人体组织的检验医学医药.ppt

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1、第十八章 人体组织检验物证教研室 徐冬冬,人体组织是重要的法医物证重建案件现场个人识别亲权鉴定软组织、硬组织和角化组织,毛发检验,皮肤的特殊附属器,由皮肤毛囊细胞产生的角质体。可见于案发现场、凶器、作案工具、肇事车辆、受害人衣服、体表或手中。,毛发检材的发现与提取毛发的发现:重点部位-受害人身边。毛发的提取:镊子夹取,放入物证带,做好标记。注意:隐蔽部位的毛发;勘察者脱落的毛发;设置对照,1.毛发的结构,一、毛发的特点,注意事项:,毛小皮:不同种属花纹特征不同人毛呈细小波浪状。毛皮质:不同种属色素颗粒分布不同,是鉴别人毛与动物毛的重要依据人毛色素多集中于皮质周围。毛髓质:细胞排列具有特征性,可

2、以此区别动物毛。,毛发的形态:直发、波状发、卷发,与种族、遗传、生长部位有关,毛发的颜色:白色角质体黑色角质体 白、黑、黄、褐色红色角质体发色是区别种族的重要物证之一,随年龄增加,黑色角质体减少,头发渐变灰、白,北极狼的皮毛颜色随季节不同,毛发的分布及分类:分布:除唇、手掌、手指、足趾末节等外均长有毛发分类:硬毛:较粗硬,如头发、眉毛、睫毛、腋毛、阴毛、胡须等毳毛:细软、色淡、毛髓质缺如,法医学实践中,以头发和阴毛最为常见,毛发的生长周期:,受部位、性别、年龄、季节和健康状况等因素影响,每日脱落约30120根,毛发的理化性质:可溶于强碱性溶液。人体上皮组织的一部分,含有蛋白质、脂肪、水、微量元

3、素(含量有个体差异)等各种成分。毛发的功能:保护皮肤和保持体温的作用。,目的与要求:1是否为毛发 2是人毛或动物的毛发 3人毛发的部位,损伤检验 4毛发的个人识别,二、毛发的实验室检查,肉眼观察:毛尖、毛干和毛根的结构特征 显微镜观察:毛小皮、皮质、髓质三层结构 燃烧法:毛法燃烧后发出特殊的臭味,1、是否毛发,2、人毛与动物毛的鉴别,人头发的毛干、毛小皮花纹,狗毛的毛干、毛小皮花纹,兔毛的毛干、毛小皮花纹,主要采取对比的方法,根据毛发的长短、粗细、色泽、横断面的形状、髓质的位置以及表面附着物等特点,综合分析。,3、人毛部位的确定,头发 长度:人体各部位中最长的,长于10cm大都是头发直径:属中

4、等(75100m)毛尖:短发多呈剪断状,长发多呈破裂状或有小分支横断面:多为圆形或椭圆形表面常有人工处理痕迹,阴毛长度:一般长约3-6cm,最长不超过8cm形状:多呈S形弯曲,毛干上常有凹痕毛小皮:极不规则波纹状,常见树枝状交叉。髓质:常连续,比头发略宽横断面:椭圆形与肾形可附着分泌物,有时有精子、月经血、内衣纤维,人阴毛毛干、毛小皮花纹,腋毛长度、卷曲度与阴毛类似,常呈淡褐色毛干上也有凹痕,但较少直径较头发细横断面多为椭圆形表面常附着腋窝大汗腺的分泌物,呈粘胶状,胡须长短不定,多为直发,波状发少见较头发略粗,人体最粗的毛断面多为三角形或多角形,少数为椭圆形其它部位毛眉毛、睫毛、鼻毛一般粗短,

5、长度1cm左右,(1)自然脱落毛根完全角化,干燥萎缩,无根鞘附着5%10%的亚硝基铁氰化钠溶液染色,无颜色反应(2)暴力拔出的毛发毛囊组织附着,毛球湿润且下端呈开放状或钩状弯曲10亚硝基铁氰化钠浸泡染色呈鲜红色。,4、毛发的脱落和损伤,左为自然脱落之毛囊,右为暴力拔下之毛囊,(3)拉断的毛发 离断的毛发断端不规则,呈纵形分裂状,有时甚至呈阶梯状,毛小皮损伤严重。,(4)热作用损伤 毛发对温热作用有一定抵抗力,通常超过150,出现形态结构的改变。烫发对毛小皮有明显的损伤。,(5)钝器损伤完全断裂:断端膨大,不整齐,有时呈扇形或阶梯状。未断裂:作用部位呈仿锤形膨大,皮质中出现长形或横形裂纹,皮质纤

6、维分离,毛小皮剥脱。,左为完全断裂之毛发断端,右为钝器打击致毛干局部变形,(6)锐器损伤锋利锐器:断端平滑整齐,毛干不碎裂,皮质纤维不分裂。较钝的锐器:断端呈锯齿状或阶梯状。,剪刀剪断之毛发断端,(1)形态学观察毛发的形态和附着物检查形态:色泽、长度、是否完整的毛发。附着物:附着物的成分可获得有关职业、毛发来源等信息。,5、毛发的个人识别,毛发结构观察外形:毛发外形,有无毛囊,断面形状,毛尖是否分叉等。色素:色素颗粒的大小,数量,分布,有无染发的色素。髓质:粗细,是否连续,是否偏离中轴。毛小皮:纹理特征。,(2)毛发的ABO血型测定一般用解离试验,方法同血痕检验注意事项:毛发必须压扁,充分暴露

7、皮质和髓质所用血清要特异性好,效价高(128),吸收时间要长掌握好洗涤次数设置对照,(3)毛发的酶型检测(新鲜带毛囊)(4)毛发的DNA分析带毛囊的毛发Chelex-100法是提取毛囊中DNA的首选方法,可分析 STR基因座及性别鉴定(牙釉基因)毛干的mtDNA分析可检测毛干mtDNA-D环区序列多态性进行个人识别,碱性裂解法提取毛干线粒体DNA,(5)毛发中微量元素分析包括定性和定量检验不同人种、职业、年龄、性别和不同地区的居民、个体之间有一定差异。常用方法:原子发射光谱,原子吸收分光光谱,中子活化及电子探针技术。注意:同一个体不同部位和不同生长期的头发微量元素含量也有一定差异。,(6)毛发

8、年龄估计与推断,一般说来,不同年龄阶段的人,其毛发的生长、形态、色泽和结构都有各自的特征。胎儿和婴儿毛发细软,多无髓质,色素较少。青壮年色素颗粒多,毛发粗且黑,有弹性。老年人的毛发,由于色素颗粒少,空气含量增加,因此多出现白发。,在交通肇事、碎尸、空难、爆炸等案件中,组织块是最常见的法医生物检材。可通过形态学、免疫学、免疫组织化学以及分子生物学方法确定组织块的种类、种属、性别以及身份来源。,三、软组织检验,1.种类鉴别(各种组织有其固有的形态结构)肉眼观察:适合于组织块比较大的检材的识别组织切片:显微镜下观察,干燥组织可用5%醋酸浸软组织皮 肤-复层鳞状上皮细胞结构+真皮层的毛囊和皮脂腺脑组织

9、-神经细胞和神经胶质细胞肝 脏-肝细胞及胆管构成肝小叶结构肾 脏-肾小球、肾小管消化道-粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜,2.种属鉴定免疫学方法:抗人血清、胶体金等分子生物学方法:Alu序列28srRNA细胞色素b基因 SON基因,3.组织块的个人识别,血型:ABO系统等血清型:维生素结合蛋白(DPB)、Km、Gm等酶型:PGM1,岩藻糖苷酶等DNA分析:VNTR,STR,mtDNA等性别鉴定:肉眼观察、Amelogenin基因,测定组织块中的遗传标记:,(1)ABO血型测定ABO血型是法医学物证检验个人识别的传统检测项目,迄今广泛应用于基层法医实践,意义主要在于否定。方法:吸收试验、解离试验、红

10、细胞粘连试验、免疫组化法和ABO基因分型等(2)酶型和血清型测定,(3)DNA分析检材:新鲜的组织块,腐败组织、蜡块组织切片1)组织的DNA提取新鲜或冷冻组织:酚氯仿抽提腐败组织:酚氯仿抽提,再用Chelex-100提取组织切片或蜡块:脱蜡后酚氯仿抽提甲醛固定的组织:消化时增加蛋白酶K的用量及消化时间,酚氯仿抽提后Chelex-100提取2)DNA分析:STR、mtDNA等,(4)性别鉴定,直接判定性别组织碎块:Amelogenin基因检测,注意事项:主要目的是个人识别尽快送检不能及时送检时应低温保存,或充分干燥后保存,不宜用甲醛固定合理选材考虑癌变的组织;腐败组织可能影响结果;各种因素(变性

11、或分解)的对结果影响。,骨骼和牙齿是人体坚硬的组织,高度钙化,可抗腐败和长期保存,是个人识别的重要检材。骨骼和牙齿形态学分析属法医人类学DNA分析关键提取到DNADNA来源骨骼DNA:骨细胞、成骨细胞和破骨细胞;牙齿 DNA:牙髓腔中的细胞和牙骨质成骨细胞。,骨及牙齿检验,注意事项,1.低拷贝DNA的影响2.环境因素对DNA的影响3.设置对照4.结合STR和mtDNA分析,指(趾)甲检验,ABO血型特点:ABH血型物质较多,不受分泌型的影响。方法:吸收试验 DNA检测有机法结合Chelex-100法;mtDNA、STR分析指甲油与指甲垢的鉴定,谢 谢!,人体组织检验,1.毛发与其他纤维的鉴别,

12、人毛与动物毛的鉴别,人毛部位的确定,毛发的脱落与损伤,毛发个人识别(形态学观察、ABO血型测定、DNA 分析、微量元素分析)的基本方法。2.软组织的确证、种属鉴定、性别鉴定、个人识别的方法。,混合斑检验,1.阴道液斑确证(细胞学检查、阴道肽酶测定),精液成分个人识别(ABO血型测定、DNA分析)、阴道液成分个人识别的原理、方法、结果评价和轮奸案混合斑检材的鉴定。2.多个体血液混合斑的ABO血型测定和DNA多态性检验的程序、方法。,唾液及唾液斑检验,1.唾液(斑)的提取方法。2.确证唾液(斑)(淀粉-碘反应、口腔粘膜脱落上皮细胞检查)的原理及方法。3.唾液(斑)个人识别(ABO血型测定)的原理及方法。,精液斑检验,1.精斑的检验程序。2.精斑预试验(酸性磷酸酶试验、磷酸苯二钠试验)、确证试验(精子检出法、免疫学试验、PSA胶体金试验)、个人识别(ABO血型测定)的原理、方法和结果评价。,血痕检验,1.血痕的检验程序,血痕的肉眼检查,各种血痕形状的概念。2.血痕预试验(联苯胺试验)、确证试验(高山试验)、种属试验(沉淀反应、抗人血红蛋白胶体金试验)的原理、方法及意义。3.血痕个人识别,即ABO血型测定(吸收试验、解离试验)的原理、方法、结果评价。,

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