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1、第五章 微生物的代谢,新陈代谢,一般泛指生物与周围环境进行物质交换和能量交换的过程。发生在活细胞中的各种分解代谢和合成代谢的总和。,分解代谢,合成代谢,分解代谢（catabolism）,分解代谢指细胞将大分子物质降解成小分子物质，并在这个过程中产生能量。,一般可将分解代谢分为三个阶段：寺地蛋白质 多糖 脂类氨基酸 单糖 甘油，脂肪酸 丙酮酸/乙酰辅酶A CO2，H20，能量（三羧酸循环）,合成代谢（anabolism）,指在合成代谢酶系的催化下，由简单小分子、ATP形式的能量和还原力一起合成复杂的大分子的过程。,合成代谢所利用的小分子物质来源于分解代谢过程中产生的中间产物或环境中的小分子营养物
2、质。寺地,生物小分子合成生物大分子 合成代谢（同化）耗能 物质新陈代谢 能量代谢 代谢 产能 分解代谢（异化）生物大分子分解为生物小分子,代谢旺盛代谢多样化代谢需严格调节,且具有灵活性,复杂分子（有机物）,分解代谢,合成代谢,简单小分子,ATP,H,微生物新陈代谢的特点:,第一节 微生物的能量代谢能量代谢是新陈代谢中的核心问题。中心任务：把外界环境中的各种初级能源转换成对一切生命活动都能使用的能源ATP。,有机物（化能异养菌）最初能源 日 光（光能自养菌）通用能源 无机物（化能自养菌）,生物氧化作用：细胞内代谢物以氧化作用释放（产生）能量的化学反应。氧化过程中能产生大量的能量，分段释放，并以高
3、能键形式贮藏在ATP分子内，供需时使用。生物氧化的方式：和氧的直接化合：C6H12O6+6O2 6CO2+6H2O失去电子：Fe2+Fe3+e 化合物脱氢或氢的传递:CH3-CH2-OH CH3-CHO NAD,自养微生物利用无机物异养微生物利用有机物,生物氧化,能量,微生物直接利用,储存在高能化合物（如ATP）中,以热的形式被释放到环境中,能量的去处,生物氧化的功能：产能(ATP)产还原力【H】小分子中间代谢物,生物氧化的过程一般包括三个环节：底物脱氢（或脱电子）作用（该底物称作电子供体或供氢体）氢（或电子）的传递（需中间传递体，如NAD、FAD等）最后氢受体接受氢（或电子）（最终电子受体或
4、最终氢受体）,生物氧化的形式：某物质与氧结合、脱氢和失去电子3种。生物氧化的过程：脱氢（或电子）、递氢（或电子）和受氢（或电子）生物氧化的功能：产能（ATP）、产还原力、产小分子中间代谢物生物氧化的类型：发酵、呼吸（有氧呼吸和无氧呼吸）,总 结,底物脱氢的途径 1、EMP（己糖双磷酸降解或糖酵解）途径 2、HMP（己糖单磷酸降解或磷酸戊糖循环）途径 3、ED（2酮3脱氧6磷酸葡萄糖酸）途径 4、TCA（三羧酸循环）,（1）EMP途径,EMP途径关键步骤,1.葡萄糖磷酸化1.6二磷酸果糖(耗能)2.1.6二磷酸果糖2分子3-磷酸甘油醛3.3-磷酸甘油醛丙酮酸总反应式：葡萄糖+2NAD+2Pi+2
5、ADP 2丙酮酸+2NADH2+2ATP CoA 丙酮酸脱氢酶 乙酰CoA，进入TCA,磷酸果糖激酶,EMP途径的关键酶，在生物中有此酶就意味着存在EMP途径需要ATP和Mg+在活细胞内催化的反应是不可逆的反应,（2）HMP途径(戊糖磷酸途径)（Hexose Monophophate Pathway）,6 葡萄糖-6-磷酸+12NADP+6H2O 5 葡萄糖-6-磷酸+12NADPH+12H+6CO2+Pi,总反应式：,HMP途径：葡萄糖经转化成6-磷酸葡萄糖酸后，在6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的催化下，裂解成5-磷酸戊糖和CO2。由六个葡萄糖分子参加反应，经一系列反应，最后回收五个葡萄糖分子，消耗
6、了1分子葡萄糖（彻底氧化成CO2 和水,6-P-G脱氢酶,内脂酶,6-P-G酸脱氢酶,HMP途径的重要意义,为核苷酸和核酸的生物合成提供戊糖-磷酸。产生大量NADPH2，一方面为脂肪酸、固醇等物质的合成提供还原力，另方面可通过呼吸链产生大量的能量。与EMP途径在果糖-1，6-二磷酸和甘油醛-3-磷酸处连接，可以调剂戊糖供需关系。途径中的赤藓糖、景天庚酮糖等可用于芳香族氨基酸合成、碱基合成及多糖合成。途径中存在37碳的糖，使具有该途径微生物的所能利用利用的碳源谱更为更为广泛。通过该途径可产生许多种重要的发酵产物。如核苷酸、若干氨基酸、辅酶和乳酸（异型乳酸发酵）等。,又称2-酮-3-脱氧-6-磷酸
7、葡糖酸（KDPG）裂解途径。1952年在嗜糖假单孢菌中发现，后来证明存在于一些细菌中（革兰氏阴性菌中分布较广）。ED途径，是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径，存在ED途径得微生物很少见.主要是一些假单胞菌,（3）ED途径,关键反应：2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸的裂解催化的酶：6-磷酸脱水酶，KDPG醛缩酶相关的发酵生产：细菌酒精发酵优点：代谢速率高，产物转化率高，菌体生成少，代谢副产物少，发酵温度较高，不必定期供氧。缺点：pH5，较易染菌；细菌对乙醇耐受力低,ATP有氧时经呼吸链 6ATP 无氧时进行发酵2乙醇,1ATPNADH+H+NADPH+H+2丙酮酸,ATPC6H12
8、O6KDPG,ED途径的总反应,由表可见，在微生物细胞中，有的同时存在多条途径来降解葡萄糖，有的只有一种。在某一具体条件下，拥有多条途径的某种微生物究竟经何种途径代谢，对发酵产物影响很大。,一、化能异养微生物的生物氧化,发酵,呼吸,根据氧化还原反应中的电子传递体的不同分为：,有氧呼吸无氧呼吸,呼吸作用和发酵作用的区别：电子载体不是将电子直接传递给底物降解的中间产物，而是交给电子传递系统，逐步释放出能量再交给最终电子受体。,呼吸作用,微生物在降解底物的过程中，将释放出的电子交给NAD(P)+、FAD或FMN等电子载体，再经电子传递系统传给外源电子受体，从而生成水或其他还原型产物并释放出能量的过程
9、。根据反应中氢受体不同分为两种类型：,有氧呼吸:以分子氧作为最终电子受体无氧呼吸:以氧化型化合物作为最终电子受体,以分子氧为最终受体的生物氧化,C6H12O6+6O2=6CO2+6H2O,1、有氧呼吸（aerobic respiration）,发酵面食的制作就即利用了微生物的有氧呼吸,三羧循环和电子传递链是主要的产能环节,电子传递,NAD FAD Q,细胞色素bca1a3,有氧呼吸特点 基质氧化彻底生成CO2和H2O，（少数氧化不彻底，生成小分子量的有机物，如 醋酸发酵）。E系完全，分脱氢E和氧化E两种E系。产能量多，一分子G净产38个ATP,2、无氧呼吸 一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化
10、物（个别为有机氧化物）的生物氧化，是一种无氧条件下进行的产能效率较低的特殊呼吸。,无氧呼吸的类型：硝酸盐呼吸：NO3-NO2-,NO,N2 硫酸盐呼吸：SO42-SO32-,S3O62-,S2O32无机盐呼吸 H2S 硫呼吸：S0 S-2 碳酸盐呼吸：CO2,HCO3-CH3COOH CO2,HCO3-CH4 延胡索酸呼吸：延胡索酸 琥珀酸,硝酸盐呼吸（反硝化作用）,硫酸盐呼吸（反硫化作用）有些硫酸盐还原菌如脱硫弧菌，以有机物为氧化基质（H2或有机物，大部分不能利用G)使硫酸盐还原成H2S。乳酸常被脱硫弧菌氧化成乙酸，并脱下8个H，使硫酸盐还原为H2S。SO428H 4H2OS2,碳酸盐呼吸（
11、甲烷生成作用）甲烷细菌能在氢等物质的氧化过程中，把CO2还原成甲烷，这就是碳酸盐呼吸又称甲烷生成作用。,在生物氧化中发酵是指无氧条件下，底物脱氢后所产生的还原力不经过呼吸链传递而直接交给一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。,3、发酵,在发酵工业上，发酵是指任何利用厌氧或好氧微生物来生产有用代谢产物的一类生产方式。发酵底物有糖类、有机酸、氨基酸等，其中以微生物发酵葡萄糖最重要。各类发酵与人类生产生活,微生物能以好多种有机物作为发酵基质，但它以大都能转化成葡萄糖或葡萄糖的中间代谢产物而被微生物利用。,根据代谢产物和代谢途径不同，有各种不同的发酵类型，以下几种发酵最重要研究得最清楚：乙醇发酵
12、、乳酸发酵、混合酸发酵、丙酮丁醇发酵,（1）由EMP途径中丙酮酸出发的发酵（酵母菌乙醇发酵）参与微生物：酵母菌,酵母菌乙醇发酵过程中氢由供体给受体的方式,乙醇发酵特点 发酵基质氧化不彻底，发酵结果仍结果有机物 酶体系不完全，只有脱氢E，没有氧化酶。产生能量少，酵母乙醇发酵净产2ATP，细菌1ATP。也就是丙酮酸直接接受糖酵解过程中脱下H使之还原成乙醇的过程。,酵母菌乙醇发酵应严格控制三个条件,厌氧,不含NaHSO3,PH小于7.6,通过ED途径进行的乙醇发酵（细菌的乙醇发酵）,参与微生物：运动发酵单孢菌,发酵途径：ED途径,反应式：C6H12O6,2C2H5OH+2CO2+ATP,（2）乳酸发
13、酵,指乳酸菌将G分解产生的丙酮酸逐渐还原成乳酸的过程,进行乳酸发酵的都是细菌：如短乳杆菌，乳链球菌等,细菌积累乳酸的过程是典型的乳酸发酵。牛奶变酸，生产酸奶，渍酸菜，泡菜，青贮饲料都是乳酸发酵,两种类型：同型乳酸发酵、异型乳酸发酵,同型乳酸发酵,在糖的发酵中，产物只有乳酸的发酵称为同型乳酸发酵，青贮饲料中的乳链球菌发酵即为此类型。,关键酶：乳酸脱氢酶,异型乳酸发酵（通过HMP途径）,北方渍酸菜，南方泡菜是常见的乳酸发酵。乳酸发酵细菌不破坏植物细胞，只利用植物分泌物生长繁殖。,青贮饲料中短乳杆菌发酵即为异型乳酸发酵。,异型乳酸发酵结果：1分子G生成乳酸、乙醇、CO2各1分子,某些细菌通过发酵将G
14、变成琥珀酸、乳酸、甲酸、H2和CO2等多种代谢产物。由于代谢产物中含多种有机酸，因此将这种发酵称为混合酸发酵。大多数肠杆菌如大肠杆菌等均能进行混合酸发酵。,3、混合酸发酵,混合酸发酵 用于细菌分类鉴定 V.P反应：反应过程中产生红色化合物,甲基红反应：产酸使指示剂变色,VP试验,大肠杆菌:少,或不产阴性产气肠杆菌:大量阳性,区别:产物三羟基丁酮,大肠杆菌,产气杆菌,甲基红试验,大肠杆菌：+产气杆菌：,大肠杆菌,产气肠杆菌,少数厌氧梭菌能利用一些氨基酸同时当作碳源、氮源和能源，其机制是通过部分氨基酸的氧化和另一些氨基酸的还原向偶联，这种以一种氨基酸做氢供体和以另一种氨基酸做氢受体而发生的产能的独
15、特发酵类型，称为Stickland 反应。作为氢供体的氨基酸：Ala,Leu,Ile,Val,Phe,Ser,His,trp作为氢受体的氨基酸：Gly,Pro,Ori,OH-Pro,Arg,4、氨基酸发酵产能（Stickland 反应）,二、自养微生物的生物氧化 还原CO2时ATP和H的来源,顺呼吸链传递,CO2NH4+,NO2-,H2S,S ATP,(最初能源)耗H产ATP,逆呼吸链传递,S,H2,Fe2+NAD(P)H2,（无机氢供体）耗ATP产H,CH2O,硝化细菌的能量代谢（氨的氧化）,硫细菌的 能量代谢（硫的氧化）,氢细菌的 能量代谢（氢的氧化）,用途:用于生产单细胞蛋白,单细胞蛋白
16、,单细胞蛋白种类,生产所需原料,单细胞蛋白用途,单细胞蛋白特点,细菌单细胞蛋白,酵母单细胞蛋白,单胞藻单细胞蛋白,石油，天然气，氢,化能自养微生物以无机物作为能源，一般产能效率低，生长慢，但从生态学角度看，它们所利用的能源物质是一般化能异养生物所不能利用的，因此它们与产能效率高、生长快的化能异养微生物之间并不存在生存竞争。,四、能量转移 在产能代谢过程中，微生物通过底物水平磷酸化和氧化磷酸化将某种物质氧化释放的能量存于ATP等高能分子中，对光合微生物可通过光合磷酸化将光能转变为化学能存于ATP中。ATP的生成方式,光合磷酸化氧化磷酸化,底物水平磷酸化电子传递磷酸化,光合磷酸化:将光能转化成AT
17、P的过程,存在于 光能微生物中,氧化磷酸化生成ATP的方式有两种：底物水平磷酸化不需氧电子传递磷酸化需氧,氧化磷酸化：利用化合物氧化过程中释放的能量 生成ATP的反应。,底物水平磷酸化:是在生物氧化过程中直接产生ATP的过程,此过程需要酶的催化。这种类型的氧化磷酸化方式在生物代谢过程中较为普遍。催化底物水平磷酸化的酶存在于细胞质内。,草酰乙酸,柠檬酸,异柠檬酸,草酰琥珀酸,-酮戊二酸,琥珀酰辅酶A,琥珀酸,延胡索酸,苹果酸,丙酮酸,乙酰辅酶A,GTP,GDP+Pi,三羧酸循 环,底物水平磷酸化发生在呼吸作用过程中,1 NADH1 NADPH1 FADH2,3 ATP3 ATP2 ATP,电子传
18、递磷酸化：NADH，NADPH，FADH2上的电子通过一系列电子传递载体传递给氧气，最终形成ATP的过程.此过程需要氧气的参与。,光合磷酸化(photophosphorylation),当一个叶绿素分子吸收光量子时，叶绿素性质上即被激活，导致其释放一个电子而被氧化，释放出的电子在电子传递系统中逐步释放能量，这就是光合磷酸化的基本动力。光合磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP。,光能营养型生物产氧 真核生物：藻类及其它绿色植物 原核生物：蓝细菌不产氧（仅原核生物有）：光合细菌,第二节 合成代谢与分解代谢的关系,两者联系紧密，互不可分。联接两者的中间代谢物有12种。只进行分解代谢或
19、合成代谢都会影响微生物的生长繁殖等正常生理活动。通过以下两种方式解决这一矛盾。,一、两用代谢途径 在分解代谢和合成代谢中均有功能的代谢途径。EMP、HMP和TCA循环等都是重要的两用代谢途径。必须指出：在两用代谢途径中，合成途径并非分解途径的完全逆转。在分解与合成代谢途径中，常包含了完全不同的中间代谢物。真核生物中，分解代谢和合成代谢一般在不同的分隔区域内分别进行。,二、代谢物回补顺序又称为代谢补偿途径或添补途径，指能补充两样代谢途径中因合成代谢而消耗的中间代谢物的那些反应。如，与EMP途径和TCA循环有关的回补顺序约有10条，均围绕着回补EMP途径中的磷酸烯醇式丙酮酸和TCA循环中的草酰乙酸
20、这两种关键代谢产物来进行。,草酰乙酸:OA磷酸烯醇丙酮酸:PEP,第三节 微生物独特合成代谢途径举例（了解）一、自养微生物的CO2固定二、生物固氮 三、微生物结构大分子肽聚糖的生物合成四、微生物次生代谢物的合成,按代谢产物在机体中作用不同分：初级代谢：一般将微生物从外界吸收各种营养物质,通过分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动的物质和能量过程的代谢。产物：氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等次级代谢：指微生物在一定的生长时期（一般为稳定期）以初级代谢物为前体、合成对微生物生命活动没有明确功能的物质或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质的过程 产物：抗生素、色素、激素、生物碱、毒素、维生素等,第四节 微生物的代谢调节与发酵生产（了解）,微生物的代谢调节,应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节,天冬氨酸,天冬氨酸 磷酸,天冬氨酸 半醛,高丝氨酸,苏氨酸,甲硫氨酸,Lys生产：高Ser缺陷型,赖氨酸,AK,HSDH,应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节,核糖-5-磷酸,肌苷酸,肌苷酸生产：腺嘌呤缺陷型,核糖-5-磷酸 焦磷酸,核糖胺-5-磷酸,腺苷酸琥珀酸,腺苷酸,黄苷酸,鸟苷酸,1,2,12,13,14,15,应用抗反馈调节突变株解除反馈调节,控制细胞膜的渗透性,生物素,生物素是乙酰-CoA 羧化酶的辅基,名词解释：发酵 呼吸作用 无氧呼吸 有氧呼吸 生物氧化初级代谢产物 次级代谢产物,
