细菌基因敲除技术资料.ppt

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1、Guangzhou Maibo Bioscience Co.,Ltd.,Email:Tel:020-84299623 020-29123539,细菌基因敲除服务介绍,技术服务的梦工厂life sciences,创新、科技、价值,细菌基因敲除原理示意图(示例),一、技术原理,基因敲除结果鉴定(示例),二、敲除结果检测,三、革兰氏阴性菌基因敲除流程,自杀载体构建自杀载体导入供体菌供体菌与靶细菌接合作用,自杀载体转移第一次同源重组及筛选第二次同源重组及筛选基因缺失株鉴定,自主知识产权自杀载体之一,四、革兰氏阳性菌基因敲除流程,自杀载体构建阳性菌电转化(不同菌培养条件、电转化程序、电击缓冲液、恢复培养

2、条件不同,需要摸索)第一次同源重组及筛选第二次同源重组及筛选基因缺失株鉴定,电转化仪,电击缓冲液,五、本公司细菌基因敲除服务优势,独特的供体菌,可以不要求靶细菌具有抗生素抗性。高效的供体菌接合系统,保证自杀质粒具有高的接合转移效率。自杀载体为T线性化载体,可直接与纯化PCR产物连接,不需要考虑酶切位点,大大节省客户时间。优化的自杀载体序列,最大化减少冗余区,从而提高接合转移效率,减少非特异重组的概率。自杀载体具有自主开发的反向筛选基因vmt,用于替换常规的sacB基因,从而大大增加基于自杀载体基因敲除技术的适用范围,大大减少第二次重组后缺失突变克隆的筛选工作。,细菌送样前请鉴定确认好菌株的种类,以免基因扩增不能匹配靶基因。细菌送样前请先测试菌株是否具有氨苄青霉素(Ap)、卡那霉素(Kn)、氯霉素(Cm)、四环素(Tc)抗性,并保证至少不具有其中一种抗性。如需委托抗性测试,另需收费300元单个抗性测试。请按附件1要求标识需要敲除的基因,以及上下游500bp左右的序列。细菌样品以液体或平板划线形式寄出。在样品寄出前请以电子邮件形式提供培养条件。,六、送样要求,七、本公司可以提供的其它实验服务,细菌、真菌的多位点分子鉴定细菌API、Biolog生化鉴定基因克隆及原核表达荧光定量PCR分析DNA侧翼未知序列克隆,

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