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1、标本采集和送检规范化要求,2013.6,正确的标本采集、运送、保存的重要性,“对质量不合格的标本进行检测不如不进行检测。”这是一条非常重要的原则。对于保证实验室的工作质量至关重要。保持标本自然状态,才能保证检验质量。它是分析前的重要质量指标,只有高度重视标本质量(标本采集的每个环节),才能实现得到及时的、准确的检验结果和缩短诊治周期的目的(TAT turn around time).,标本的采集通常是由医生和护士执行的。临床标本的正确采集在检验的全部过程中是最重要的一环,它涉及病人的准备、标本的采集、选用、处理、运送等,这样一个分析前过程。,患者准备:,1.患者的年龄、性别、种族称之为固定生物
2、因素,通过建立相应参考区间加以解决;2.患者的状态、饮食、药物称之为非固定生物因素,对这些可变的生物因素不加以控制,结果可能会出现很大偏差,从而导致错误的判断。3.采血前,患者应处于平静状态,不能运动,不能处于激动或恐惧状态,不能受过冷或过热刺激。4.采血前禁食8-12h,但禁食不能超过24h;例如胆红素空腹48h可增加240%,血糖偏低;一般要求晚饭后禁食,次日清晨采血。5.吸烟饮酒对检验结果都有影响;6.药物的药理学或毒理学的作用引起生理、生化、病理的变化,从而影响检验结果;有些药物的物理化学性质与标本中某些成分作用,或者与试剂发生反应,或者药物本身带有颜色影响比色反应,从而影响检验结果。
3、7.体位变化也影响检验结果。从卧位到坐位或站位时,水分从血液向组织间隙移动,导致大分子物质蛋白质假性增高。,标本采集,1.把握时机:血液中许多成分在一天中会出现周期性生理变化,如胆红素、铁清晨最高;生长激素入睡后出现短时高峰;血浆蛋白在夜间降低;心肌标志物cTnT、cTnI在发病后3h开始升高,1-2周逐渐恢复,采血时机4-6h为宜。此外,还应考虑到饮食、患者状态、用药、输液等情况,一般在早晨空腹、安静状态、用药和输液前采集标本。2.选择适当容器:根据项目需要选择相应的促凝管或抗凝管,适当的混匀等;3.止血带时间:不宜超过2min,禁止用力在采血部位拍打,穿刺后患者不要握拳,皮肤消毒后,用干棉
4、签擦干再行穿刺,静脉穿刺要求一次成功,避免同一部位反复穿刺。4.唯一性标志:建立申请单与标本容器的唯一对应标识。5.送检:要及时、避免污染。,细菌培养标本采集和送检,标本管理的安全提示,标本的采集、运送和处理应在无菌操作和/或防止污染的原则下进行。已采集的原始标本都应置于防漏、密封的容器中运送,并有条形码标识。带针头的注射器运送标本时,用无菌试管或其他防护装置套住注射针,再置于防漏塑料袋中运送。,一、血培养标本的采集和送检,1.采血时机:最好在发热期间,以正在发冷发热时为宜,最佳条件是在抗菌治疗前。2.采血次数及间隔:在急性发热性疾病和急性化脓性疾病时,需要马上用抗菌素治疗或需要紧急手术治疗的
5、患者,应立即从两臂分别取1份标本。对感染性心内膜炎患者24h内取血3次,每次间隔30分钟,必要时次日在做2次。对发热不明的两次抽血间隔60min,必要时2448h后再抽血2次。据统计1次抽血阳性率10.8%,2此抽血阳性率14.8%。,3.采血部位:多次采血应在不同部位,一是避免污染,二是在不同部位取血,2次分离出同样菌种才是确定病原菌的有力证据。4.采血量:成人10ml;儿童5ml;婴幼儿2ml;5.无菌操作:从皮肤消毒、标本采集、运送、分离各环节都要严格无菌操作,避免污染。用头皮针抽血时,应更换针头再将血注入培养瓶。6.送检:在20室温下存放不应超过2小时,要求在低室温下要及时送检。,二、
6、痰培养标本的采集和送检,1.标本采集:要求患者清晨留取,先用清水漱口三次,之后用力自然咳出。2.标本运送:标本直接吐在专用痰盒内立即送检,最好在20min内送达细菌室。3.标本质量:显微镜涂片检查13类为唾液不做培养,重留标本;45类为合格标本;6类为气管穿刺液,如未见到WBC,而扁平上皮10/LP,也应重新留取标本。,4.显微镜检查初步报告:在对标本质量检查的同时,可以作出初步病原学参考诊断,如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、球菌或杆菌等。5.分离培养:最好接种三种培养基,即血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基(中国篮)。6.特殊要求的作特殊处理:如抗酸染色等。,三、尿培养标本的采集
7、和送检,1.标本采集的基本要求:在应用抗菌素之前或停药5d以上;尿液应在膀胱停留68h以上;留取标本次数不能少于3次;留取标本必须保持清洁,不能有任何外部污染;留尿的方法:清洁排尿法、膀胱穿刺法、导尿法、肾盂穿刺法等。,(1)清洁排尿法:是最常用的方法,也是最易造成假阳性的方法,有很多注意事项需要患者按要求认真去做,更重要的是我们医务人员要耐心详细告知病人如何去做。用肥皂水清洗外阴,然后用清水冲洗尿道口;女患者要将阴唇分开清洗,男患者要将包皮翻转清洗,排出前段尿,留取中段尿。婴儿要做阴部消毒,将无菌瓶对准尿道,用橡皮膏固定。(2)膀胱穿刺法:是避免尿道正常菌群污染的最好采集方法。(3)留置导尿
8、法:用消毒剂严格消毒导尿管和引流管连接处,用注射器穿刺导尿管吸取尿液,不能打开尿管放出留取,也不能用引流袋中的尿液作为标本。,2.标本的送检:标本留取后1小时之内必须送检。超过2小时易造成假阳性,应重新留取标本送检。标本送达实验室后,应立即接种,不能存放。,四、便培养标本的采集和送检,1.标本采集:应在发病早期、未用抗菌素前采集标本。可直接采集、也可用直肠棉拭子采集。2.标本送检:标本采集后应立即送检;实验室接到标本后应立即接种。3.显微镜检查:粪便直接涂片做革兰氏染色,可作为弧菌、弯曲菌、葡萄球菌、白色念珠菌等初步筛查。,五、胸腹水、脑脊液标本的采集和送检,1.由医生以无菌穿刺采集,用带盖的
9、无菌容器送检;2.如果是直接接种血琼脂、巧克力琼脂,接种前应离心1500/min,15min;3.用血培养瓶增菌培养最好,可以提高培养阳性率,阳性标本再接种血琼脂、巧克力琼脂,巧克力琼脂放CO2环境中培养。,生化标本的采集与送检,一、血液标本的采集与送检,血糖:空腹血糖、餐后2小时血糖;血浆或 血清;静脉抽血2ml;绿帽肝素抗凝管、红帽促凝管。血脂:禁油腻三天,空腹12小时以上;血清;静脉抽血34ml;红帽促凝管。其他项目:没有特殊要求,可根据病情需要随机进行检测,但是,因为大多数生化项目均受饮食、运动、时间、气温、用药等多种因素影响,以晨起空腹安静时为最佳。送检:标本采集后要及时送检,室温下
10、不能超过两小时,特别是夏季。注入标本时必须防止溶血。,血糖测定,二、其他标本的采集与送检,尿液:24小时尿糖、24小时尿蛋白、肌酐清除率要求病人留取24小时的全部尿液,必须向病人讲清楚留尿的方法,其方法是:晨起6点排净尿液弃去不要,开始计时,随后每次排尿都要存放在同一个容器内,特别是大便前一定要先排尿后再解大便,直到次日早6点排净尿液放入容器,充分混匀后取10ml送检,夏季需要在容器内放防腐剂二甲苯10ml。脑脊液、胸腹水:要求无菌采集,及时送检,如果是血性脑脊液或胸腹水,可以放肝素抗凝管内混匀后送检。标本量不能少于2ml。,常规标本的采集与送检,一、血液标本,血常规:静脉抽血1ml,不能少于
11、1ml;紫帽抗凝管(EDTA);颠倒混匀10次;全血测定;随机抽血;凝血三项、D-Dimer、血小板聚集:静脉抽血2ml,要求量要准确;蓝帽抗凝管(枸橼酸钠);颠倒混匀10次;血浆测定;随机抽血;血沉:3.8%枸橼酸钠抗凝剂0.4ml,静脉抽血1.6ml;黑帽抗凝管(枸橼酸钠)0.6ml,静脉抽血2.4ml;颠倒混匀,及时送检,要求血量要准确。血流变:晨空腹,静脉抽血5ml,黑帽抗凝管(肝素),血量要足,颠倒混匀要充分,2小时内送检。,二、尿液标本,尿常规、尿沉渣:清晨第一次排尿的中段尿最佳,留尿20ml;最好在2小时内送检,夏季不能超过2小时。随机尿:一天当中任何时间都可以留尿化验,但有一个
12、基本要求,尿液应当在膀胱内存留3-4小时,同时不能剧烈活动。12小时尿(艾迪氏计数):晚6点排净尿液弃去不要,开始计时,随后每次排尿都要存放在同一个容器内,直到次日早6点排净尿液放入容器,充分混匀后取10ml送检,夏季需要在容器内放防腐剂二甲苯10ml。尿糖、酮体:随时采集、及时送检。注意:住院病人一定要早晨留尿。,三、粪便标本,便常规:要求挑取带有脓血的部位,量在0.51.0g便潜血:要求禁食三天带油腻的食物,任意留取0.51.0g注意:婴幼儿、卧床病人留取大便时,特别 是稀便不要与尿液混合,同时要注 意不能用纸巾一类的包裹,以免水 分丢失。,四、其他标本,脑脊液、胸腹水:要求无菌采集,及时
13、送检,如果是血性脑脊液或胸腹水,可以放肝素抗凝管内混匀后送检。标本量不能少于2ml。阴道分泌物、前列腺液、关节腔积液:随时采集随时送检,这类标本一般量都少,必须尽快送检。采集阴道分泌物前禁止用药、冲洗、房事。精液:要求必须禁房事,25岁以下禁3天,35岁以下禁5天,45岁以下禁7天。,免疫学检验标本采集与送检,一、血液标本,免疫项目检测的特点是标本量相对较大,必须保证量的充足。性激素六项、甲状腺功能、肿瘤标志物、乙肝六项、肝炎病毒分型等静脉抽血4ml,红帽促凝管。风湿五项:静脉抽血5ml,红帽促凝管3ml,枸橼酸钠抗凝管2ml,颠倒混匀。TB抗体、支原体抗体、麻疹抗体、肥达反应等静脉抽血23m
14、l,红帽促凝管。注意:标本不能溶血,送检要及时。,二、尿液标本,尿早早孕:为什么叫早早孕?因为现在的检测技术灵敏度高、特异性好,在受孕后35天,HCG的浓度已经达到检出水平,这时就能准确检测出来,比B超及人工触诊要早得多,所以叫早早孕检测。注意:以晨尿检测最佳,如果是在喝了大量水以后,尿液被稀释可能会出现假阴性,还有日期计算不准也会造成假阴性。,不合格标本拒收标准:a 标本贴签与申请单填写内容不一致b 标本量太少,无法完成检测c 抗凝标本出现凝固d 标本容器破损,标本流失或受污染e 溶血或脂血标本f 延迟送达的标本g 尿便标本混杂,小结,应该重复讲的是:正确的检验结果始自正确的标本采集,而正确的采集标本就要求临床医生、护士和检验技师都必须通晓其要领。我们今天讲的分析前质量控制主要内容就是对标本采集与送检的质量保证,也就是我们所要求通晓的要领。要做好分析前质量控制必须有临床医生和护士的共同参与和全面配合,才能使分析前质量控制发挥作用,产生实质性的效果。我们检验科感谢临床科室多年来对我们工作的大力支持和帮助;并真诚希望与临床科室积极配合为临床和患者提供准确、可靠的检验结果。,