实验室常用小鼠简介(同济).ppt

上传人:小飞机 文档编号:5344407 上传时间:2023-06-28 格式:PPT 页数:24 大小:1.78MB
返回 下载 相关 举报
实验室常用小鼠简介(同济).ppt_第1页
第1页 / 共24页
实验室常用小鼠简介(同济).ppt_第2页
第2页 / 共24页
实验室常用小鼠简介(同济).ppt_第3页
第3页 / 共24页
实验室常用小鼠简介(同济).ppt_第4页
第4页 / 共24页
实验室常用小鼠简介(同济).ppt_第5页
第5页 / 共24页
点击查看更多>>
资源描述

《实验室常用小鼠简介(同济).ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《实验室常用小鼠简介(同济).ppt(24页珍藏版)》请在三一办公上搜索。

1、免疫学研究中,生物医学研究中心 张 述Email:,常用的小鼠模型,C57BL/6简要描述:最常见的实验小鼠,经常简称为B6 C57或者小鼠。性状描述:毛色为黑色,常作为“标准”的近交系。常见用途:用于多种免疫学、遗传学研究,包括移植、感染等动物 模型。常作为背景小鼠,对其进行基因敲除、转基因等遗传修 饰,从而提供标准的遗传背景。,BALB/C简要描述:是实验室常见的免疫功能不太完善的小鼠。性状描述:毛色为白色,对致癌因子敏感,卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病发生率较高。常见用途:用于生产单克隆抗体的杂交瘤的制备。免疫学研究,如移植的供受鼠等。,BM12简要描述:是C57BL/6近交系小鼠自发形

2、成的一个近交系小鼠,在MHCII 类分子中有3个氨基酸的突变。性状描述:与C57BL/6基本相同,对EAE等自身免疫性疾病具有抗性。常见用途:用于慢性排斥反应研究的供鼠。,免疫学研究中常用的小鼠品系,常见的小鼠品系,ALR:与NOD小鼠具有共同祖先的小鼠,白色,两者有70%的基因组完全相同,但MHC不相同。对I型糖尿病具有很强的诱导耐受。常用于NOD的对照小鼠。,杂交鼠:由两个近交系杂交获得后代,性状不稳定。小鼠遗传操作未进行彻底的小鼠。,NOD:简要描述:非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠,最常见的实验小鼠,公认的自 身免疫性糖尿病(I型糖尿病)。性状描述:白色,从第9周开始,即会有胰腺炎症状,之

3、后雌鼠会有较 高的概率得I型糖尿病。常见用途:I型糖尿病遗传、发病机制研究。其它相关的自身免疫性疾病研究,如干燥综合症等。,1、器官移植模型2、自身免疫性疾病模型3、超敏反应模型4、肿瘤模型,免疫研究常见的小鼠动物模型,肾移植模型异位心脏移植模型小肠移植模型骨髓移植模型肝移植模型皮肤移植模型胰腺(胰岛)移植模型慢性排斥(BM12),器官移植模型,1、自发型I型糖尿病动物模型 NOD小鼠2、诱导型I型糖尿病动物模型:药物(STZ、Alloxan、环磷酰胺等)诱导破坏小鼠胰岛 3、自发型系统性红斑狼疮小鼠 BXSB4、诱导型系统性红斑狼疮小鼠 慢性移植物抗宿主,自身免疫性疾病模型,5、自发型类风湿

4、性关节炎 SKG 小鼠6、诱导型类风湿性关节炎 型胶原诱导关节炎大鼠模型,佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)模型,其它诱导模型7、诱导小鼠EAE;模拟人多发性硬化症/急性播散性脑脊髓炎。髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫;髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫疫;髓鞘蛋白脂质蛋白(PLP)免疫;脊髓组织匀浆免疫等,自身免疫性疾病模型,超敏反应模型,气道高敏感反应模型:腹腔注射卵清白蛋白致敏,然后通过雾化吸入造模。皮肤过敏反应模型:过继输入抗二硝基苯酚(DNP)的IgG E单克隆抗体,使小鼠被动致敏,然后以二硝基氟代苯(DNFB)刺激产生过敏反应。,肿瘤模型

5、,移植瘤实验:将人移植入BalB/C、祼鼠、C57BL/6、Rag1等小鼠体内。诱导癌/肿瘤模型:使用二乙基亚硝胺(diethy lnitrosam ine,DEN)等诱癌剂灌胃及自由饮水,长期诱导可产生肝癌模型。,1、基因敲除小鼠2、基因敲入小鼠3、基因捕获小鼠4、转基因小鼠5、条件性基因表达小鼠6、条件性基因敲除小鼠,基因修饰小鼠,载体构建基本知识,二、pIRES2-EGFP-rtTA Advanced 构建,使用引物将rtTA Advanced CDS区克隆出来,然后以XhoI/BglII双酶切,将其克隆入pIRES2-EGFP载体的XhoI/BamHI位点中。引物序列为:rtTA_Xh

6、oI_F:ATCGCTCGAGCCGCCACCATGTCTAGACTGGACAAGAGCAAArtTA_BglII_R:ATCGAGATCTTACTTAGTTACCCGGGGAGCATGTCA,基因表达基本知识,DNA一级结构上调控基因表达的元件(基因表达盒结构),promoter,5-UTR,promoter,enhancer,UTR,exon,Poly A signaling,enhancer,3-UTR,Chromosome sequence,基因敲除小鼠,基因修饰ES细胞的获得及囊胚注射,基因敲除小鼠,2、基因敲除纯合小鼠的获得,基因敲入小鼠,Neo,r,w.t,allele,flox

7、,allele 1,I,II,I,II,w.t,.sequence,Vector sequence,loxP,site,FRT site,Typing primer,Typing primer,exon,基因捕获小鼠,效果类似于基因敲除,MBD2基因敲除小鼠,b,-,geo,w.t.allele,1,2,w.t,.sequence,Vector sequence,mutant allele,Typing primer,Typing primer,exon,1,3,b,-,geo,3,Sequence not indicated,targeting vector,A,转基因小鼠,靶标基因表达盒D

8、NA,条件性基因表达小鼠,Cre-loxP系统,Tet-on表达系统,条件性基因敲除小鼠,Cre-loxP及FLP-FRT技术,Cre、FLP是重组酶,loxP、FRT是重组位点,图1:诱导型平滑肌特异性敲除Dicer1基因的小鼠基因型。1A:Dicer1的蛋白质结构,主要包含4个结构域,任一个结构域的缺失均能导致microRNA不能成熟;1B:两侧包含loxP位点的Dicer基因结构图,两个同向loxP位于Dicer基因22号外显子的两侧,该外显子对应于前一个RNAIII结构域。在Cre重组酶的作用,可引起该外显子的敲除。1C:他莫昔芬(tamoxifen)诱导的平滑肌特异性Cre转基因小鼠表达盒。该表达盒包含平滑肌特异性SM22启动子,tamoxifen诱导表达的Cre重组酶基因及SV40的polyA信号序列。,HPSE2-loxP小鼠,

展开阅读全文
相关资源
猜你喜欢
相关搜索

当前位置:首页 > 生活休闲 > 在线阅读


备案号:宁ICP备20000045号-2

经营许可证:宁B2-20210002

宁公网安备 64010402000987号