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1、掌握血涂片及骨髓涂片制作方法。掌握碱性蛋白、过氧化物酶及核酸显示的原理。熟悉上述化学成分在细胞中的分布。了解上述化学成分显示的方法。,一、目的要求,二、实验内容和实验方法,细胞内碱性蛋白的显示 DNA和RNA的显示 过氧化氢酶的显示,细胞内碱性蛋白的显示,实验原理 标本经三氯醋酸处理抽提掉核酸后,用不同pH值的快绿染液分别染色,使细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。,实验方法 1.临时装片的制备。2.固定:70%乙醇,10min。3.7090,5%三氯醋酸,15分。4.清水冲洗。5.染色:碱性固绿染色5min。6.清水冲洗。7.晾干,镜检。,DNA和RNA的显示,实验原理 利用碱性染料甲基绿
2、和派洛宁处理细胞,可使其中的DNA和RNA呈现出不同的颜色,这种颜色上的差异是由DNA和RNA聚合程度的不同所引起。,实验方法蟾蜍血涂片DNA和RNA的显示 1.制备蟾蜍血涂片:同上。2.固定:70%乙醇,5min,晾干。3.染色:甲基绿派洛宁,10min。4.清水冲洗。5.分化:纯丙酮。6.镜检。,1.临时装片的制备。2.固定:70%乙醇,10min。3.7090,5%三氯醋酸,15分。4.清水冲洗。5.染色:碱性固绿染色5min。6.清水冲洗。7.风干,镜检。,1.制备蟾蜍血涂片:同上。2.固定:70%乙醇,5min,晾干。3.染色:甲基绿派洛宁,10min。4.清水冲洗。5.分化:纯丙酮。6.镜检。,碱性蛋白 DNA和RNA,过氧化氢酶的显示,实验原理 过氧化氢酶系能把许多胺类物质氧化为有色化合物,若用联苯胺混合液处理标本,细胞内的过氧化氢酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色的联苯胺腙。,实验方法家兔骨髓细胞中过氧化氢酶的显示取材。2.固定:0.5%硫酸铜,30s1分钟。3.氧化:联苯胺,36分钟。4.清水冲洗。5.染色:1%番红,12min。6.清水冲洗。7.晾干镜检。,