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1、1,（血红蛋白+转铁蛋白）双连法检测的临床意义,2,主要内容,便隐血背景知识介绍,便隐血检测重要意义,检测三次的重要意义,双连检测的重要意义,3,国 内 现 状,某些早期胃肠道肿瘤患者常常因为缺乏明显的临床症状，很少主动到医院检查。错失治疗的最佳时期。,大便中隐性出血是早期唯一可检测有效指标,4,我国每5分钟就有1人死于大肠癌,大肠癌是最常见消化道恶性肿瘤之一。发病率在我国所有肿瘤发病率中排名第5位，而且其上升趋势明显，升速约为每年4.2%，远超2%的国际水平，我国每5分钟就有1人死于大肠癌。便血是大肠癌早期表现之一。,中国抗癌协会大肠癌专业委员会主任委员 张苏展,人民网 2010年 05月
2、31日 08:19,双连,5,大肠癌的发病特点,大肠癌是指大肠黏膜上皮在环境或遗传等多种致癌因素作用下发生的恶性病变，预后不良，死亡率较高，是我国常见的恶性肿瘤之一；大肠癌的发病率已经由癌症的第五位跃居第二位(2012年)，而且大有抢占第一的势头；过去，45岁之后才是肠道疾病的高发年龄，但如今70%的二十多岁年轻人已经有肠道疾病。,双连,6,早发现30年，晚发现3个月,大肠癌手术切除后的5年生存率平均可达40%60%，早期发现、早期诊断、早期治疗以及开展规范化的手术治疗仍是提高大肠癌疗效的关键；手术切除后大肠癌仍有可能复发，每年需定期进行便隐血检测；浙江大学肿瘤研究所的郑树教授概括为：早发现3
3、0年，晚发现3个月。,双连,7,双连,8,专家共识里面的重要观点（1）,中国大肠肿瘤筛查、早诊早治和综合预防共识意见,胃肠病学和肝病学杂志2011年11月第20卷,专家的观点,双连,9,北京科教频道成长在北京节目消化科专家的观点！,大肠癌必须在无症状的时候，把它检查出来才有意义！,北京军区总医院前消化科主任：李世荣教授,双连,10,粪便隐血试验在大肠肿瘤筛查中阳性率明显高于血清学CEA检测,大肠癌患者实验室检测阳性结果%,粪便检测 结果,血清检测 结果,摘自：北京军区总医院消化科，武子涛，李世荣，韩英 粪便隐血试验在大肠癌筛查中的作用,79.75%,p0.05,11,粪隐血试验一个简单、有效的
4、临床检查技术,隐血是指粪便中无肉眼可见的血液，红细胞被破坏，显微镜检查也未见红细胞，需用化学法、免疫法才能证实的出血。正常大便含生理血球量0.6ml/24h，出血量达到2ml时，即称为病理性出血。,双连,12,粪隐血筛查可以有效地降低死亡率,便隐血检测对消化道出血性疾病、特别是早期消化道肿瘤的诊断有重要意义：50-70%消化道溃疡和 87%消化道癌肿病例，胶体金法粪便隐血试验呈阳性。,双连,13,大肠癌筛查已列入公众健康方案：,N Engl J Med2000;343:1603-7Lancet 1996;348:1472-7Lancet 1996;348:1467-71世界华人消化杂志2004
5、;12(1):137-139,14,普查人群对比未普查人群患大肠癌的死亡率降低13%,双连检测全消化道出血早期发现大肠癌,双连,15,便隐血试验方法学,化学法：联苯胺法、邻甲苯胺法、愈创木、匹拉米洞等；免疫法：血红蛋白法、转铁蛋白法、血红联合转铁蛋白检测法；,双连,16,便隐血试验免疫法优于化学法,来自世界卫生组织的报告,目前有两种便隐血检测方法，化学法和免疫法。其中，含有过氧化物酶的粪便，（不仅是针对亚铁血红素中有活性的过氧化物酶）此时，化学法检测都是阳性结果。而免疫法，是通过人血红蛋白抗体检测的。只针对人的血红蛋白。,双连,17,为什麽大肠癌筛查可以降低发病率,93%的大肠癌来源于腺瘤(一
6、种癌前病变)，从腺瘤发展到癌需5-7年。由于早期大肠癌和癌前病变多数无症状，而有症状患者在就诊时多是中晚期，有的已经转移或合并许多并发症，死亡率极高。因此，定期进行粪隐血试验初筛，是早期发现大肠癌的重要手段，也是目前国际通用的筛查方法。韩英院长建议30岁以上人群每年定期都要进行便隐血检测。,北京军区总医院消化内科 韩英 武子涛,大肠癌筛查刻不容缓容缓家庭保健报,18,大肠癌主要筛查方法 粪便隐血试验,大肠肿瘤的筛查采用免疫法更恰当,如果采用免疫法，也可采用连续2-3天的检查方法,（见 李世荣等Int J Cancer 2006;118:3078-3083）,FOBT筛查：简便 便宜、有效,双连
7、,19,北京科教频道成长在北京节目检验科丛玉隆教授的观点！,免疫法便隐血检测，这种方法，越接近老百姓越好。,丛玉隆教授：解放军总医院全军医学检验质量控制中心主任，主任医师、教授、博士生导师,双连,20,粪便隐血试验在临床中的意义,粪便隐血试验:是检测急、慢性消化道出血和消化道恶性肿瘤,对消化道出血性疾病的诊断有重要的价值、可以降低结肠癌和直肠癌所致死亡的一种检查项目。常作为正常人群(尤对中、老年人)消化道恶性肿瘤诊断的筛选手段。,双连,21,3次有可能救一命！,便隐血试验检测一次就够了吗？,双连,22,关于隐血试验检查的次数,大肠肿瘤出血是间断的、不均匀的;检查次数越多，肿瘤的阳性检出率越高;
8、国际上推荐连续查3次最好.,双连,23,结论：便隐血试验阳性次数与大肠病变的类型有显著相关性。大肠癌患者便隐血试验3次阳性的比例显著升高。,粪隐血试验检测次数和阳性次数与大肠病变类型的关系 北京军区总医院 武子涛 李世荣 田日新 韩英,中国误诊学杂志2008年1月第8卷第2期,在文献里的论证,推荐,8.16%,18.37%,69.39%,24,单纯的血红蛋白单克隆抗体法检测粪便隐血试验有一定的局限性，对于十二指肠及胃以上部位的上消化道出血则会出现假阴性结果。因为血红蛋白在消化道存留时间过长，可能被胃酸或肠道内细菌分泌的酶所降解或破坏，使其免疫原性减弱或出现假阴性的结果9-11，此时应增加样本浓
9、度检测或者连续检测3 次，并结合临床进行判断。开展的金标法测定粪便中转铁蛋白隐血试验，两法联用，填补了血红蛋白法测定的缺陷，减少了上消化道出血病例的漏诊12。,中国医药导报：临床研究,2012 年1 月第9 卷第2 期,1.广州医学院第三附属医院检验科，2.广州市中医院检验科，3.广州市肿瘤医院检验科林丽英张泳杨素冰,在文献里的论证,25,与标本采集方法密切相关,粪便混有血液与血尿或血红蛋白尿不同,后者是血液在溶液中的均匀体,而前者不均匀地分布在固体粪便内,检测的标本只是整体标本的几十分之一。因此,欲获得高符合率的结果,必须遵照操作规程连续3 天采集标本,实验室对标本要多点采样进行分析。,医学
10、检验与临床 2007年第 18 卷第 4 期,血红蛋白与转铁蛋白同时检测消化道出血,在文献里的论证,孙冬兰1 冯春来2 黄兴富11(东昌府人民医院,聊城252000)2(东昌府区防疫站,聊城252000),26,在文献里的论证,中国误诊学杂志2008年1月第8卷第2期,目前国内外大肠癌普查大都采用连查3天 粪隐血试验的方法 2,但如何解释三次结果不同阳性次数,国内鲜见报道。通过对表1的分析可见,粪隐血试验阳性次数与大肠病变的类型有显著相关性。大肠癌在查3次和2次的比例中更高。,2 Man del J S,Ch urch TR,Bond JH,et al.Th e eff ect of f ec
11、al occultblood s creen ing on the in cidence of col orectal cancer J.N E ngl JMed,2000,343(22):1603-1607.,27,专家共识里面的重要观点（2）,胃肠病学和肝病学杂志2011年11月第20卷,中国大肠肿瘤筛查、早诊早治和综合预防共识意见,在文献里的论证,28,中国实验诊断学 2011 年6 月 第15 卷 第6,对于一个阴性的检验结果,应该排除假阴性情况的存在,在粪便形成过程中,少量的消化道出血不一定与之混匀,而且消 化道出血具有间断性,这些都可以造成检测结果的阴性,此时应增加检测次数或增加样
12、本浓度来检测,并结合临床来判断。所以需要连续检查3次以获得更准确的检验结果。,便隐血检测试纸的临床应用 四平市中心人民医院检验科,吉林四平136000,为什么检测结果阴性要查3次？,推荐,29,留取大便3次，轻松预防大肠癌,便隐血试验其正确的操作方法为:每个标本采样2次,连续采3个标本为一次检测过程。阳性的样本越多,阳性的结果越有意义。值得注意的是便隐血实验是目前唯一得到循证医学证实能有效降低大肠癌病死率的筛检手段。,大肠癌筛查现状及早期诊断进展,现代肿瘤医学2009年4月第17卷,在文献里的论证,推荐,30,结 论,便隐血实验连查3次，提高诊断准确性，防止假阴性结果出现。双连试纸检测，显著提
13、高了便隐血试验的阳性检出率与准确率，交叉假阳性率极低真正实现了全消化道出血性疾病的定性筛查。,双连,推荐,31,现在临床上最常用的免疫法（血红蛋白）检测法：血红蛋白法利用抗人血红蛋白抗体,通过检测大便中存在红细胞破坏后产生的血红蛋白，来判断消化道是否存在出血。,临床使用中发现弊端,双连,32,1、大约40-50%的上消化道出血患者不能由血红蛋白免疫法检出，原因是上消化道出血后，Hb 经胃、胰、肠等不同 pH 消化液及肠道细菌蛋白酶的作用约 24随粪便排出体外，期间 Hb 同样易变性或消失，故常导致在上消化道出血中的检出率低；,双连,33,2、血红蛋白存在于红细胞中，红细胞破裂后，才能被释放、被
14、检测。红细胞的破坏程度直接影响检测结果；一部分难 溶性红细胞的病理性出血不易被检测。,红细胞,血红蛋白,双连,3.患者血红蛋白的抗原与单克隆抗体不匹配。,35,（血红蛋白+转铁蛋白）双连法检测的临床意义,36,1、转铁蛋白是一种1球蛋白，存在于血浆中，健康人消化道中几乎不存在。因此只要在粪便或者胃内容物中被检测到，即说明存在消化道出血。某些消化道出血，即使红细胞不破裂时Hb不渗出，Hb法检测呈假阴性，但是血浆会渗漏到胃肠道中，用TF法则可检出。,转铁蛋白,双连,37,2、血液中Hb和Tf的比值为51.2/L，在粪便中血红蛋白与转铁蛋白的比例为5.4:1，TF法最低检出量为10ng/ml，即使出
15、血量大也不易导致前滞反应；对柏油便和上消化道出血的检测结论更可靠。,当出现柏油样便时为大量出血，血红蛋白浓度 2 000g/ml 检测范围,出现前滞反应,造成假阴性结果,此时用转铁蛋白免疫法检测试纸仍然可以出现阳性反应。,双连,38,双连便隐血检测试纸的特点,特异性强：常食用动物Hb 500ug/ml，辣根过氧化 物酶 2000g/ml。无交叉反应。灵敏度高：Hb 0.22000g/ml Tf 10ng 可检测全消化道出血。一步操作：一步加样，操作简单，结果易读；结果易读：根据“C”、“T”线出现的情况，即可判断；保存条件：室温、防潮保存、打开即用。,双连,39,转铁蛋白优势：,1、,双连,4
16、0,1.蛋白质组学杂志，2005年第5卷。Proteomictracking of serum protein isoforms as screen ing biom arkers of ovarian cancer,2.美国癌症研究杂志。2006年，6月第19卷。Identification of serum biomarkers for colon cancer by proteomic analysis,基础医学研究已经证实：多种癌症（包括结肠癌）的血清和体液中的转铁蛋白水平升高！,转铁蛋白可作为大肠癌的肿瘤标记物,支持转铁蛋白优势-文献,双连,41,TF+HB检测的临床价值,通过两种渠
17、道检测两种不同的抗原，能够起到优势互补的 作用。上消化道出血时，在检测HB的同时检测TF，能够避免Hb因 消化酶以及肠道细菌的降解下发生变性，而出现的假阴性 反应。消化道大量出血时，在检测HB的同时检测TF，可避免由于 抗原过剩，HB而出现的前滞反应。双渠道 双保险：TF+HB检测可提高全消化道病理性出血的阳性检出率。,双连,42,胃肠病学和肝病学杂志 2010年7月第19卷第7期：,结肠癌筛检的新方法:转铁蛋白试验与免疫粪隐血试验的对照研究,北京军区总医院消化科。盛剑秋,武子涛,夏长虹,金 鹏,付蕾,韩 英,李世荣,30%,32%,44%,72%,（转铁蛋白）便隐血试验可提高早期大肠癌的检出
18、率：,支持转铁蛋白优势-文献,43,粪便转铁蛋白检测在上消化道出血中有较高的阳性检出率！,粪便转铁蛋白检测在提高消化道出血检出率中的作用 上海长征医院 吴飞,中国医疗器械杂志,2011年35卷：,支持转铁蛋白优势-文献,44,中国大肠肿瘤筛查、早诊早治和综合预防共识意见,胃肠病学和肝病学杂志，2011年11月第20卷,专家共识里面的重要观点,结论,45,HB、TF与双连法检测结果比较,试验单位：卫生部北京医院,支持双连R文献,双连检测的优势,结论：双连检测对便隐血的阳性检率明显比单独使用血红蛋白或转铁蛋白检测便隐血的阳性检出率高。,双连,46,双连检测便隐血可显著提高消化道出血性疾病(其中包括
19、胃、肠的溃疡、钩虫病、消化系统的恶性肿瘤、大肠癌的癌前病变等)的阳性检出率。,检验医学与临床2011年11月第8卷 第21期,两种便血检测方法比较 湖北省襄阳市妇幼保健院,双连检测的优势,47,血红蛋白和转铁蛋白联合检测法对新生儿应激性消化道出血的筛查作用湖北省妇幼保健院石祖亮王维鹏,微循环学杂志年第卷第期,本文结果中，窒息儿组联检阳性率显著高于法或法单独检测，充分说明法与法联合检测在应激性新生儿消化道出血的隐血试验中能够起到优势互补作用，从而提高实验诊断准确性，对辅助临床诊断有重要价值。临床诊断有重要价值。,48,1、双连检测可提高消化道出血及大肠肿瘤的阳性检出率，避免漏掉有消化道出血的病人
20、，尽早发现消化道出血性疾病;2、双连检测可显著提高消化道出血性疾病(其中包括胃、肠的溃疡、钩虫病、消化系统的恶性肿瘤、大肠癌的癌前病变等)的阳性检出率。3、临床应用全消化道检测建议采用双连法，TF、HB两者优势互补，是筛检全消化道出血性疾病更理想的新方法。,结论,双连,49,粪便采集时一定要将尿液与粪便样本分开,转铁蛋白检测时，尿液也一定要与便样分开,由于大肠癌早期的出血是极微量的，大便中隐血含量不均匀分布的、所以采集标本时，有可能只采集一点采集不到含有血液的粪便。而且肠道中的出血点的出血又是呈阶段性的，不是一直出血。多点采集便样可以 增加采集到出血点机率。,注意事项：,双连,50,化学法与免疫法的方法学对比,双连,51,谢谢！,
