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1、2023/4/30,课件,1,第一节 病毒感染的检查方法,一 标本的采集与送检（principle of collection specimen）1、采集急性期标本2、污染标本应用抗生素抑制标本中细菌或真菌的生长3、低温保存，快速送检4、血清学实验检查抗体（双分血清）,2023/4/30,课件,2,二、病毒的分离培养与鉴定（virus isolation and determination）,（一）病毒的分离培养动物接种 选择易感动物及接种部位，观察发病情况鸡胚培养 不同病毒选择不同接种部位（绒毛尿囊膜，尿囊腔，羊膜腔，卵黄囊），分离流感病毒最常用。细胞培养：分离病毒最常用的方法（1）原代细胞
2、来源于动物、鸡胚、人胚组织细胞，对多种病毒敏感，但只能传2-3代。（2）二倍体细胞在体外分裂50-100代后仍保持2倍体染色体数目的单层细胞。（3）传代细胞能在体外无限传代的细胞多由癌细胞或二倍体细胞突变而来。,2023/4/30,课件,3,病毒在培养细胞中增殖的指标,细胞病变效应（CPE）：即某些病毒在细胞内增殖引起的特有的细胞病变（细胞变圆、聚集、坏死、脱落等）红细胞吸附干扰现象细胞代谢改变（pH）,2023/4/30,课件,4,正常细胞,病变细胞,2023/4/30,课件,5,（二）病毒的鉴定核酸类型、理化性状、形态、血清学鉴定、基因测序和生物对比。（三）病毒的数量与感染性测定 1.50
3、组织细胞感染量 2.红细胞凝集试验 3.空斑形成试验,2023/4/30,课件,6,三、病毒感染的血清学诊断,用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体以诊断病毒性疾病（中和实验、补体结合实验、血凝抑制实验、凝胶免疫扩散等）,2023/4/30,课件,7,四、病毒感染的快速诊断,(一)形态学 电镜和免疫电镜直接观察病毒 光镜 大病毒 和包涵体,2023/4/30,课件,8,2023/4/30,课件,9,2023/4/30,课件,10,2023/4/30,课件,11,2023/4/30,课件,12,2023/4/30,课件,13,2023/4/30,课件,14,（二）检测病毒蛋白抗原用已知特异性抗体直
4、接检测病毒蛋白抗原（简便、敏感、特异）常用方法：免疫荧光技术（IF）固相放射免疫测定（SPRIT）酶免疫技术（EIA）等。,2023/4/30,课件,15,（三）检测病毒特异性IgM抗体,检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染或证明病毒复制。,2023/4/30,课件,16,（四）检测病毒核酸,1 核酸杂交 斑点杂交（dot hybridization）原位杂交（in site hybridization）DNA印迹杂交（Southern blot）RNA印迹杂交（northern blot）2 核酸扩增聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR DNA）连接酶链
5、反应（ligase chain reaction，LCR）反转录PCR（Reverse transcrptase PCR，RTPCR(RNA)3 基因芯片技术（gene chip）,2023/4/30,课件,17,第二节 病毒感染的特异性预防,一、人工主动免疫1、灭活疫苗2、活疫苗3、重组载体疫苗4、亚单位疫苗二、人工被动免疫1、免疫球蛋白2、细胞免疫制剂,2023/4/30,课件,18,第三节 病毒感染的治疗,药物治疗核苷类药物抑制病毒基因复制 抑制病毒基因转录蛋白酶抑制剂天然药物（中草药）其他药物（金刚烷胺）干扰素及干扰素诱生剂治疗基因治疗（反义寡核苷酸、抑制病毒复制）免疫治疗（特异性抗体、免疫调节剂、治疗性疫苗等,
