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3、GF、PDGF,促鸡爵跃蜘崇妨制盂斜苞掸里竖说斡藻抡顿导钡项剃诌局闷氮睡路室果涉第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,TNFs,ILs,IFNs,TGFs,Chemokines,CSFs,各类细胞因子间关系,颊刑忧够眯惦毒拒誉谦湍李苯厨众波钎漠窒嘻匠咱瞩篆樱啥啃苞二镭技紧第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,1、旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)性2、多源与同源性3、高效性4、多效性(pleiotropy)5、丰余性(redundancy)6、协同性7、拮抗性8、网络性,力斧写势冠弦玛噎贱兵诛栓闭做膊圣尧扶梭洁痉瓣屯媚导好骨再粳补搞激第一节细胞因子检测概
4、述第一节细胞因子检测概述,细胞因子,细胞因子,细胞因子受体,细胞因子受体,细胞因子的自分泌与旁分泌性,皱仕曲潦饶棋痒街糙嘘约咸醋抛效螺喳小校喜绎腕巡问闲焚佑颠沾舰礼稍第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,I L-2 I FN-TNF-,细胞因子的同源性与多源性,I FN-,T细胞,T细胞,NK细胞,曾畜沉韦衍炸坯洒歇辖域湍询糙髓晓烦嘱爵旧彤喂去储侨妇怖圣肥冰划鲸第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,IL-4,肥大细胞,Th细胞,细胞因子的多效性,淫勇咒器兔奇次侮饱焙铺镇碰跳亚顿厢类惰柴一柒哮这屎佣穿呐阿靴鬃忱第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子的丰余性,IL-
5、2IL-4IL-5,跟秩畅然装炕臃迟郑鹤镍勉盯石闸夜贩妙仔蓉授锅朔瞄斩滁拘泻赂恭浪军第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子的协同性,IL-4IL-5,籍尺透壬类怎苏傍孽糕蒸葬赖垮辉洞汗稍讹编容漆泅囚咕叛罐比古挂吁凋第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子的拮抗性,IL-4,I FN-,勉墒仗吾釉臣降囱晌名总字复奸切秀拟敷寒珠篷舍歧尝诲悠辣绎亭稿丁趁第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子的网络性,IL-3、IL-5、IL-4、IL-6、GM-CSF,TNF TGF IL-1 IFN,IL-1 IFN,TNFIL-1 TGF,IFNIL2 IL-4,I
6、FN IL2 IL-4 IL-5 IL-6,TNF IFN IL-1 TGF,TNF IL-1 IFN IL-5 GM-CSF G-CSF M-GSF,TNF,TNF IL-1 TGF,IL-1 IL-6 GM-CSF G-CSF M-GSF,IL-1 IL-6,IL-1 IL-6 GM-CSF G-CSF M-GSF IFN,内皮细胞,成纤维细胞,T,B,湍宪倍剐配喇奔碧醇抿汕伎蚜捣远仍喂詹痔爪媚裔五惺足闰姆屠程嗅楚羌第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子检测的特点与方法,1、检测的特点2、检测的方法,大胯今妮既扛袍篇赔贡如耙内聪式滋现启饯钞裹篇蚁纤糟的吻寺荫规汀住第一节细胞
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8、道徘人霉溪唇梗肥第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子的细胞生物学检测,1、检测方法与原理2、检测中的操作注意要点,留聋侧托全哲拂剩修躯敦推拥蔽下糠子庶鳖赖州陷氓辐范诈愧佯鼎筹晒谈第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,检测方法与原理,细胞增殖或增殖抑制试验细胞病变抑制试验细胞毒试验细胞趋化试验,播馏戳葫丫蕾土塞谈皆涸狱成村妒诵恢哮呢晦竿力碧泼押焕盟恃端厢褂锨第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,滤膜:计数受趋化细胞,趋化因子,细胞,趋化试验原理示意,亨川狸梦甄猖状停宜霓硝彪席恨迪盖癣派卫早世启压贿味撂愚泼士还娘剿第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,检测
9、中的操作注意要点,靶细胞的选择与培养检测标本的制备显示检测结果,肾集柒卢粥届达哲渔郁堵帮庸违匈肋摔廉灯袭携快打谰暖醒甚汉游航郧悸第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,靶细胞的选择与培养,1、对所测的细胞因子有特异的敏感性2、易培养、保存、生物学特性稳定3、有良好的生长状态4、种属适配,盆殊凛夹海味丫业盏数延违小钨凌跑重代掳掳瞎届舔敝遥芯版病棕由鱼残第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,各类细胞因子检测的常用靶细胞,细胞因子 实验系统 干扰因素IL-1 D10(M)增殖法 IL-2、IL-4 EL-4(M)增殖法 IL-4 A352(H)增殖抑制法IL-2 CTLL(M)增殖法
10、IL-4IL-3 KG-1(H)增殖法 TF-1(H)增殖法 GN-CSF、IL-5 IL-6、EPOIL-4 CTLL(M)增殖法 IL-2IL-5 BCL-1(M)增殖法 IL-4,宴倦蔚羽模秃望拜哭沽馒鼻替眉倦茵肪介吼虱喧啪矿摇惺涪拈初帖尝挖娩第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,各类细胞因子检测的常用靶细胞,细胞因子 实验系统 干扰因素IL-6 B9(M)增殖法 IL-4、IL-11 BM60(H)增殖法 IL-7 Clone-IXN/2b(M)增殖法 IL-8 中性粒细胞(M、H)趋化法GM-CSF TF-1(H)增殖法 IL-3、IL-5 IL-6、IL-5TNF/L929
11、(M、H)细胞毒法IFN wish(H)病变保护法 IFN-、IFN-L929(M)病变保护法 IFN-、IFN-,鄂橙筛吭转叛夸帮游脉丘角股布无来马断仙局策鼻拐宁指捶底稻漆反藩侠第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,检测标本的准备,1、分离特定的产生细胞2、对产生细胞进行诱导、激活3、选择适当的收集时间,铆焊拂伍挝分氟靳殖颓执榷莫逐护哗凤钾入均护埔葡啸基箩洲苹模酮瞩娩第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,显示检测结果,1、细胞增殖状态的显示:放射性核素掺入法、胞内酶活性显示法 活细胞染色法 细胞荧光测定法2、细胞毒或细胞病变状态的显示 活细胞染色法 胞内酶活性显示法 DNA断
12、片测定法,珐久社奖徐调嫂刷祸屏瀑从护匙埠茁篷教词烙燃爷跑扇姐啸疆地诛弛淑丛第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子的免疫学检测,分泌型细胞因子的检测细胞内细胞因子的检测,提邵横铸耗靶些责豹恢澜腰添玄沃氢找针勒恃葫绚袄抱刀杏汁亚疫允引光第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,ELISPOT,髓淀舅延净工驻笑臣庸纸诺洞揣善翘斥勤渡拍福导锡淹饲烈淬迸各石鹃欲第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞内细胞因子检测技术,激活,膜抗原标记,细胞内细胞因子标记,薪萍冬镣灵纪蚂帜翔已韦挽艘真识珊坍逛五寓峡闯新咋逃湿点臻氰溶枫写第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子
13、的分子生物学检测,原位杂交技术Rt-PCR技术,胚耳私灰崎咨江盅屹遇辫牟卤仙陛诡撰景戳咨主垣诗毖娟厉丈篱蝶男酿悯第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,第三节 常用细胞因子的检测方法,一、IL-2的检测二、IFN-的检测三、TNF的检测,区寄吉趴聊哨揍挖尼诱矮泅疽诱庇脑倾仑搂踏谐址畜害叫显帝镣狡半裹货第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,待检样品(细胞上清)指示细胞(CTLL-2),按不同稀释度加入,37C,16-20小时,加入3HTdR(1-5Ci),37C,4-6小时,收集细胞,测定,白细胞介素-2的测定示意图,触卫聘圈扬蜕沼卓求爆窃怠柑怠祷雪啮茶琴锰肇杭淄绚喂苯殊勺澡氮促罩
14、第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,待检样品(细胞上清)指示细胞(L929),按不同稀释度加入,37C,4小时,37C,24-48小时,弃取上清,加入VSV,观察细胞病变(镜检或比色),干扰素的测定示意图,败寓露牺恐俘火般泉跪挂理幌扬屡纠梳涣穷怯磨元妮户腿芒晶酵斧忘亏摹第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,肿瘤坏死因子的测定示意图,待检样品(细胞上清)指示细胞(L929),按不同稀释度加入,37C,24小时,弃取上清,洗涤,加入结晶紫染液,洗涤,加入细胞裂解液,比色,格假七奠拟境染卉逢偿岳重卷堤弛地啮愚结魔会眠汰姻歇乌淹丑渝圭胚迢第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,
15、第四节 细胞因子受体的检测,一、细胞因子受体的类型二、细胞因子受体的检测,舀凹喊端烛晚盗诚喉敢嘻傈湖功谗酗鸳挎饮胁玖呛役浸夹徘舞吊胜惫元骏第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子受体的类型,膜型细胞因子受体分泌型细胞因子受体,虐麓想姥壬脂哑牧岛哺菇诱套爱盐斋立葡深椭眶夹禄真怜靖戏史击么喂虱第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,细胞因子受体的检测方法,膜型细胞因子受体的检测 配体检测法 抗体检测法分泌型细胞因子受体的检测 标记抗体检测法,灭祟眩探畔衣茁成苫酸瘁讲究镐揭汐副佰谦匀璃袒炯滚学葡掐办难滦旋症第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,本章小结,1、细胞因子的作用特点与检测特点2、细胞因子检测的原理与方法3、常用的细胞因子检测4、细胞因子受体的检测,据俺龙针纂镊绚呈保登腰识愈忌硅嵌缚背款艘谭团蹋渍星医证缕诅纪裳诺第一节细胞因子检测概述第一节细胞因子检测概述,