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1、可逆抑制作用可分为三种类型：1.竞争性抑制作用 2.非竞争性抑制作用 3.反竞争性抑制作用,酶与抑制剂非共价地可逆结合，当用透析或超滤等方法除去抑制剂后酶的活性可以恢复，这种抑制作用叫可逆抑制作用。,二、可逆抑制作用,某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的结合，因而降低酶反应速度。这种作用称为竞争性抑制作用。,1.竞争性抑制作用,+I,EI,ES,P+E,E+S,竞争性抑制作用,Linewevery-Burk图,米氏方程,Lineweaver-Burk plot of competitive inhibition,某些抑制剂结合在酶活性中心以外的
2、部位，因而与底物和酶的结合无竞争，即底物与酶结合后还能与抑制剂结合，同样抑制剂与酶结合后还能与底物结合。但酶分子上有了抑制剂后其催化功能基团的性质发生改变，从而降低了酶活性。这种作用称为非竞争性抑制作用。,2.非竞争性抑制作用,非竞争性抑制剂，例如：金属络合剂，如EDTA、F-、CN-、N3-等，可以络合金属酶中的金属离子，从而抑制酶的活性。,非竞争性抑制作用,+I,EI+S,ESI,ES,P+E,E+S,+I,Linewevery-Burk图,米氏方程,非竞争性抑制剂对酶促反应速度的影响,Lineweaver-Burk plot of noncompetitive inhibition,3.
3、反竞争性抑制作用,某些抑制剂不能与游离的酶结合，而只能在酶与底物结合成复合物后再与酶结合。当酶分子上有了抑制剂后其催化功能被削弱。这种作用称为反竞争性抑制作用(uncompetitive inhibition)。,反竞争性抑制作用,ESI,ES,P+E,E+S,+I,竞争性非竞争性抑制作用机理示意图,第五节 酶活性调节,一、别构酶及酶的别构（变构）效应,二、酶的多种分子形式 同工酶（isoenzyme）,酶的别构（变构）效应,概念：有些酶分子表面除了具有活性中心外，还存在被称为调节位点（或变构位点）的调节物特异结合位点，调节物结合到调节位点上引起酶的构象发生变化，导致酶的活性提高或下降，这种现
4、象称为别构效应（allosteric effect）,具有上述特点的酶称别构酶（allosteric enzyme）。,变构酶的特点：,酶的别构（变构）效应示意图,别构酶的动力学曲线,ATCase（天冬氨酸转氨甲酰酶）的结构及其催化链的别构过度作用,别构酶的序变模型,别构酶的齐变模型,酶的多种分子形式同工酶,概念：存在于同一种属或不同种属，同一个体的不同组织或同一组织、同一细胞，具有不同分子形式但却能催化相同的化学反应的一组酶，称之为同工酶（isoenzyme）实例：乳酸脱氢酶 研究意义：作为遗传的标志；作为临床诊断指标；研究某些代谢调节机制,乳酸脱氢酶同工酶形成示意图,多肽,亚基,mRNA,
5、四聚体,结构基因,a b,H亚基为心肌型,M亚基:骨骼肌型,不同组织中LDH同工酶的电泳图谱,第六节 酶的活力测定,检测酶含量及存在，很难直接用酶的“量”（质量、体积、浓度）来表示，而常用酶催化某一特定反应的能力来表示酶量，即用酶的活力表示。,1.酶活力概念,酶活力 是酶促反应的能力。酶活力大小就是指在一定条件酶所催化的某一化学反应速度的快慢，即酶促反应的速度越快，酶活力越高，反之则表示该酶活力低。,酶的定量并非对其蛋白质进行定量，而是对它的催化能力进行定量。,如何测定酶活力？,以产物浓度对反应时间作图，可得到酶促反应速度曲线,可见，反应速度只在最初一段时间内保持恒定，随着时间的延长，反应速度
6、逐渐下降,原 因底物浓度的降低、产物的增加造成的逆反应的加快产物的抑制作用酶本身逐渐失活,酶活力的测定,(1)测一定时间内产物生成量(2)测定完成一定量反应所需时间,测定时确定三种量：加入一定量的酶；一定时间间隔；物质的增减量。,常用的酶活力单位有三种：,A.国际单位(IU),这种单位是由国际酶学委员会规定的。,在标准条件(25、最适pH、最适底物浓度)下，酶每分钟催化 1 mmol 底物转化，这样的速度所代表的酶的活力即酶的量定义为1个国际单位(IU)。,2.酶活力与单位,B.Katal,是由国际酶学委员会于1972年规定的一种新单位,在最适条件下，每秒钟催化1 mol 底物转化所需要的酶的
7、量定义为 1个Kat。,1 Kat=60106 IU,C.自定义的活力单位,这种单位简单方便，省去了许多计算；但只能进行酶活力的相对比较。,习惯上或测定时使用的反应速度的单位定义为酶的活力单位。有的甚至直接用测得的物理量，如单位时间内消光值的变化(DA/t)表示酶活力单位。,指每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数,比活力是酶制剂纯度的常用指标 比活力越大，表示酶越纯,3.酶的比活力,实际应用中也用每单位制剂中含有的酶活力数表示（如：酶单位/mL（液体制剂），酶单位/g（固体制剂），对同一种酶来讲，比活力愈高则表示酶的纯度越高（含杂质越少）。,第七节 维生素与辅因子,维生素（Vitamin）是维持机体
8、正常生命活动不可缺少的一类小分子有机化合物。它既不是机体的结构物质，又不是营养物质。许多维生素，特别是维生素B族，常常以辅因子的形式参与体内代谢。,维生素种类按其溶性可将其分为脂溶性和水溶性：脂溶性Vit:A、D、E and K水溶性Vit:B族（B1、B2、B6、B12、Vit pp）和Vc,维生素一般习惯分为脂溶性和水溶性两大类。其中脂溶性维生素在体内可直接参与代谢的调节作用，而水溶性维生素是通过转变成辅酶对代谢起调节作用。,水溶性维生素与辅酶,某些小分子有机化合物与酶蛋白结合在一起并协同实施催化作用，这类分子被称为辅酶（或辅基）。辅酶是一类具有特殊化学结构和功能的化合物。参与的酶促反应主
9、要为氧化-还原反应或基团转移反应。大多数辅酶的前体主要是水溶性 B 族维生素。许多维生素的生理功能与辅酶的作用密切相关。,嘧啶环,噻唑环,1.维生素B1硫胺素,2.维生素B2与核黄素,功能：酰基载体酰基转移酶的辅酶,3.维生素B3与泛酸,4.维生素B5与烟酸、烟酰胺,5.维生素B6与吡哆素,6.维生素B7与生物素,7.维生素B11与叶酸,叶酸和四氢叶酸(FH4或THFA),四氢叶酸是合成酶的辅酶，其前体是叶酸(又称为蝶酰谷氨酸，维生素B11)。,四氢叶酸的主要作用是作为一碳基团，如-CH3,-CH2-,-CHO 等的载体，参与多种生物合成过程。,8.维生素C,是脯氨酸羟基化酶的辅酶,维生素C,在体内参与氧化还原反应，羟化反应。人体不能合成。,9.硫辛酸,
