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1、大鼠常规操作技术,孙 泉首都医科大学实验动物部（办公室）,1,1.了解动物实验的目的和意义2.了解实验动物选择和染毒途径。3.掌握大鼠实验的基本操作技术。,一、实验目的：,2,3,1.实验动物的选择 2.实验动物的抓取和固定 3.性别鉴定4.实验动物编号标记 5.实验动物给药途径和方法（灌胃、腹腔、皮下注射、尾静脉注射）6.生物标本的采集（鼠尾取血、心脏采血、眼眶取血）7.实验动物的处死,二.实验内容：,4,实验流程,5,动物物种选择基本原则：,动物的选择,6,健康动物首先看外观：体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，反应行动灵活。有无明显疾病症状 体重、年龄,外观观察,7,动物的抓取
2、和固定,单手固定双手固定固定器固定板注意抓取动物的手法抓取固定时力量大小适宜,8,未成熟鼠生殖器发育不明显，肛门与生殖器之间的距离来区分。远、近。成年鼠：雄性卧位可见睾丸，雌性可见腹部有12个乳头。,性别鉴定,9,常用标记，两种染料（苦味酸和中性红或品红）先左后右，先上后下,动物的编号标记,10,穿耳孔法左耳代表十位，右耳代表个位应注意防止孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部,11,原则：同一实验中，实验动物的年龄尽可能一致，实验动物体重大致相近；同组、同性别动物体重差异应小于平均体重的10%；不同组间同性别动物体重均值差异小于5%；动物各半，且实验结果分开统计、分析。称重编号随机分组,实
3、验动物的分组,12,经口染毒（喂饲、灌胃、吞咽胶囊等）经呼吸道染毒（静式、动式和气管内注入）经皮肤染毒注射染毒（皮下、皮内、肌内、腹腔和鼠尾静脉注射等）其它（直肠内、鼻腔等）,实验动物染毒途径和方法,13,灌胃,抓取老鼠时应是鼠 成竖直线灌胃成功时，所遇阻力较小灌胃时注意胃容量0.1ml/10g-0.3ml/10g，1mL,14,腹下1/3外侧，避免损伤实质器官30-45角刺入扎入时有“落空感”，回抽无尿液或血液,腹腔注射,15,酒精擦拭尾部左手食指，拇指配合按住尾端右手持注射器，针尖轻轻抬起与血管平行刺入血管由红变白，按压止血,尾静脉注射,16,俯卧固定，左手拇指和食指捏住颈背部皮肤提起，右
4、手持针沿纵轴方向刺入皮下，进针时感觉有阻力，继续刺入，突然阻力消失，活动针头，确认刺入皮下即可注射药液。,皮下注射,17,俯卧保定，与皮肤平行刺入捏住的皮肤，注射部位局部形成皮丘。为避免药液流出，停留片刻，再将针头拨出,皮内注射,18,血液采集（断尾采血、眼眶采血、心脏采血等）尿液采集粪便采集,生物标本的采集,19,固定用手轻揉鼠尾静脉充血后剪尾尖（1-2mm）用手从尾根向尾尖推挤采血干棉止血。每次0.1mL,尾尖静脉采血法,20,左手固定动物滴少量10%可卡因于动物眼内右手持消毒过毛细吸管以抗凝剂湿润内壁眼睑和眼球间旋转刺入采血后消毒纱布止血30秒。每次,眼眶后静脉丛采血,21,动物仰卧固定
5、器固定剪左侧心区毛皮肤消毒小号针头注射器在3-4肋间刺入。可达0.5mL,心脏采血法,22,脊椎脱臼法：用左手按住动物的头部于实验台上，右手抓住尾根部，快速、不间断地向后、略向上使劲拉，使动物的颈椎以致脊椎脱臼死亡。过量麻醉法,动物的处死,23,将动物固定于解剖台上，从耻骨联合至下颌沿正中线切开皮肤，再从耻骨联合至肋骨下缘沿腹正中线切开腹壁肌肉（不要用力过猛，以免切破腹腔脏器，特别是膀胱）。从肋骨下端向脊柱方向，将两侧腹壁剪开，以便观察腹腔内脏器。应注意不可将腹腔内脏器翻乱，应有次序地检查。,脏器标本的采集,24,25,26,27,28,抓取,称重,给药,采血,麻醉,解剖,1.抓取与操作动物时小心不要被咬伤，如果被咬伤需立即用清水冲洗并用碘酒消毒。2.抓取动物时用力要恰当,防止动物窒息死亡。3.注射给药时要注意安全，注射器不用时要盖上盖子，不要被扎伤。4.实验动物在做完所有操作后才进行处死，处死后的动物不要与其他垃圾混合丢弃。,注意事项：,30,
