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1、生化检测过程中的异常值分析,生化产品部：黎程 2016年7月21日,临床生化检测主要是利用物理学、生物化学、病理学、免疫学和分子生物学的理论与技术，探讨疾病的发病机制，研究其病理过程中的特异性化学标志物或体内特定成分的改变，进而对疾病的诊断、治疗和预后形成参考依据。,鉴于这种参考意义，结果的可靠性就尤为重要。而生化检测过程中，异常值也是屡见不鲜的。为了分析这些异常值，我们把异常值的类型分为三类：,1 样本本身的因素2 测试本身的因素3 表观异常值这里的异常值指临床判断为健康人而生化某些指标却超出正常值范围。,样本本身的因素,样本本身的因素,性别：如CK：通常男子比女子肌肉发达，释放至血清中的C
2、K也就更多，参考：女24170U/L,男0-190U/L GGT：雌激素可以抑制GGT的合成，因此女性GGT通常较低，参考：女32U/L，男47U/L我们的试剂参考范围没有对性别予以区分，但有些项目的结果是因性别而不同的，结果异常时需要考虑。,样本本身的因素,年龄：如新生儿PA仅为成人的一半（150以内），由于生理性黄疸，TBIL在100mol/L以内，DBIL小于35mol/L以内应视为正常。14岁以内儿童CKMB常高于成人，45U/L以内应视为正常。TC、TG、LDL、ApoB通常较低。60以上老人则由于代谢废物累积、组织器官老化等原因，ALT、AST、LDL、ApoB通常较高，5NT常为
3、青壮年的2倍。,样本本身的因素,人种：我国人的ApoA1、HDL-C水平与欧美人相仿，而TC、LDL-C、ApoB则明显低于欧美人。非洲黑人（文献中的案例为利比里亚当地人）TP、LDH显著高于我国人，TBIL、UA、UREA、TC、TG显著低于我国人。有关不同地域的生化检测区别，文献很少，但理论上各医院都会形成针对科室服务人群的参考范围，以后在调试中可以多加留意。,样本本身的因素,饮食：饮酒特别是长期酗酒，可能引起一段时间的GGT、UREA、TBA、AST、ALT的显著升高。高盐饮食会加重肝、肾负担，引起ALT、AST活性升高，HDL下降，血液浓度上升，其余各项指标也可能有一定程度上升。药物干
4、扰则根据其机理不同而不同，如胆碱类药物、利尿剂等可引起ALT、AST升高。,样本本身的因素,体型：主要影响TG项目，通常体型魁梧的人TG偏高，HDL、性激素偏低。体型瘦弱的，通常PA较低，但不能排除可能的肝病影响。其余因素，如运动、抽血时的卧位、立位等也会有一定影响。,样本本身的因素,脂血：TG3.0mmol/L时，血清出现肉眼可见的浑浊，我们称之为脂血。脂血对结果的影响主要由于乳糜微粒引起，使入射光发生反射和散射，严重影响结果的准确性。如UREA、ALT、AST吸光度超限无结果，RBP反应曲线改变，出现负值，UA、TB、DB增高，CRE、TP、ALP、Ca偏低（pH10时，TG皂化，使反应液
5、变清）,样本本身的因素,脂血：通常速率法和双试剂终点法有助于削弱这种干扰，但乳糜严重时可能效果甚微，需要进行稀释、高速离心、乙醚处理。,样本本身的因素,溶血：除在540-550nm处有光吸收，形成干扰外，由于胞内物质的释放还可以引起一些物质的浓度变化或副反应。如红细胞内AST活性约为血清活性的40倍，ALT约7倍，LDH约180倍，因此溶血样本测定ALT、LDH、AST结果均上升，同类原理的项目还有CK、CKMB、HBDH。,另外，血红素中Fe2+、胞内VC、谷胱甘肽等能竞争反应体系中的氧化剂如H2O2，而Trinder反应的终产物也是546波长有最大吸收的红色醌亚胺物质，因此这类试剂干扰情况
6、视溶血程度及方法学而定，如GLU-OX、TC()、TG()、UA()。,样本本身的因素,样本本身的因素,黄疸：胆红素在400-540nm处有吸收，遇到氧化剂可被氧化为胆绿素、胆褐素。如GLU-OX、TG、UA、TC等，由于胆红素竞争H2O2，结果常偏低。处理方式可以考虑加胆红素氧化酶、稀释。,测试本身的因素,测试本身的因素,重复性：部分项目，由于本身的灵敏度、仪器吸样、光源稳定性方面的原因，引起测试重复性不好，比如ALT、AST、UREA、LAP、DD等，我们通常考虑重测。,测试本身的因素,曲线异常：原因可能较复杂，如吸样（异物、气泡）、搅拌（气泡，携带物）、光源不稳定、水质、清洗系统、试剂等
7、。个别异常我们通常采取重测的方式，但大片出现时，则应检查仪器各部位，把清洗、杯空白、光增益处理一次，再观察结果，同时也考虑更换试剂进行测定。,测试本身的因素,定标、质控：每个项目，通过校准品定标，定标因子一般都稳定在一段区间内，质控也应在控，这是测定临床的基础。质控若有失控，应先重测质控，仍然失控时进行定标，比对前后空白和因子看是否有改善。,原始曲线为黑色线，方程式为：a：在校准品浓度和吸光度不变的情况下，空白反应度上升。b：空白反应度度和校准品反应度均下降或校准品浓度上升。,c：在校准品浓度和吸光度不变的情况下，空白反应度下降。d：空白反应度度不变，校准品反应度上升或浓度下降。,a：QC1下降，QC2上升。b：QC1、QC2等差值上升。c：QC1上升，QC2下降。d：QC1、QC2等比值下降。,表观异常值,表观异常值,临界值：大部分项目，在临界值上，一般都会判断为正常，主要是考虑到机体本身的差异性和不确定性，且并未超过危机值。即使是血糖这种国家规定了参考范围的项目，也不能在一次体检超过6.1时既判断糖尿病。,表观异常值,不明临床判断下的体检案例：生化指标通常是为临床判断提供参考，是一种辅助的诊断措施，但不能作为判断机体是否正常的依据。体检样本也不可能人人正常，这部分的异常结果（仪器等其余条件可靠情况下），通常交给临床医生来判断比较合适。,谢,谢,观,赏,
