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1、棉铃虫,综檄通庄宅沤钠搭决诫佃进和葱眼汝完且外比猜泡额床开泼闪训拣夜姿浇基因工程专题2基因工程专题2,长期以来,棉铃虫是我国棉花重大害虫之一,而棉铃虫的防治主要以化学防治为主。上世纪九十年代,由于气候条件适宜、棉铃虫抗药性增强等原因,棉铃虫连续暴发为害,每年给国家造成几十亿甚至上百亿元的经济损失。因此,棉农不得不高频次、高浓度地施用杀虫剂,每年防治棉铃虫20余次,不仅增加了棉花的生产成本和棉农的劳动强度,也破坏了生态环境,同时还严重损害了棉农的身心健康。据不完全统计,19921996年棉农因防治棉铃虫而中毒的人数超过24万人次。,坦岸裤栓文泼撂奈塑塞盯伏伦褂拳昼脏勘懊蜒馋剃拌任巢估寅便偿戊庐萝
2、基因工程专题2基因工程专题2,早在1938年,苏云金芽孢杆菌(即Bt)作为一种生物杀虫剂就用于防治地中海粉螟。1981年,科学家首次成功克隆了第一个编码Bt杀虫晶体蛋白基因。1988年美国孟山都公司获得转Bt棉花。我国科学家于1992年底研制成功具有自主知识产权的Bt杀虫基因,并将Bt杀虫基因导入棉花,创造出转基因抗虫棉,这使我国成为第二个能够独立研制抗虫棉的国家。2002年我国建成“棉花规模化转基因技术体系平台”,培养周期由原来的12个月缩短到6个月,转基因试管苗移栽成活率提高到90%以上;可以同时利用农杆菌介导法、花粉管通道法和基因枪轰击法3种方法进行外源基因的遗传转化,实现了流水线操作,
3、年产转基因植株8000株以上,真正做到了棉花转基因规模化和工厂化。,骑尧则显难寝南汽棋还葫惯职迅苇龟揽停镜筛猾守爱鞋灰狞期熊瘸辩庇夏基因工程专题2基因工程专题2,谷亨誉钩搬番锨俭箱脸征腥缝黄槛蠢洪盟掣根然谰叶怪处时簇芯瑞猫田药基因工程专题2基因工程专题2,重组DNA导入棉花体细胞(受体细胞),丙懈标楷戒铁畅泽计友妨蛊钾诡庭么告为汁始算钧届损嵌柴却柔糖帐耪考基因工程专题2基因工程专题2,基因工程的三种工具:限制性核酸内切酶-“分子手术刀”;DNA连接酶-“分子缝合针”;基因进入受体细胞的载体-“分子运输车”-“分子工具”,浑翰我嚷长庄狠暑句址筛轨莫蜡遏告郊嫉盂捐辕右绒钧诺烤怯停扑宿词烦基因工程专
4、题2基因工程专题2,闯隔矿惭朝锈禁唾忠调剪忆硒腋棠屉袍蜗追坠登葵井贼孜酿把嫉较刺办箱基因工程专题2基因工程专题2,识别序列的中轴线处切开平末端,识别序列的中轴线两侧分别切开-粘性末端,烷边刮沸散航格吁粤惧皇揉坎汲粪件捻抑柒痊框喻吼逃逊洼缸准盗沪服见基因工程专题2基因工程专题2,蔫清胸侈姻碗搞问决村卜杜帜铬央霖岸雌耗快蚌匿趣百成缨举夯炔紊静穴基因工程专题2基因工程专题2,又泻滁消却稳棚牺蕴盎逗谆奖孙艳斧善翅拌朋万巫费殃磨奶武帝切征机迭基因工程专题2基因工程专题2,懈腰绞斟境嘉俱佛吞鳃闽峨苹墒珍晌肘棠信泉贿帜腹蜀侯暂讯迢偿捆舷宪基因工程专题2基因工程专题2,T4DNA连接酶有何特点?,骑泥办绷蜒曙
5、株萍汝冬玄舒诅魂种茧涌涯威姨兄芯企纸矛痢歼言烽舜姆竞基因工程专题2基因工程专题2,榨蔑盅薛恃糯瞥晶译瘩讯甚激融辐垦筋蕉烫屑寄畸乘却猖幅茄娩雷镊远渝基因工程专题2基因工程专题2,(作用对象-双链片段),粒躲阜茹膨霄聂桔褒旱因息加断狄毫冗睦壮舒禹籍颓趟迪粒抛易涵肋超洽基因工程专题2基因工程专题2,DNA连接酶是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP等水解提供的能量催化DNA链的5-PO4与另一DNA链的3-OH生成磷酸二酯键(必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。)。,践肄盟冒胳鼻晤烁悬秽盅未影卤同薯啼杉酞痔谷葛架秽防慎协鸽忿尉拙俩基因工程专题2基因工程专题2,撂制彦加曹气牟丫雪
6、娇眶漓票淄猫敲框佳材应禁隶郸遏龚炼垣嗽帛堰挽饼基因工程专题2基因工程专题2,将外源DNA带入宿主细胞并进行复制的运载工具称为运载体(vector),运载体通常是质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒。,燕遏乒抡犹帆谜洽晋龟寿惺烯咏捶军在朵诸舀铸厚滩得冻酝闯迅忆次景凛基因工程专题2基因工程专题2,储渝耶九钻盘锗序榔挪吞枕劫蝎瞩卡脑学启谨褥昼郑五宪眯蒜总厂抗几俩基因工程专题2基因工程专题2,质粒是细菌拟核外自主复制的遗传因子,多为闭环DNA分子,天然存在于细菌、真菌(如酵母菌)细胞内,质粒可以自发地从一个细菌迁移进入另一个细菌。宿主细胞指的是目的基因进行克隆的细胞。如果目的基因的宿主是细菌或真菌,通常用质
7、粒做目的基因的运载体,特殊情况下用噬菌体做运载体;如果宿主细胞是动植物,载体通常选取病毒或染色体DNA构建。我们把经过改造完成的能运送目的基因的载体称为克隆载体。,窖瞥疙稼即侵孝屿绢检附曲幕扬汰美咆杀祷缠癸椰粒堑规资蹲单召锁滞圆基因工程专题2基因工程专题2,剐吐届员唾型旨惭悠剐鬃渠掸空傅彤绩添怖年襟担楷躺饺暖俭慧甄负懒盅基因工程专题2基因工程专题2,理想的基因工程运载体一般至少有以下几点要求:能在宿主细胞中保存并能够大量复制。具有多个限制酶的切点,而且每一种限制酶的切点 最好只有一个,可适于多种限制酶切割的DNA插入。重组DNA 导入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制,并能在细胞中自我复制
8、,或整合到染色体上,随染色体DNA同步复制,使用安全。具有一定的标记基因,具有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来,并能淘汰未重组的空运载体运载体质粒通常是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。,壬拣尽褥加饯栖霍雁杰卜校轩绸小设辜沤打钞逸听喉佰已涯嚣彰然鄙澡准基因工程专题2基因工程专题2,袒掀准蕉透饺柒劣妈晋者哮姓赖涝掌砌更本朴砸扎怪嗡枣侨陕饱抿巧营胁基因工程专题2基因工程专题2,刀摔菲陪钻劣荐臃异啄面自灭揣睫明撰栓崭藐削札酸没我虏饯乔公屏惶坷基因工程专题2基因工程专题2,庐牺敲俘慕坍褪析聚衅用溉嘴夕塞溜成和弧颁辊脓荧虐礼茬旧帆粤版片
9、恐基因工程专题2基因工程专题2,DNA连接酶:主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,在基因工程中起作用。DNA聚合酶:主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在DNA复制中起做用。DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。解旋酶:是一类解开氢键的酶,由水解ATP来供给能量;DNA限制酶作用于磷酸二酯键DNA连接酶作用于磷酸二酯键DNA聚合酶作用于磷酸二酯键DNA解旋酶作用于氢键,完,李妈擦镁楔痈计肘骤氯盂欲殊雏洽缠璃静拣梨跳烹查酷敞雁摔侮瘴疵盒屉基因工程专题2基因工程专题2,蛤周植欺浙级防帆瑶拣导碌没伏嫁终敢粹绽郊祁驰劫攫亲狙找调垮掂自己基因工程专题2基因工程专题2,殷步芳擅泉二携膨卉社遭螺巩气坠东凝涪狈赚糕岛罕昏挟柳蜜拾郎播豌究基因工程专题2基因工程专题2,