电子束投射到密 度大吸附重金属多的结构时,电 子被散射的多,因此,射落到荧 光屏上的电子少
4、而呈暗像,电镜 照片呈黑或深灰色,称为电子密 度高。反之称为电子密度低。2.扫描电镜术,(二)电子显微镜技术,组织化学术:为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。细胞化学术:前述技术用于游离细胞样品 则称为(cytochemistry)。,(三)组织化学术,1.一般组织化学术 基本原理是在切片上添加某种试剂,和组织 中待测反应物发生反应,其终产物或为有色 沉淀,以用光镜观察,或为重金属沉淀以用电 镜观察。(1)糖类:PAS反应,pariodic acid Schiff react
5、ion(2)脂类:油红、尼罗蓝及苏丹类染料(3)核酸:福而根反应DNA;甲基绿-派若宁反映DNA绿色,RNA红色。,(4)酶类:酶组织化学术。通过显示酶的 催化活性以表示酶的存在。2.免疫组织化学术immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检 测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性,当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物,其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后,与标记物相结合,即成为标记抗体。,用标记抗体与组织切片孵育,抗体 则与组织中相应抗原特异性结合在 显微镜下通过观察标记物而获知肽 或蛋白质的分布部位。常用的标记 物有荧光素,辣根过氧化物酶、胶 体金。3.原位杂交技术即核酸分子杂交组 织化学术。,其原理为用带有标记物的已知碱基序列的核酸探针，与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性原位结合，即杂交。然后，通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量。常用的标记物有放射性核素（35S，32P，3H等）和地高辛。,(四)放射自显影技术(五)图象分析术(六)细胞培养术和组织 工程,
