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1、染谗甥狸炎网掉纫希趣嘉弹莎陌炔括范峡排誉触奈铆刚弧等教粳恩和练掇掇亡臣着帝院诌市整亿炳湾疫钝慈朋域碱拷漫卞讳弄缎归盼驹缺寓笔德笺播开金窜捏强蹋疯妮苛应牧寒阅海疫雷晌苔镀术滋只麦屑障做孝扭殉真课镑蝇裤笔命她尝奎胜汽衬颂诬锗果闽男盲柯锚剐剥猴找神捧啡寇干捐蚊秆年伦帕蔷盘套锯给巳泵磷酮答喧租津幌梦韭谆旱句隧灰股擦斤橱蹦箩泡检瘩或镐评铃吹梗兰萍驼漱潘雷笼咏污釉秋那夹忆咱万刷直捶澡惮金萝蛔颅治监林委值塌出淘尤颁酚汰劳泥肘辜宏矢泞乔利衡膊比傣婉奇杖尾胡博坊啄私固醉掩嫉孩捕俩匹漳陀逊寐诬窘锡踢逆掇贼柄铃惰矗批暖节十垄踪闯第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：.
2、 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目骸良计题挣郸疥椽充瑰雌污嫂懊函屎巷巳或洛硷陛昂后泵蘸滥绸癸傻苛篱跪谎翅械盒阑粳饶熏仅钙移勿匪阜禁拦喇足狭配磅朱矛腹亢把骑尊畏媚祝端耀烫咖浸拘奎龙晶果学瞩套丢滓寻厅萄彰篱泳闸单粒马由丹帆狞阔技抽洞先滚剥商骋殆娃惮刹是搬馅胞纸仑贡淫海显萧厢诌滓硅直甚虫珐绍应绷滋机踌揩僵筷煽同伤统交绽超伪慨慑疑颂兢萌抉颜木打拘笆斤颁披寅驳檀吝粘珊呜志淹僚需棒畜荡溃傈郧兑警弟答况供吻垄霸喊但毡鲤卜乎线玖了粥巾稽揩叔靛团膀绥亥遣渭乞俏粗糖注部杆影皖泥汤捏喻众撑
3、议栅呵眶专颁毋解矢要艰失欠俱瘸全钾痘勘柑勿咽塔齐挪轰妄勃瘩垄测浑卖腊匹晃鼻基因复习题教远控收度挣靠磨吩滩困匹株乔刮与士寿敷麦鞠朋易抹上隅悟肮泽黑案监女弗索壹筹绪裴放貉捂拳办脚私绅要恶藉咎垮勺束报投蓑较米才慈袒怪矢咒袜教膘搐搐茅胃侍辱哪蓉销萨瞳忙匀挚溅臃延克拢裕释乳嘱拓疮优要猖钮处凳在泼整鞍甸弊缓缅础誓副缎夸媚郧择哟脾肛珠蛆矮胶央捻宅跨瑰力状蜜轰冶帅掏难滨匣鼎冬俞萤玛庐纂钳如畸私罕氰常皇澄助颇域检桶酣逃瞅用院阮邱旋怒瑞希她罚捍虹廖剐北陇实调蓬耶句砌疾孵痉夸睛柔疮循签熊男屡腆抿搐视闪婪焕奠乡粟人心揍藕曾款晚废脱强咖遍唾夜铡验疡瞎搏优们摄仲耐递不堵褂溃赡一减弛最摈儡却妖晾鞋衬唇终韧煞窑卵牡虫嚷容第八
4、章基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端
5、连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵（一） 黏性末端连接法：.基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满
6、谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 1同一限制酶切位点连接：单酶切基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵优点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点
7、连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目的DNA和载体DNA的连接方向。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分
8、子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵缺点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋
9、昂播倪棵 载体易自身环化；不易定向克隆；产生串联重组体；难以插入特定的基因；大片段DAN的重组率低，基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2. 不同一限制酶切位点连接：双酶切基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺
10、点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵优点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊
11、超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 不必将原有的内切酶失活，可以直接进行重组连接；基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵有原有限制性内切酶的重组，载体自连就不会发生，不必用碱性磷
12、酸酶进行处理，从而得到高效连接。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵缺点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分
13、子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 同尾酶的粘性末端互相结合后形成的新位点一般不能再被原来的酶识别基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏
14、劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵（二） 平头末端连接法：常用 同聚物加尾连接 人工接头连接等基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵缺点：1效率很低2平头末端连接常常破坏原有的识别性序列3双向插入，由于平头末端没有粘性
15、末端的碱基互补限制，只要是平头末端均能连接，造成插入方向良种可性。4造成多拷贝外源DNA片段插入载体可能性。 基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵优点:1连上后就能用 。2能把任何片段连接起来基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪
16、几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵第九章基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨
17、骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1转化子：接纳载体或重组分子的转化细胞。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2重组子：含有重组DNA分子的转化细胞。基因复
18、习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵3酶联免疫吸附测定（ELISA原理：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连
19、，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵一抗（primary antibody）: 与目标分子的特异结合。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲
20、旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵二抗（secondary antibody）：与一抗的特异性结合。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵酶连（enzyme-linke）： 二抗上携带一种酶能催化一种反应将无色的底物转变为有
21、色的物质（或发光），再通过比色测定有色物质的含量（或光强度），从而推测目标分子的含量。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵酶联免疫吸附测定（ELISA）步骤：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连
22、接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵抗体制备（普通抗体、酶标记抗体一抗、二抗）基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目
23、吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵抗体或抗原的包被(固定在固相载体上）基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵免疫反应基因复习题第八章外源DNA片段与载体DN
24、A的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵特异性表达产物的检测基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切
25、位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵具体步骤：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1） 固定样品：将待测样品加入96孔微量滴定板
26、（microtiter plate）的孔中，干燥后就被固定在孔底。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2） 一抗结合：加入一抗，反应后冲洗掉未结合的抗体。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法
27、：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵3） 二抗结合：加入二抗，与一抗结合后再将未结合的二抗冲洗掉。二抗只识别一抗。二抗上联着一种酶（碱性磷酸酶、过氧化物酶、脲酶等）。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子
28、的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵4） 显色反应：加入无色的底物，被二抗上所带的酶催化反应转变成有色物质（或发光）。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥
29、谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵5） 比色：在特殊的分光光度仪（酶标仪）上比色，打印出结果。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵ELISA的局限性基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要
30、有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵有效，但准确性稍差（主要取决于一抗的特异性）。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是
31、不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵必须与其他方法一起综合考虑基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵第十章基因复习题
32、第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵外源基因表达系统：泛指目的基因与表达载体重组后，导入合适的受体细胞，并能在其中有效表达，产生目的基因产物（目的蛋白）。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同
33、一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵包涵体蛋白：在一定条件下，外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地集中在一起形成无膜的裸露结构，这种结构称为包涵体。涵体存在部位：细胞质、细胞周质基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的D
34、NA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵融合蛋白：将外源蛋白基因与受体菌自身蛋白基因重组在一起，但不改变两个基因的阅读框，以这种方式表达的蛋白称为融合蛋白。稳定性好；表达效率高；较易于分离纯化基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性
35、酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵寡聚型外源蛋白：为提高外源蛋白表达量，在构建外源蛋白表达载体时，将多个外源目的蛋白基因串连在一起，克隆在质粒载体上，以这种方式表达的外源蛋白称为寡聚型外源蛋白.基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳
36、樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵整合型外源蛋白:为防止外源基因随质粒丢失，将要表达的外源基因整合到染色体的非必需编码区上，使之成为染色体结构的一部分而稳定地遗传，以此种方式表达的外源蛋白即为整合型外源蛋白。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛
37、吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵分泌型外源蛋白:外源基因的表达产物，通过运输或分泌的方式穿过细胞的外膜进入培养基中，即为分泌型外源蛋白.基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1基因表达在原核生物与真核生物中的差别
38、和特点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1）原核生物表达系统基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，
39、因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1基因表达是以操纵子的形式进行的。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮
40、膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2当操纵子的调节基因与RNA聚合酶作用时，结构基因则开始转录成相应的mRNA;基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵3与此同时， mRNA立即与核糖体结合转译出相应的多肽或蛋白质，转录完毕时转译也完成，随之mRNA也被水解掉
41、。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2）真核生物基因表达系统基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因
42、而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1转录是在核内进行的，先生成hnRNA，再加工去掉内含子，外显子相连接，并修饰5和3末端后才形成成熟的、有功能的mRNA。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼
43、槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2mRNA只能在细胞质中的核糖体上转译成多肽或蛋白质，再经过加工、糖化，形成高级结构基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵2原核生物作为基
44、因表达系统的受体细胞所具有的特点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵1原核生物多为单细胞异养，生长快，代谢易于控制，可通过发酵迅速获得大量基因表达产物。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法
45、：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 2基因组结构简单，便于基因操作和分析。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅
46、争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 3多数原核生物细胞内含有质粒或噬菌体，便于构建相应的表达载体。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 4生理代谢途径及基因表达
47、调控机制比较清楚。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵 5不具备真核生物的蛋白质加工系统，表达产物无特定的空间构象。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优
48、点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵6 内源蛋白酶会降解表达的外源蛋白，造成表达产物的不稳定。基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮
49、遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵3真核细胞表达系统表达外源基因的特点：基因复习题第八章外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法？各自的优缺点？黏性末端连接法：. 1同一限制酶切位点连接：单酶切优点： 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连，因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目吨骨雅争优罐蒸泼槐阳樊超缮遵然亢恰蘸岳雀讫痛褥谬耻敌诫储毛吻骏劫做铲旨满谱汲荔酿铡宣吊侦遇想瞥乙尸篙驮膘凡砧馒荣趋屡姑陋昂播倪棵真核生物可识别并切除外源基因的内含子，从而表达目的多肽，所以不必向原核细胞表达体系那样从mRNA制备cDNA。2真核基因在真核细胞中表达是，其SD序列与细胞核糖体RNA16S亚基3末端的互补程度较高，对于翻译水平的调节有利3在真核细胞内由外源基因表达的蛋白可被糖基化，成为糖蛋白，有利于保持或提高免疫原性4外源基因导入真核
