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1、完成实验,酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?,提出问题,作出假设,设计实验,分析结果,得出结论,变量如何控制?,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,该探究活动中涉及4个科学方法:(1)数学模型法;(2)抽样检测法;(3)显微观察法;(4)微生物培养法。,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,关注本实验中的几个关键点:酵母菌的计数利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数法。优点:直观、快速。适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体培养基中菌体的计数。此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为总菌计数法。,酵母菌的计数(1)计数工具血球计数板,实物图,
2、正面图,侧面图,计数室,滴液处,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。计数时,常采用样方法。,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,酵母菌的计数(1)计数工具血球计数板,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,放大后的计数池,每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。每个计数池分为9个大方格。,16个小格,25个小格,25X16=400小格,16X25=400小格,每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3,抽样检测:516=80个小格,抽样检测:425=100个小格,酵母菌的计数(2)计算:每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少?,探究培养液中酵母菌种群数量 的
3、动态变化,例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.1mm3,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先 后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,例1:在用血球计数板(2mm2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌 个。,2x107,2108,稀释,例3 检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管
4、吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成,容纳液体的总体积为01 mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个mL。,5n105,酵母菌的计数(3)计数的操作稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓,可不必稀释。镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检.若有污物,则需清洗后才能进行计数。加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。,探究培养
5、液中酵母菌种群数量的动态变化,(3)计数的操作显微计数:静止5分钟后,先用低倍镜(1610)找到计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,每个计数室选取5个(或4个)中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。如遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为两个菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,酵母菌的计数(4)血球计数板的清洗:使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或
6、其他沉淀物。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,酵母菌的计数(5)注意事项:进行计数前,应先将试管摇匀,目的是使酵母菌在培养液中混合均匀,以减少计数误差。显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应取相邻两边及顶角计数。若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可将培养液稀释一定倍数后再计数。本实验无对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗的方法清洗。,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,酵母菌的计数(6)讨论:计数前还应有哪些步骤?需注意些什么?,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,
7、酵母菌培养:培养液配制灭菌接种培养,配制质量分数为5的葡萄糖溶液(葡萄糖20g,1000 mL水),分装到5个烧杯中(200mL/烧杯),用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。,接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每个烧杯中加入。(注意:滴加量不要太多,避免初始菌数过多。),将烧杯置于28的恒温箱中培养,无菌操作,结果分析(1)数据记录 以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的数据记录表,其中,A表示五个中方格的总菌数;B表示菌液稀释倍数:,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,结果分析(1)数据记录 下表为一周
8、的数据记录表:,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,第 1 天,第 3 天,第 6 天,第 7 天,死亡,结果分析(2)构建数学模型:,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,实验再探究温度、营养物质影响酵母菌的生长吗?某同学按下表完成了有关实验。,温度、营养物质对酵母菌生长的影响,探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化,实验再探究培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗?例:(2008年江苏卷31题)为研究酵母菌种群密度的动态变化,某同学按下表所列条件进行了A、B、C和D 共4组实验,用1000mL锥形瓶作为培养器皿,棉塞封口,在25下静置培养,其他实验条件均相同,定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。,