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1、细胞学分类,妇科宫颈细胞学（GYN）防癌普查（查宫颈癌前病变与早期癌）随诊 初筛非妇科细胞学（NonGYN）（脱落细胞学与穿刺细胞学）肿瘤诊断,非妇科细胞病理学应用范围,脱落细胞学：取自然脱落的细胞或刮取组织表面细胞涂片痰 胸腹水 尿液 脑脊液 食管拉网 组织溃疡面各种内窥镜刷片：支气管镜、食管镜、胃镜、肠镜、喉镜冲洗液沉淀涂片：支气管肺泡灌洗液 腹盆腔冲洗液,非妇科细胞病理学应用范围,穿刺细胞学：用细针抽取细胞涂片 浅表器官或肿块-直接穿刺 深部器官组织-B超或影像学引导下穿刺,痰脱落细胞学,作用：肺部病变，肺部肿块的检查方法：连续送晨痰36天（晨起洗漱后咳痰）装入干净宽口痰盒或瓶子内，不用
2、固定 室温（26）保存 支气管纤维镜检查后送检最佳,送痰注意事项,痰必须从肺深部咳出（不能吐口水）痰多者送第二口痰 血丝痰要送检（不限晨痰）当天未能送检的可冷藏（4）涂片方法：选取痰丝后直接推拉压片,痰检查癌细胞,阳性率在4080%之间 与肿瘤部位、大小、痰液质量相关确定小细胞癌与非小细胞癌两大类的准确性在95%以上鳞状细胞癌与腺癌细胞分类准确率：80%以上。可用于肺癌的术前诊断与非手术病人治疗方案的选择，包括靶向药物的应用。可检出支气管内的早期癌,痰涂片见到的癌细胞,小细胞癌细胞,腺癌细胞,鳞癌细胞,大细胞癌细胞,体腔积液涂片细胞学检查,作用：决定胸腔、腹腔、心包腔等体腔积液性质（良性？恶性
3、？）术中体腔冲洗液找癌细胞协助分期及治疗送检方法：抽取积液（10100ml）当天送检（不必加固定液）注意：遇积液凝固者，抽液前备好抗凝剂（加入与积液等量的抗凝液）不能及时送检的应低温保存标本 涂片方法：离心沉淀后取白细胞层涂片,积液取材制片方法,取自：徐海苗 20118 长春细胞学培训班课件,体腔积液涂片查找癌细胞,作用：诊断有无肿瘤转移？转移癌主要来源 胸、心包积液：肺、乳腺、胃肠道、淋巴瘤 腹盆腔：胃肠道、卵巢、胰腺、胆囊、淋巴瘤积液找到癌细胞说明：肿瘤的体腔播散（晚期）腹盆腔冲洗液找到癌细胞：术后应做化疗鉴别1：恶性间皮瘤（体腔原发肿瘤）（难与转移癌细胞鉴别 需做免疫组化协助）2：炎症（
4、化脓 结核）、心衰、肝硬化等引起的非肿瘤性积液,积液见到的癌细胞,肺癌胸水,乳腺癌胸水,胰腺癌腹水,淋巴瘤腹水,积液涂片,A 恶性黑色素瘤胸水 B 肺腺癌胸水 C乳腺癌术后腹水 D肺小细胞癌胸水,A,B,C,D,非肿瘤性积液,结核性积液胸膜炎,化脓性胸膜炎,间皮细胞增生,尿液沉淀涂片,导尿沉淀涂片见增生尿路上皮细胞,脑脊液沉淀涂片见转移癌细胞,其它体液的涂片（液基涂片）,各种纤维镜检查的刷片,食管镜检查胃镜和十二指肠镜检查结肠镜检查支气管镜检查乳腺导管镜检查膀胱镜检查活检的同时做刷片或单独刷片,支气管镜刷片肺癌诊断,刷片见到的腺癌细胞,术后肺腺癌的组织切片,胃镜涂片见到的胃印戒细胞癌细胞,肿瘤
5、标本、浅表肿瘤或溃疡的刮片,术中送检冰冻时，先行做组织印片或刮片口腔、鼻腔、鼻咽肿物刮片皮肤溃疡刮片,乳头Pagets病,乳头糜烂,切片乳头皮肤有肿瘤浸润可刮取表面细胞涂片找癌细胞,鼻腔恶性黑色素瘤涂片,肿瘤穿刺细胞学,浅表肿瘤的细针穿刺深部组织脏器的经皮穿刺纤维镜下的穿刺（超声引导下的穿刺）,细针穿刺方法78号针头+1020 ml 注射器备好95%酒精作固定用,左手固定肿物右手持针刺入肿物负压抽吸 反复几次可向不同方向多穿几针退出前先消除负压抽出后涂片前退下针头，针筒充气后再装上针头,细针穿刺涂片,将针头内容物（仅在针头内有抽出物！）推到玻片上,细针穿刺涂片,推片（如做骨髓涂片样），然后立刻
6、放入固定液（15分鈡）,穿刺方法,穿刺方法,甲状腺穿刺,病人取坐位或仰卧位均可,甲状腺穿刺,超声引导下的甲状腺穿刺,甲状腺穿刺,正常滤泡细胞,甲状腺乳头状癌细胞,甲状腺乳头状癌,甲状腺乳头状癌的胸水涂片,甲状腺穿刺,作用-筛选手术病例特点：易出血（一个方向抽吸/换穿刺点）诊断：高分化滤泡癌与良性腺瘤鉴别困难（组织学靠肿瘤的血管和包膜浸润诊断）乳头状癌可作出诊断 可提示桥本氏甲状腺炎、结节性甲状腺肿等非肿瘤病变 颈淋巴结 FNA 有助诊断,甲状腺滤泡性肿瘤,乳腺穿刺,乳腺病变：纤维囊性乳腺病 导管内乳头瘤 纤维腺瘤 乳腺癌 叶状肿瘤方法：细针穿刺/乳头溢液涂片临床疑为乳腺癌：术前穿刺/术中冰冻切
7、片 尽量不做活检,乳腺癌延期手术病例的生存率 延期时间（生存率%）5年 10年 15年 15天内 86.9 70.0 62.2 16-30天 74.4 50.0 45.5 1-3个月 73.4 50.6 48.7 3个月 59.5 37.7 30.3,乳腺癌延期手术：经活检术后再行根治或改良根治术,延期手术明显降低乳腺癌病人的生存率,乳腺穿刺,乳腺纤维腺瘤（穿刺细胞学与术后病理）,乳腺穿刺,乳腺浸润性导管癌术前穿刺见大量癌细胞,术后乳腺癌病理切片对照,乳腺FNA 761例次 阳性324（38）例(1999年)细胞病理对照 260例,乳腺癌195例(+)143()17（-）35 敏感性 160/
8、195=82.1%非癌病变 65例（-）假阳性 0（在中大肿瘤医院的经验小结）,乳腺癌FNA假阴性原因分析（35例涂片复查）,乳腺首次手术病例冰冻切片率（1999年）,在中大肿瘤医院的经验小结,穿刺（+）-手术/冰冻切片-手术（+-）（-）冰冻切片手术乳腺癌细针穿刺（FNA）敏感性 80%+-相关因素 肿瘤大小 部位 组织类型 取材技术 诊断准确性 诊断原则 宁紧勿松因使用新辅助化疗，现多用粗针活检切片法,临床怀疑乳腺癌时的处理建议,芯针活检（core needle biopsy，CNB）,20世纪90年代，新型芯针活检技术在影像学引导下,采用枪式器械夹持14-16G（外径：1.6-2.1mm
9、）核芯针，从病变肿块切割取出2cm长样本4-10余条，制成石蜡切片，通过光镜观察到组织结构及免疫组化及分子生物学检测，为临床开展新辅助化疗及靶向治疗提供了重要依据。CNB检查的开展，无疑是微创病理学的一大进步。,肺穿刺（经皮或经支气管）,用途：其他方法（痰、支气管镜检）未能确定性质的肺肿物尤其合适于不能手术的病例（如肿瘤晚期或不能承受手术者）一般而言 能手术的病例术前不主张做肺穿刺在影像学引导下进行,经皮肺穿刺,腺癌细胞,鼻咽癌肺转移（经皮肺穿刺）,经支气管肺穿刺,经支气管肺穿刺,超声引导下的经支气管镜纵膈淋巴结穿刺/肺穿刺,超声引导穿刺位置并测出病变深度,低度恶性粘液表皮样癌的超声引导下支气
10、管镜肺穿刺,胰腺与胃、十二指肠关系示意图经胃还是经肠穿刺取决于肿瘤的部位,内镜下的胰腺穿刺,淋巴结穿刺,良性病变：淋巴结炎（结核性 化脓性 坏死性 肉芽肿性）瘤样病变:血管滤泡性淋巴结肿大、伴巨大淋巴结的窦组织细胞增生症、嗜酸性肉芽肿等淋巴瘤：霍奇金和非霍奇金氏淋巴瘤（细胞学诊断和分类有较大的困难）转移癌或肉瘤：来自各器官脏器的肿瘤 锁骨上淋巴结的转移意味着肿瘤的晚期,颈淋巴结穿刺（肺癌转移）,淋巴结穿刺（非霍奇金氏淋巴瘤）,各种肿瘤穿刺,浅表肿块穿刺前列腺穿刺活检同时加涂片子宫直肠窝穿刺骨及软组织肿瘤穿刺头颈部肿瘤（如涎腺肿物）肝及腹部肿块穿刺,腮腺淋巴乳头状囊腺瘤的术前穿刺与术后病理对照,
11、穿刺涂片见成片嗜酸性上皮细胞块与背景散在的小淋巴细胞,组织切片见肿瘤由嗜酸性细胞腺体（伴囊状扩张）与大量的淋巴细胞间质,肾母细胞瘤穿刺,胚芽,上皮,间叶,肾母细胞瘤,软组织平滑肌肉瘤的穿刺涂片,软组织横纹肌肉瘤穿刺涂片,谁做穿刺？,欧洲 细胞学工作人员（穿刺+诊断）美国 临床、放射诊断、细胞学医生 穿刺取材 细胞病理医师阅片诊断,细胞块的制备及作用,制备：送检标本富含细胞时，可将标本离心沉淀后，用福尔马林固定或加琼脂凝固后作石蜡包埋切片（与组织切片制备方法相同）优点：可多切片观察 可用于免疫组化或分子基因检测作用：有利于疑难病例诊断 如小细胞肿瘤（淋巴瘤？未分化癌？小细胞肉瘤？）、恶性间皮瘤？
12、腺癌？,细胞块的制备,胸水细胞块切片,胸水细胞块切片,切片见到的异型腺体,免疫组化CEA（+）,胸水细胞块的制备有利于肺癌的分类与EGFR等标记物的检测2011.2的国际多学科肺癌分类要求将胸水细胞块的制备列为常规项目,淋巴结转移性黑色素瘤IHC,淋巴结转移性恶性黑色素瘤cell block切片 显示肿瘤细胞HMB-45+,FNAC涂片 显示弥散片状分布的肿瘤细胞为圆形、卵圆形及多角形体积中等大小，胞浆较丰富红染，核圆形多呈偏位状，单核或双核，有明显的大核仁。,FNAC,cell block,持笔式持续负压细针穿刺北京友谊医院 余小蒙,持笔式持续负压细针穿刺,采用持笔式持续负压细针穿刺技术（外
13、径0.8mm普通注射针），由于获得的标本量较多，并通常含有微小组织片段，针吸涂片也能够显示出组织结构。,持笔式持续负压细针穿刺,乳腺小叶,乳腺导管内乳头状瘤,乳腺癌,甲状腺乳头状癌,乙醇凝固甲醛固定法,放入乙醇中 1分钟,乙醇凝固甲醛固定法,浸入中性甲醛之中固定2-8小时，便可放入脱水盒中完成脱水、包埋过程,Kikuchi,弥漫大B,反应性增生,霍奇金淋巴瘤,霍奇金淋巴瘤,淋巴结cell block 低倍：1.25X,FNAC涂片,CNB切片,cell block切片,手术标本切片,导管内癌FNAC、cell block、CNB、术后切片观察,CNB切片导管内癌ER标记强阳性,FNAcell
14、block切片导管内癌ER标记强阳性,CNB切片导管内癌CerbB-2标记阳性,FNA导管内癌cell block切片CerbB-2+,导管内癌cell block IHC标记,导管内癌粗针活检标本,乳腺浸润癌cell block切片 与手术标本组织切片Her-2检测,cerbB-2,FNA Cell block Her-2,Her-2基因为橙色，着丝粒信号为绿色，二者（Her-2基因/着丝粒）比例2，证实肿瘤细胞内存在Her-2基因扩增。,术后标本Her-2,细胞块标本Her2,Burkitt 淋巴瘤的FNAC涂片及cell block切片的观察,显示单一分化的幼稚淋巴细胞中有数个胞质空亮内
15、有易染颗粒的巨噬细胞呈星空状分布。IHC：CD-10、20+，Ki67+98%EBER检测常为+,CD20,cell block切片,FNAC,液基细胞制片法的应用,使用专门用于非妇科细胞学标本的固定液（公司提供）将穿刺物直接注射入带固定液的标本瓶内（可反复抽吸洗出细胞）或将纤维镜细胞刷子直接放入固定液瓶内洗涤胸腹水等体液标本由细胞室处理有利于保存细胞（人工涂片会因固定不及时造成细胞退行性变，影响诊断）有利于细胞量少的标本（能尽多的收集细胞）可多量制片用于免疫组化等特殊检测,液基标本的制片方法,TCT2000,标本与玻片准备,液基涂片制片原理,传统涂片与液基涂片,液基细胞制片法,常规人工涂片细
16、胞分布不均 有退变,液基固定 TCT制片细胞结构形态保留很好有利于观察诊断,液基涂片胸水见到的癌细胞,非妇科细胞学,用途广泛（几乎全身各器官、组织均可取材）取材方便（尤其是脱落细胞与浅表肿瘤穿刺）可反复取材 损伤少 副作用少送检方便（标本前期处理简单）诊断准确性与细胞学诊断医生水平密切相关（要有病理学基础与长期的细胞学诊断经验）属于诊断性报告：准确性更重要,送检注意事项,送检单填写字体清楚（姓名 性别 年龄 标本种类 医院 科室 联系方法等）提供病史：尤其是穿刺细胞学 取材部位及方法、送检标本种类 标本固定：涂片后立即（10秒内）固定 固定液：95%酒精（涂片前准备好）标识：唯一性 准确与清晰
17、标本保存：低温,细胞学诊断准确性评价-与多因素相关,客观因素-肿瘤部位、大小、组织类型、分化程度（影响取材与阅片诊断）主观因素-取材方法的选择与技巧涂片质量 固定 染色 实验室设备与操作细胞病理医生的阅片与诊断水平 实验室的质量控制（减少漏诊与误诊）,细胞病理学报告方式,文字性书写，不用数字式（涂片质量，细胞形态，诊断，建议）如：()涂片找到癌/恶性细胞（分类）()涂片见可疑恶性细胞 涂片见考虑建议/形态与符合（）涂片见非典型细胞，意义不明()涂片未见癌细胞。()仅见血细胞/未见细胞成分/细胞量太少,201010在中国和美国同时发行,正确理解细胞学报告,提示质量不好-重送注意诊断与临床所见是否
18、一致 必要时提出复查（+）可作为确诊依据，必要时加活检（-）不能除外恶性的可能期望值与细胞学诊断的局限性矛盾正确选择运用细胞学检查方法,假阳性原因,1涂片细胞少，临床热切期望下企图以少量异型细胞下诊断2人为变态细胞肿胀变大3染色过深+人为变态 造成恶性细胞假象4非典型增生病变的过诊断保存良好（固定、染色）数量丰富的细胞涂片 正确诊断的前提,病理学与细胞学的关系,病理学 细胞学取材 切取组织块 取细胞成分 切片 涂片 观察 细胞形态及组织结构 细胞形态及细胞排列,病理学与细胞学,与病理学相比，细胞学只能见到无组织结构的细胞，因此诊断及分类的难度更大，因而准确性会降低宫颈原位癌的切片 细胞涂片可能诊断为H-SIL 疑癌 癌,广州金域医学检验中心开展上述所有非妇科细胞学及宫颈细胞学,欢迎送检！谢谢！,爱沙尼亚：塔林,
