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1977年,英国人Fred Sanger 发现,如果在DNA复制过程中掺入ddNTP,就会产生一系列末端终止的DNA链,并能通过电泳按长度分辨。不同末端终止DNA链的长度是由掺入到新合成链上随机位置的ddNTP决定的。由此诞生了以Sanger命名的测序原理即双脱氧链终止法测序原理。,Sanger简介,dNTP和ddNTP,双脱氧末端终止,o,H,H,CH2,A,H,OH,2,3,H,H,正常延伸,延伸终止,o,H,H,CH2,H,O,2,3,H,H,o,P,o,o-,磷酸二酯键,T,G,C,o,H,H,CH2,T,H,OH,2,3,H,H,o,H,H,CH2,H,2,3,H,H,o,P,o,o-,磷酸二酯键无法形成,A,C,G,H,dNTP,dNTP,dNTP,ddNTP,继续延伸,测序反应,5,DNA Template,3,A,C,T,T,C,G,A,C,A,A,C,T,G,A,T,T,C,G,G,A,A,T,T,G,5,3,ddNTP,Large fragments,Small fragments,毛细管电泳,荧光检测,T,A,C,T,G,A,T,G,T,G,荧光检测结果:53,T,A,C,T,G,A,T,G,T,G,DNA测序结果:35,T,C,A,C,A,G,C,A,T,A,