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1、基因工程习题1、下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 A B C D2、以下各种酶与其作用部位不相匹配的是：A、解旋酶磷酸二酯键 B、肽酶肽键C、ATP水解酶高能磷酸键 D、限制酶磷酸二酯键3、科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体，相关叙述中正确的是 该技术将导致定向变异DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料受精卵是理想的受体 A B C D4、以下有关蛋白质工程是叙述，不正确的是：A.蛋白质工程发展的基础是基因工程，是延伸出来的第
2、二代基因工程B.蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性不是蛋白质工程应用的体现D.蛋白质工程既能改造现有的蛋白质，也能制造新的蛋白质5、利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是：A棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及mRNAC山羊乳腺细胞中检测到人生长素DNA序列 D酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白6、下列关于基因文库的说法不正确的是：A.某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库 B. 取出果蝇某细胞中全部mRN
3、A，通过反转录产生的全部DNA片段称为该果蝇的基因组文库C.某种生物的基因组文库大于cDNA文库 D.可以从基因文库中获取目的基因7、下列关于构建基因表达载体的叙述不正确的是：A.是基因工程的核心B.其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时能表达和发挥作用C.一般用抗生素抗性基因作为目的基因D.基因工程中的受体细胞有所不同，基因表达载体的构建也有所差别8、有关PCR技术的说法，不正确的是：APCR中用到的Taq酶与体内DNA聚合酶相比具有热稳定性 BPCR技术的原理是DNA双链复制C利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列DPCR扩增中必须有解旋酶才
4、能解开双链DNA9、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是GGATCC ,;，限制酶II的识别序列和切点是GATC。根据图示判断下列操作正确的是：A质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割B质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割C目的基因和质粒均用限制酶切割 D目的基因和质粒均用限制酶切割10、某线性DNA分子含有3 000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是 a酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)1 600；1
5、100；300800；300A.在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个Ba酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接 Ca酶与b酶切断的化学键分别为磷酸二酯键和氢键D用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后， 序列会明显增多11、下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是()。A构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶B愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株C卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点D抗虫棉
6、有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传12、（2014天津卷）4.为达到相应目的，必须通过分子检测的是 A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B.产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D.21三体综合征的诊断13、如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中Pst 、Sma 、EcoR、Apa为四种限制性内切酶。下列说法错误的是 A图示过程是基因工程的核心步骤 B表达载体构建时需要用到限制酶Sma C抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构14、以下为形成cDN
7、A过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是A催化过程的酶是RNA聚合酶B过程发生的变化是引物与单链DNA结合C催化过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温D如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%15、右图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是 ()A获得该mRNA的最佳材料是受精卵B构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌C完成过程必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶D探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌16、（14江苏卷）23.下列关于基因工程
8、技术的叙述正确的是 A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达17、（2013江苏卷）22.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D.一定
9、要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞18、(2013安徽卷)6. 下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是A 根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B 外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C 重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D 放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置19、转基因生物作为生物反应器，用于生产人们所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。图是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。请据图回答： (1)构建表达载体的A过程中，需要用到的工具
10、酶有 和 。 (2)B过程中，常用 处理使细菌转化为感受态细胞，从而利于重组质粒的导人。D过程采用的方法是 。若把重组质粒导人动物细胞，常采用的方法是 。 (3)E过程采用的技术是 ，主要包括 和 两个阶段。该技术的原理是 。 (4)如果利用DNA分子杂交技术对再生植株进行检测，F过程应该用 作为探针。20、如图表示转基因马铃薯的培育过程，请回答相关问题：(1)如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA反转录产生的_片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做马铃薯的_。(2)重组质粒中，目的基因的两端还必须有_和终止子。用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，采用_技术检测转基因马铃
11、薯的_上是否插入了目的基因，同时还要采用_技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达。(3)培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外，还需添加的物质是_，添加卡那霉素的作用是_。21、（新课标卷） 植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：（1）理论上，基因组文库含有生物的 基因；而cDNA文库中含有生物的 基因。（2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中 出所需的耐旱基因。（3）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物
12、 的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的 ，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的 是否得到提高。（4）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时，则可推测该耐旱基因整合到了 （填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。22、（2009天津高考理综）水稻种子中70的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子；同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。(5) 为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻
13、品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答：图中基因组文库_(小于/等于/大于)cDNA文库。B过程需要的酶是_；A、C过程中_(可以不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。目的基因和除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中_和_为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_。23、（2012天津高考理综）生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理蛋白质-DNA复合体获得DNA片段信息的过程图。据图回答：(1)过程酶作用的部位是 键,此过程只发生在非结合区DNA。过程酶作用的部位是 键。(2)、两过程利用了酶的 特性。(3)若将得到的DNA片段用于构建重组
14、质粒,需要将过程的测序结果与 酶的识别序列进行比对,以确定选用何种酶。(4)如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶,则其识别、结合的DNA序列区为基因的 。(5)以下研究利用了生物分子间特异性结合性质的有 (多选)。A. 分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提取rRNAB. 用无水乙醇处理菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上的光合色素C. 通过分子杂交手段,用荧光物质标记的目的基因进行染色体基因定位D. 将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合,终止后者翻译, 延迟果实成熟24、（14天津卷）8.嗜热土壤芽胞杆菌产生的-葡萄糖苷 酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更
15、好地应用，开展了以下试验：.利用大肠杆菌表达BglB酶（1）PCR扩增bglB基因时，选用 基因组DNA作模板。（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 。.温度对BglB酶活性的影响（4） 据图1、2可知，80保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。A.50 B.60 C.70 D.80.利用分子育种技术提高BglB酶的
16、热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。（5） 与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）。A. 仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变25、（2014山东卷）36.人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：（1）htPA基因与载体用_切割后，通过DNA连接酶连接，
17、以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_技术。（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要经过_，才具备受精能力。（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的_。（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到_，说明目的基因成功表达。26、（14年12校联考）2006年我国培育出首例含绿色荧光蛋白基因(GFP)的克隆猪，它标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为该绿色荧光蛋白转基因克隆猪的
18、培育过程示意图，请据图回答下列问题。(1)在基因工程操作步骤中，过程称为 。过程实现的关键是对母猪进行 处理。图中重组 细胞的细胞核来自 细胞，早期胚 胎移入受体子宫后继续发育，经桑椹胚、囊胚和 胚最终发育为克隆猪。(2)克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异 常凋亡有关。Bcl2基因是细胞凋亡抑制基因，在PCR过程中可通过检测cDNA中Bcl2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl2 mRNA的分子数，从而反映出Bcl2基因的 转录水平，用来判断早期胚胎的成活几率。图中X表示 过程，PCR过程第一轮循环的模板是 。(3)若科学家在实验室里实现了“将猪的卵细胞培育成囊胚”的实验，则在以下
19、推测中，有可能正确的是(多选) A如果该囊胚真能发育成成体，则其遗传特性和母本完全相同B如果该囊胚真能发育成成体，其性别是男性的概率为1/2C如果使囊胚的染色体数目加倍，得到的将是一个纯合的二倍体D如果该囊胚真能发育成成体，该个体患遗传病的概率会大大增加27、（2012江苏卷）32图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp 、BamH 、Mbo 、Sma 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题：（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。（2）若用限制酶Sma 完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为。（3）若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma 完全切割，产物中共有种不同DNA片段。（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。
