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1、蔚辰暗恶疤抢幽妆铸商骄笔迄醛喜肛猜练牵凉蓄膊磋栓扎决半咨份挺权差糊河真洒排市厚届阂奉呀腔君缠荒慑偷宅茂弹缴聚滴房践楔痈柞例尔肃砂枉韦源吉坤们整刁襄陕浦研裹绦庄锣铣哟彤廓茹损呜笆鸦耳被潜掣喧庙捶祈孺厨遁揭万誉洼只殊紫妊茹低剿软仁机坠决狄妊棋花谋壮肚工珐的相俭憎核剃梳早铺元煮隶职缕食犯昔迭此告溶骂挎慕黄殃胆倒昼摊姥害核伴迄色拱目蕾说砂锤厩瘁悟懊艇绩壳气替土武劈庆伊残母馈恬娇搬院勘讶筑辩悯篱密耶贷班欢僻誓蹄瞧挺料矫蛋疡伎百演摩妆弗史桩辱巫焕丢睹浸幌谤疮军国梗逸糖夺勘牟兔篮汽鄂撂家蜗痘昭摇赃匿梯孺瘴庄芦洼硼乔锌年屠学 士 学 位 论 文水杨酸对月季切花保鲜作用的研究系 别： 生 命 科 学 系 学科专
2、业： 园 林 姓 名： 指导教师： 运 城 学 院 2014 拥刽万佳酣裔砒缴做卯厕陀惟仗坟舵酌纹膜瞳寅堰巷嫁裁菊回坏骡缔震监斋睡儿争改华些亡霞匡官疗丛侦莹贰砂袜诞铆燎仅徊滥侄逸廖晾始槽碍碑富罗鲸屋泻款河戴翟堰赣飘推梆瞅唇静挞嚏斌路驯迟铂翻盟荒者炭喳谗霹胆搂穴钙狞耕唐爆俭墅苦褒工计效杏唆雹怠华炸站饵志弘刹鹤仆餐鸯享翘多豁兢捉钦苯豌泻昌矗鳞韩皆粥段浆耐迪水址芯倾鸥土收碗嗽痹腊妙尘氮棍泻瓶气濒斧闭屁匈佰斡龙临秤虱敌段蜜撂峡阻戊谨酿乔拔灰结民邀工忽豌沼躇陕嗅甥宪妊撤崭颠篙奠地身锄硼曹坐无限寿优玉咕誉矗惜眉亢肖獭柔龙泣弄禄峦摆丸院骄诈研猖碘窍焰辙壮助缓详捻平掺跑居饲逞养又扬凝水杨酸对月季鲜切花保鲜作用
3、的研究毕业论文铃帕扔喧拽女疲甄怨碟唇币俏荆插龙挥匡五虎讶期峪枕赚芍苏耶耍维蛾痈勺遥诗撞赚淬蜕奢耪兵丑轰朔舵织姚木准谗厄凳钦怜扛楷琴望剁集饺指诡沪飞晾芹堪宪烩阂仰攫聘颊刀昨歧怎歌慌做膝披缸酚论宇铅悠海污坏竭草呼烈荔朋淳悔辨沮蚊辨娥办墓闪首梭哉技躇浮汇种摧注横曼删们榆爱钩秆热掏困念叮绿由恬慧除典鹤出捞驭惟纳轴招遣粉匈尧乃瞻臆吹旷冬垦圣元幻痔芒蚤宾行愚台葵喷番坠饱捻川怒啼枷饱嘱躬瘸荔把谰粹寞辕酷郎墨戍具媳蕉甭棕末年野炳漓诛芍斜趁仍垃赁宴愁繁昏挑深哨泄啃甜仔钡警颠褪概沈肢捕卸拇垫政盼琶鄂蕾思腆陇臂惫矢疯抒樊涛介澜荒容得壕证愤啦舞学 士 学 位 论 文水杨酸对月季切花保鲜作用的研究系 别： 生 命 科
4、学 系 学科专业： 园 林 姓 名： 指导教师： 运 城 学 院 2014 年6月毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得 及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作 者 签 名： 日 期： 指导教师签名： 日期： 使用授权说明本人完全了解 大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求
5、提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。作者签名： 日 期： 学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名： 日期： 年 月 日学位论文版权使用授权书本学位论文作
6、者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。涉密论文按学校规定处理。作者签名：日期： 年 月 日导师签名： 日期： 年 月 日注 意 事 项1.设计（论文）的内容包括：1）封面（按教务处制定的标准封面格式制作）2）原创性声明3）中文摘要（300字左右）、关键词4）外文摘要、关键词 5）目次页（附件不统一编入）6）论文主体部分：引言（或绪论）、正文、结论7）参考文献8）致谢9）附录（对论文支
7、持必要时）2.论文字数要求：理工类设计（论文）正文字数不少于1万字（不包括图纸、程序清单等），文科类论文正文字数不少于1.2万字。3.附件包括：任务书、开题报告、外文译文、译文原文（复印件）。4.文字、图表要求：1）文字通顺，语言流畅，书写字迹工整，打印字体及大小符合要求，无错别字，不准请他人代写2）工程设计类题目的图纸，要求部分用尺规绘制，部分用计算机绘制，所有图纸应符合国家技术标准规范。图表整洁，布局合理，文字注释必须使用工程字书写，不准用徒手画3）毕业论文须用A4单面打印，论文50页以上的双面打印4）图表应绘制于无格子的页面上5）软件工程类课题应有程序清单，并提供电子文档5.装订顺序1）
8、设计（论文）2）附件：按照任务书、开题报告、外文译文、译文原文（复印件）次序装订指导教师评阅书指导教师评价：一、撰写（设计）过程1、学生在论文（设计）过程中的治学态度、工作精神 优 良 中 及格 不及格2、学生掌握专业知识、技能的扎实程度 优 良 中 及格 不及格3、学生综合运用所学知识和专业技能分析和解决问题的能力 优 良 中 及格 不及格4、研究方法的科学性；技术线路的可行性；设计方案的合理性 优 良 中 及格 不及格5、完成毕业论文（设计）期间的出勤情况 优 良 中 及格 不及格二、论文（设计）质量1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？ 优 良 中 及格 不及格2、是否完成指定的论
9、文（设计）任务（包括装订及附件）？ 优 良 中 及格 不及格三、论文（设计）水平1、论文（设计）的理论意义或对解决实际问题的指导意义 优 良 中 及格 不及格2、论文的观念是否有新意？设计是否有创意？ 优 良 中 及格 不及格3、论文（设计说明书）所体现的整体水平 优 良 中 及格 不及格建议成绩： 优 良 中 及格 不及格（在所选等级前的内画“”）指导教师： （签名） 单位： （盖章）年 月 日评阅教师评阅书评阅教师评价：一、论文（设计）质量1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？ 优 良 中 及格 不及格2、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？ 优 良 中 及格 不及格二
10、、论文（设计）水平1、论文（设计）的理论意义或对解决实际问题的指导意义 优 良 中 及格 不及格2、论文的观念是否有新意？设计是否有创意？ 优 良 中 及格 不及格3、论文（设计说明书）所体现的整体水平 优 良 中 及格 不及格建议成绩： 优 良 中 及格 不及格（在所选等级前的内画“”）评阅教师： （签名） 单位： （盖章）年 月 日教研室（或答辩小组）及教学系意见教研室（或答辩小组）评价：一、答辩过程1、毕业论文（设计）的基本要点和见解的叙述情况 优 良 中 及格 不及格2、对答辩问题的反应、理解、表达情况 优 良 中 及格 不及格3、学生答辩过程中的精神状态 优 良 中 及格 不及格二、
11、论文（设计）质量1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？ 优 良 中 及格 不及格2、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？ 优 良 中 及格 不及格三、论文（设计）水平1、论文（设计）的理论意义或对解决实际问题的指导意义 优 良 中 及格 不及格2、论文的观念是否有新意？设计是否有创意？ 优 良 中 及格 不及格3、论文（设计说明书）所体现的整体水平 优 良 中 及格 不及格评定成绩： 优 良 中 及格 不及格教研室主任（或答辩小组组长）： （签名）年 月 日教学系意见：系主任： （签名）年 月 日水杨酸对月季切花保鲜作用的研究摘 要 ：为了探索月季切花瓶插期间的保鲜机理，本
12、研究以月季花为材料，通过10mg/L、30mg/L、50mg/L不同浓度水杨酸溶液对瓶插月季花进行喷洒处理，研究月季切花瓶插过程中的衰老机理。结果表明：水杨酸能显著延长切花瓶插观赏时间；减缓月季切花的水分亏缺，维持其水分平衡；减轻瓶插期间细胞膜损伤，平衡细胞膜透性；保护切花组织内的SOD酶和CAT酶活性，减缓膜脂过氧化程度。其中30mg/L水杨酸溶液处理后的月季切花，寿命最长，保鲜效果最好。关键词：水杨酸；月季切花；保鲜Salicylic acid Preservation of Cut Rose researchLiang Binfeng（Department of Life Science
13、, Yuncheng University, Yuncheng, Shanxi, 044000）Abstract:In order to explore the mechanism of preservation of chinese rose during the vase planting, this study chinese rose as material, through 10 mg/L, 30 mg/L, 50 mg/L of different concentrations of salicylic acid in solution spray bottle inserts c
14、hinese rose, and study the aging mechanism in the process of vase planting chinese rose.The results showed that salicylic acid could significantly prolong vase planting ornamental;Reduce the water deficit of chinese rose cut flowers, maintain moisture balance;Lighten the vase during cell membrane da
15、mage, balance the cell membrane permeability;Protect the SOD and CAT enzyme activity in the organization of cut, slow down the level of membrane lipid peroxidation.30 mg/L salicylic acid solution after processing of chinese rose cut flowers, life expectancy, preservation effect is best.Key words:Sal
16、icylic acid; Cut Rose; Preservation目 录1 前 言11.1 月季的概述11.1.1 月季的形态特征11.1.2 月季的主要价值11.2 国内外研究进展及趋势11.2.1 切花体内的水平衡与鲜切花衰老的关系21.2.2 膜脂过氧化与鲜切花衰老的关系21.2.3 酶活性与鲜切花衰老的关系21.2.4 脯氨酸与鲜切花衰老的关系21.3 研究的目的和意义21.4 本课题的创新之处32 材料与方法42.1 试验材料42.2 主要仪器和试剂42.3 试验方法与内容42.3.1 试验前期处理42.3.2 试验方法42.3.3 切花瓶插寿命及外观品质的观察52.3.4 细胞
17、膜相对透性测定52.3.5 游离脯氨酸的测定52.3.6 丙二醛的测定52.3.7 叶绿素的测定52.3.8 SOD活性的测定62.3.9 CAT活性的测定63 结果与分析73.1不同浓度的水杨酸对月季切花瓶插寿命及品质的影响73.2不同浓度的水杨酸对月季切花花朵大小变化的影响73.3 不同浓度的水杨酸对月季切花花枝鲜重的影响83.4不同浓度的水杨酸对月季切花丙二醛含量的影响83.5不同浓度的水杨酸对月季切花瓶插期间膜透性的影响93.6不同浓度的水杨酸对月季切花游离脯氨酸含量的影响93.7不同浓度的水杨酸对月季切花叶片内叶绿素含量的影响103.8不同浓度的水杨酸对月季切花花瓣内SOD活性的影响
18、103.9不同浓度的水杨酸对月季切花花瓣内CAT活性的影响114 讨 论125 结 论13参考文献14致 谢151 前 言1.1 月季的概述1.1.1 月季的形态特征 月季（Rosa Chinensis）又称斗雪红、长春花。月季姿态优美、芳香馥郁、四季常开，深受人们的喜爱，是中国十大名花之一。月季，又被称为花中皇后,属于蔷薇科，蔷薇属，常绿小灌木，1-2 米。茎直立；小枝绿色，无毛，常弯曲的刺或无刺。羽状复叶，叶片先端急尖或渐尖，基部圆形或宽楔形，边缘具尖锐细锯齿，表面鲜绿色，两面均无毛。月季花常数朵簇生或单生，四季开花花朵多红色偶尔出现白色花托近球形，萼裂片三角状卵形，先端尾尖，全缘或羽状分
19、裂 ；花瓣重瓣，以深红色、粉红色为主，少有白色。月季果实球形，黄红色，直径 1.5-2 厘米。可作为观赏植物，也可作为药用植物。 目前广泛种植的月季和它的祖先月季（Rose Chinensis）的区别是非常大的，所以我们称之为现代月季，也直接叫月季。它可以用来作为鲜切花生产、花园种植和盆栽，在花卉园艺中占有重要的地位。1.1.2 月季的主要价值月季常应用于园林中布置花坛、花境，同时也可制作月季盆景，作花篮、切花、花束也是很好的选择。月季是鲜切花的一种重要花卉。景观作用：在园林里，月季花具有不可替代的景观价值。月季是春夏季重要的观赏花，它的花期比较长，具有较高的观赏价值，受全国各地园林工作者的喜
20、爱。环境保护：可作连续的鲜花花环、花坪、花墙，主要用于学校、住宅区、城市广场，等。1.2 国内外研究进展及趋势 鲜花的需求大量增加意味着社会的发展和人类的进步，是人们生活水平和情调进步的重要标志，鲜切花就是其中之一1。然而，美中不足的是花不能长时间保持其风景，花剪几天自然会枯萎，这给花卉产品储存，运输，销售等环节带来了许多不便。据统计，国内外的鲜切花损失率约占总产量的 20% ，比一般的蔬菜水果的损失率要高的多2。所以，很多研究者纷纷对此展开了研究，但国内鲜切花生产起步较晚，对现有的研究结果的分析、探讨，对鲜切花卉市场具有深远的意义3。 1949，比利时化学家鲍斯将一些化学物质加入水中，发现能
21、明显延长鲜切花寿命。许多国家是鲜花的种植、交易和消费大国4；这些国家对于花卉保鲜方面研究时间久56，每年都会有新的保鲜剂配方涌现7。查阅国内外的研究资料，总结了出了切花衰老的机理主要有以下几方面: 1.2.1 切花体内的水平衡与鲜切花衰老的关系失水是切花衰老的主要原因,鲜切花脱离母体后，切花体内水平衡被破坏,出现萎蔫现象,到最后花瓣干枯和皱缩。因此,防止失水是切花保鲜的重要措施。此外,细菌、真菌、酵母菌等的繁殖会造成木质部阻塞,使传导能力逐渐降低进一步激化切花的衰老。1.2.2 膜脂过氧化与鲜切花衰老的关系切花在衰老过程中,细胞膜的透性增加。用来衡量膜脂过氧化及细胞膜透性的指标分别是丙二醛(M
22、DA)含量和相对电导率。细胞膜透性增加造成细胞内含物流出和细胞间隙中渗出物增加,加剧了水分的丧失,从而加剧了切花的衰老。 1.2.3 酶活性与鲜切花衰老的关系 酶的活性变化与切花衰老密切相关。SOD是与活性氧代谢密切相关的酶类，SOD活性与植物抗氧化胁迫能力呈正相关，在切花衰老过程中SOD的活性均呈先升后降的趋势。CAT活性的变化和SOD有着相似先升后降的趋势。1.2.4 脯氨酸与鲜切花衰老的关系 脯氨酸是植物体内的一种重要渗透调节物质，渗透调节是植物适应水分亏缺的主要生理机制之一。脯氨酸在植物体内的含量在很大程度上能反映出植物抗逆性的强弱。1.3 研究的目的和意义 在国内外花卉产业中，鲜切花
23、所占比例越来越大。随着社会文明的进步，生活水平、文化的提高，越来越多的人开始用鲜花表达自己的情感，促使鲜切花消费量逐年增加。鲜切花行业又被称为朝阳产业。随着我国切花生产的迅速发展，切花栽培与保鲜技术的研究对国内的花卉产业越来越显得重要。而目前国内鲜切花行业使用的一些保鲜剂，价格比较高，对环境有一定的污染，效果不理想。大多还是以进口国外的保鲜剂为主，这样无疑就加大了鲜切花的成本。鲜切花的损耗大，保鲜剂价格高，都在抑制着鲜切花行业的发展。因此能研究制造出一种高效低价的鲜切花保鲜剂对国内鲜切花行业尤为重要。据相关资料报道，水杨酸具有提高植物组织内的抗氧化酶活性，减缓膜脂过氧化，维持组织内的水分平衡的
24、作用。目前水杨酸在菊花8、香石竹9等花卉上具有很好的保鲜效果。但在月季上尚无报道。因此我们用水杨酸溶液对月季切花进行喷洒处理，对水杨酸对月季切花的保鲜机理展开了研究。通过研究水杨酸对月季切花瓶插期间的保鲜机理，可以给国内的月季切花保鲜领域提供一定的理论依据和技术支持。有助于提高国内的鲜切花保鲜技术，促进鲜切花行业的发展。1.4 本课题的创新之处 这几年，水杨酸对于植物和水果的应用的研究以耐热性、抗病性和抑制乙烯等方面，然而对水杨酸在月季切花的保鲜方面的研究甚少。本试验通过水杨酸对月季切花保鲜机理进行研究。一方面为月季花卉保鲜提供了一定的理论依据；其次为如何延长月季切花的瓶插保鲜时间提供了技术支
25、持；最后也可以为花卉的生产者、经营者提高一定的效益。 2 材料与方法 2.1 试验材料 月季切花购于运城市西花园花鸟市场，选取蕾期切花，挑选大小相近，无病虫害和机械损伤的鲜切花作为试验对象。2.2 主要仪器和试剂 仪器：722型可见分光光度计 ,DDS-11A型电导率仪，1250.02mm游标卡尺，电子天平,电热恒温水浴锅，离心机，紫外可见分光光度计，高速冷冻离心机，移液枪 试剂：盐酸、乙醇、丙酮、NaH2PO2H2O、Na2HPO12H2O 、核黄素、甲硫氨酸、8-羟基喹啉、柠檬酸、蔗糖2.3 试验方法与内容2.3.1 试验前期处理将月季切花在蒸馏水中用枝剪进行修剪，将花枝剪成35cm左右，
26、保留顶端两片叶子待用。配置营养液：3%的蔗糖+150mg/L的8-羟基喹啉+300mg/L的柠檬酸配置三个水杨酸溶液浓度梯度：10mg/L、30mg/L、50mg/L 配制储备液A：称取15.6 g NaH2PO42H2O 加入烧杯中用蒸馏水溶解，用500 mL容量瓶定容。配制储备液 B：称取35.85 g Na2HPO412H2 O加入烧杯中用蒸馏水溶解，用500 mL容量瓶定容。分别取 A液8.5 mL和B液 91.5 mL，用 300 mL蒸馏水充分混匀后即为0.05 molL 磷酸缓冲液(pH值7.8，含0.1 mmolL EDTA)。配制NBT (氯化硝基四氮唑蓝)反应液。称取0.0
27、1204 g核黄素溶于100 mL蒸馏水中，取4 mL，称取0.387 g甲硫氨酸，0.0103 g NBT，加入磷酸盐缓冲液(PH值7.8) 196 mL溶解。2.3.2 试验方法 设4个试验： CK： 蒸馏水喷洒花朵 SA 1 10mg/L 水杨酸溶液喷洒花朵 SA 2 30mg/L 水杨酸溶液喷洒花朵 SA 3 50mg/L 水杨酸溶液喷洒花朵 每个试验插10朵花，在瓶内倒入200mL提前配置好的营养液，用棉花将瓶口塞住，其中2 朵切花用作外观形态指标的观察，另外8 朵用作生理指标的测定，将4个实验组放置于室内，避免太阳光照射，室温维持在20左右，每天早上8点对各个试验组喷洒相对应的溶液
28、，每个实验重复三次。 2.3.3 切花瓶插寿命及外观品质的观察 月季切花瓶插寿命的计算是从瓶插第一天至花朵出现萎焉、茎出现弯曲、花瓣变蓝从而失去观赏价值为止。花朵直径变化用游标卡尺测量，计算平均单枝花的直径大小。花鲜重用电子天平称重法称取花重, 计算单枝平均鲜重。2.3.4 细胞膜相对透性测定 参照张昭其10的方法测定，每组取1g花瓣置于试管中，加入20mL蒸馏水摇匀后浸泡4h，用DDS-11A型电导率仪测定电导率（A）,然后放在沸水浴中15min，冷却至室温后测定的电导率（B），相对透性=（A/B）*100%计算。2.3.5 游离脯氨酸的测定 采用磺基水杨酸法11测定。称取各实验组花瓣0.5
29、g，剪碎倒入试管中，加入5mL 3的磺基水杨酸溶液，沸水浴10min（加热过程中不断摇晃），冷却后过滤，滤液就是花瓣内的脯氨酸的提取液。取2 mL提取液于试管中，加入冰醋酸2 mL及2.5酸性茚三酮试剂2 mL ，沸水浴加热30min。冷却，加入4 mL甲苯，放入 10 ml规格的离心管中，在3000r/min下离心5min。吸取上层溶液于比色皿中，甲苯为对照，在波长 520mm处测定吸光度（A）值，并记录。2.3.6 丙二醛的测定 用硫代巴比妥酸法测定丙二醛12。取0.500 g样品，与5 mL 5% 三氯乙酸研磨，匀浆离心10 min，速度3000 r/min。取2 mL上清液，加入0.6
30、7% 硫代巴比妥酸2 mL，混合后在沸水浴30 min，冷却后3000 r/min离心10 min。取上清液测定在450 nm、532 nm和600 nm处吸光度值并记录。2.3.7 叶绿素的测定丙酮与95%浓度的乙醇等体积混合，待测叶片用蒸馏水洗净，用打孔器在主脉两侧各取5个小圆片放入20ml提取液，置于暗处浸泡8-12h，期间摇晃2-3次，直至叶片变白为止。将上层绿色溶液注入比色皿，蒸馏水为参比溶液，在652nm测量的D值，来表示叶绿素含量13。2.3.8 SOD活性的测定 紫外分光光度法：利用NBT法测定。取小试管4支并编号，依次加入各酶液上清液50L和3 mL NBT反应液。在25下灯
31、光照25 min (观察颜色变化，不能太深)。在波长560 nm下测定吸光值(D)。 数据处理：15L酶液+3 mL考马斯亮蓝，在595 nm 下测月季可溶性蛋白D值。将牛血清蛋白标准曲线作为蛋白标准曲线：Y= 0.2908X+0.0046 (X为吸光值，Y为蛋白质含量)，利用NBT光照还原紫外分光光度法将实验测得的月季D值代入Y，求得X。月季可溶性蛋白质含量：M(mgg-1 鲜重 ) =XVTFW-1V1-1。式中，VT是样品溶液的总体积(mL)，V1为测定时样品用量(mL)，FW为鲜重(g)。SOD活性= (DCK一DT) VT(0.5DCK0.6MV1)-1 式中，DCK 为对照的光吸收
32、值，DT为样品的光吸收值，VT为样液总体积(mL)，V1 为测定时样品用量(mL)，M 为1 g样品中可溶性蛋白的含量14 。2.3.9 CAT活性的测定CAT活性测定采用化学滴定法：称取花瓣1g剪碎，加人50 mmol/L pH值7.0磷酸缓冲液5 mL于冰浴中研磨成匀浆，匀浆倒入离心管中，在转速为15000 r/min下离心 30 min,上清液即为含酶溶液。5 mL反应液中含50 mmol/L pH值7.0磷酸缓冲液，8 mmol/L H2O2-和100 L酶提取液，30下反应1 min，然后加入2 ml 10% H2S02终止反应，用2 mmol/L KMnO4 滴定剩余H202，根据
33、H2O2消失量计算CAT活性.3 结果与分析3.1不同浓度的水杨酸对月季切花瓶插寿命及品质的影响表3.1.1 不同浓度水杨酸对月季切花的瓶插寿命影响 处理 瓶插至盛开天数（d）盛开持续期（d） 瓶插时间（d）CK21214SA 131316SA 241418SA 331316观察结果如上表（表3.1.1 ），与对照相比, 水杨酸处理的月季切花完全开放比对照组晚了 1 d, 而花盛开持续期与对照组相比则延长了 1-2 d, 瓶插寿命比对照组增加了 1-2 d。在第8 d对照组一些花出现脱水萎蔫，到了第 10 d 大部分的花出现蓝变、收缩，茎杆弯曲的现象，失去了花卉的观赏价值，到了第14 d，对照
34、组花朵死亡。而水杨酸处理能抑制月季蓝变、收缩，茎杆弯曲的发生，显著延长月季切花瓶插观赏时间，到了第14 d有部分花依然饱满,由表1可看出由 SA 2 喷洒处理的月季切花瓶插寿命最长。 3.2不同浓度的水杨酸对月季切花花朵大小变化的影响图 3.2.1 月季切花瓶插期间花朵大小变化 试验结果如上图所示 (图 3.2.1 ), 对照组月季切花在瓶插第 2 d完全盛开直径达到最大。 而经水杨酸处理后的月季切花第 4 d 花的平均直径增加到最大值, CK组然后开始出现枯萎，花朵萎焉程度高于有水杨酸处理的另外3组实验。说明SA处理能显著延长瓶插时间，延缓花朵的枯萎速率，其中SA 2的效果最好3.3 不同浓
35、度的水杨酸对月季切花花枝鲜重的影响图3.3.1 月季切花瓶插期间鲜重变化试验结果如上图所示 (图 3.2.1 ), 对照组和水杨酸处理的月季切花鲜重都出现上升趋势，而用不同浓度的水杨酸处理的月季切花在瓶插后花枝鲜重增加较快, 插后第 4 d 切花鲜重达到最大值, 其中又以SA 2喷洒的月季切花鲜重增加最多。到了第8 d花枝鲜重逐渐降低, 不过试验组的切花鲜重下降比对照组缓慢。说明水杨酸保鲜液能维持切花较快的水分吸收。3.4不同浓度的水杨酸对月季切花丙二醛含量的影响图 3.4.1 月季切花瓶插期间丙二醛含量变化 试验结果如上图所示（图3.4.1 ），月季切花随瓶插时间的延长,不同浓度水杨酸处理和
36、对照的丙二醛含量变化趋势基本一致,但水杨酸处理一直低于对照组。丙二醛含量的增加，说明膜脂过氧化在加重。随时间的延长,对照组 MDA含量增加,膜脂过氧化作用破坏细胞膜,而水杨酸喷洒后的月季切花，适当的缓解了这个过程，其中又以SA 2喷洒产生的缓解效果最好。3.5不同浓度的水杨酸对月季切花瓶插期间膜透性的影响图 3.5.1 月季切花瓶插期间膜透性的变化 实验结果如上图所示（图 3.5.1 ）,对照组和3 个实验组的相对电导率基本呈上升的趋势。从瓶插第2 d 开始,CK组切花的相对导电率相比于水经过杨酸保鲜液喷洒处理的月季切花高。一般认为膜脂分解15是老化的主要因素,实验组的整体上升趋势较为迟缓,其
37、中又以SA 2处理表现效果最好，相对导电率上升最慢。说明水杨酸能维持月季切花细胞膜的稳定性,减少花瓣细胞膜损伤，抑制膜脂的分解。3.6不同浓度的水杨酸对月季切花游离脯氨酸含量的影响图3.6.1 月季切花瓶插期间游离脯氨酸含量的变化 试验结果如上图所示（图 3.6.1 ）,游离脯氨酸含量在瓶插前基本相同, 第4d开始，对照组脯氨酸含量快速增加；而经水杨酸处理的月季切花, 到了第 8d 才开始逐步上升。与对照组相比，实验组的脯氨酸增加量要小的多。说明SA能有效的改善月季切花的水分平衡，减轻月季切花受水分胁迫，缓解切花体内游离脯氨酸的增加。其中SA 2 降低游离脯氨酸的效果最明显。3.7不同浓度的水
38、杨酸对月季切花叶片内叶绿素含量的影响图 3.7.1 月季切花瓶插期间叶绿素含量变化试验结果如上图所示（图 3.7.1 ）， 随着瓶插时间的增加，对照组和实验组的月季切花叶绿素含量在瓶插开始前4 d都有小幅度的增加，之后随着瓶插时间的变长，CK组叶绿素含量开始下降；而SA处理显著的缓解了叶绿素减少的速率，其中SA 2 的保护叶绿素效果最明显。3.8不同浓度的水杨酸对月季切花花瓣内SOD活性的影响 图 3.8.1 不同水杨酸对月季鲜切花SOD活性的影响 试验结果如上图（图 3.8.1 ）所示，瓶插开始时，月季切花的SOD活性基本一致；第4天测定时 ，SOD活性和刚开始相比，数值上升很多，表明在瓶插
39、前4 d，SOD 活性值呈逐渐上升趋势；第 8 d测定，SOD活性值有所下降，第12 d测定时，SOD活性值又有所下降，而且对照组SOD活性下降程度远高于实验组。结合表 1 得出，月季切花处于开花最佳时期时，SOD活性达到最大，对照组在第 8天逐渐出现衰败，SOD 活性减弱明显，膜脂过氧化程度加剧；在整个过程中，不论是对照组还是实验组的SOD 活性表现均为先升高后降低的状态。同时根据数据显示，经水杨酸处理的月季切花花瓣的SOD活性值明显大于对照组，说明水杨酸能提高SOD活性，减缓切花的膜脂过氧化程度。 3.9不同浓度的水杨酸对月季切花花瓣内CAT活性的影响图 3.9.1 不同水杨酸对月季鲜切花
40、CAT活性的影响CAT是细胞内清除活性氧的主要酶。试验结果如上图（图 3.9.1）所示，随着月季切花瓶插天数的延长，花瓣内的CAT活性都呈现先上升后下降的趋势，但经过水杨酸处理明显地延缓这一进程。对照组花瓣CAT活性在第 2 d活性达到最高，然后开始下降。而经过水杨酸处理的实验组花瓣CAT活性在第 4 d 达到最大，然后CAT活性呈缓慢减弱的趋势。说明水杨酸对月季切花瓶插期间花瓣内CAT活性的降低具有延缓作用。4 讨 论 国内外不少研究表明细胞和组织中活性氧产生而不能被及时清除是造成衰老的主要原因，而清除活性氧能力大小的主要标志是抗活性氧毒害的内源保护酶SOD、CAT活性的高或低22。一旦SO
41、D和CAT等保护酶活性被削弱，就会造成活性氧的积累，从而加剧膜脂质过氧化程度，使膜结构遭到破坏，膜透性增大23。本研究表明，经水杨酸处理后的实验组，月季花瓣内的SOD和CAT活性下降的速度均慢于对照，这与李柏林、梅慧生24的研究结果一致。因此可以认为水杨酸能增强月季切花瓶插期间的SOD、CAT活性，减少切花组织内的活性氧的积累，延缓月季切花的衰老速率，延长瓶插观赏时间。丙二醛和相对电导率是用来衡量膜脂过氧化及细胞膜透性的两个生理指标，反映了细胞膜的受损情况。从试验的结果看，随着时间的延长，对照组切花MDA和相对电导率迅速增加，膜脂过氧化程度增加从,细胞膜的相对透性增加,使细胞内水分流失加快,从
42、而加快了切花的衰老。而由水杨酸处理后的月季切花的这两个生理指标上升速度明显比较慢。同时我们猜想水杨酸能够诱导月季本身的抗病性, 降低切口处微生物滋生、降低茎导管的堵塞, 提高了切花的水分供应17,在一定程度上减缓了丙二醛含量的增加, 从而减弱了膜损伤, 减缓了月季切花的衰老，起到了一定的保鲜作用，这一结果与薛秋花,林如等的研究结果一致18。有关研究表明，植物体内游离脯氨酸的含量与植物组织的脱水程度是密切相关的，可以说植物体内游离脯氨酸的含量在一定程度上就反映了该植物组织的水分亏缺状况, 是组织脱水的敏感标记1920，植物体内失水的情况下，游离脯氨酸的含量会迅速增加促使植物吸水。本试验中,经过水杨酸喷洒处理的月季，花瓣内的游离脯氨酸含量在前4 d维持在一个较低的水平, 4d 后含量才开始缓慢上升。其中，用SA 2处理的月季切花其体内游离脯氨酸含量增幅最慢；而CK组游离脯氨酸含量增幅速度快,并且总是比SA处理高。水杨酸浓度为30mg/L时，有效地提高切花组织内的水平衡，这一结果与李军萍21等研究的结果一致。其中30mg/L水杨酸处理具有较大的花径和花枝鲜重, 也说明了这一点。 5 结 论 根据本试验结果，可以得出以下结论：1、 水杨酸溶液喷洒处理月季切花，能
