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1、洪泽县农产品质量 安全速测技能培训,江苏洪泽二0一四年九月,一、依据,GB/T5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 有机磷：甲胺磷，乙酰甲胺磷，对硫磷，乐果，甲拌磷（呋喃丹）等菊酯：氯菊酯，氟氰戊菊酯，氯氰菊酯，溴氰菊酯 等,二、学习和掌握检测技术的必要性,食品安全是关系到国计民生的大事，农药残留是食品安全中比较敏感且备受关注的话题。据资料报道，全世界每年有300万人发生农药中毒，我国每年有20万人因食用农药 污染的食品发生农药中毒，占食物中毒的1/3，可以想象我们工作的重要性。国际食品法典委员会制定的170种农药和59种兽药残留限量标准成为目前最重要的国
2、际标准。,二、学习和掌握检测技术的必要性,为了从源头上解决种植农产品和养殖畜禽产品的农药、兽药超标问题，保障消费者食用安全，我国政府自2002年以来，已经陆续制定和颁布了相关规定，逐步加强了对农药、兽药使用的监管工作。如农业部颁布的第199号、274号、747号、1157号及1586号公告中，公布了国际明令禁止使用的23种高毒农药及限制使用的19种农药清单，第839号淘汰的48种，严格禁止的18种兽药等等。同时对允许使用的农药制定了严格的限量标准，其中有80%的可比指标已达到或超过国际食品法典委员会的限量标准。,二、学习和掌握检测技术的必要性,为了保障各项法规的有序实施，配合各项监管措施的顺利
3、开展，首先要建立和完善农残、兽残关键检测技术，因此，我们学会了快速、高效的检测技术，为洪泽县的监管提供技术保障，为食品安全质量做出贡献。,三、农药残留分析的基本知识,农药残留的基本概念农药残留物是由于使用农药而在食品、农产品和动物饲料中出现的特定物质，包括被认为具有毒理学意义的农药衍生物，如农药转化物、代谢物、反应产物以及杂质，一般以mg/kg表示。农药残留是施药后的必然现象。但如果超过了最大残留限量，对人畜产生不良影响或通过食物链对生态系统中的生物造成毒害，则称为农药残留毒性。大多数农药按照推荐的剂量、方法和时间施药，在农畜产品中不会有残留毒性问题。,三、农药残留分析的基本知识,影响农药残留
4、的主要因素有：农药的理化性质。作物类型和作物部位。施药方法、用药量和时期。环境因子：作物和土壤中农药残留可因吸收环境中的农药或通过食物链富集造成；也能通过生物或非生物分解而消失。,三、农药残留分析的基本知识,农药残留分析的基本概念农药残留分析是指对待测样品中微量农药残留进行定性和定量分析的过程。包括两方面内容。一方面是残留试验和残留分析。另一方面是农药残留检测。我们主要是从事第二方面，目的是评价农药 对农畜产品和环境的污染程度以制定防治措施。,三、农药残留分析的基本知识,农残分析的特点：最主要特点是，在食品、农畜产品和环境样本中农兽药残留含量很少，每千克样品仅含有毫克（mg/kg）、微克（ug
5、/kg）、纳克（ng/kg）数量级的残留。在大气和地下水中每千克仅含有皮克（pg/kg）、飞克（fg/kg）。我们下午要使用的安鑫宝WT-32C的检测下限是0.1-3.0 mg/kg。常用农药达数百种，各类农药的性质差异较大，必须根据农药特点制定检测方法。,三、农药残留分析的基本知识,食品、农畜产品和环境样本种类多、组成各异，因此，各类样本中农药残留检测的前处理方法差异也很大。测定样本中农药残留量时，对方法的准确度和精密度要求不高，但对灵敏度要求高，也就是要求能够检测出样本中微量农药的能力要强。,四、农药的品种,农药品种众多，目前世界各国的化学农药达1400多种，我国现有农药600多种，常用的
6、300多种。根据农药的用途，农药按主用途不同通常把农药分为以下几类。杀虫剂：包括杀螨剂，如吡虫啉、毒死蜱、高效氯氰菊脂、异丙威等，在标签上用“杀虫剂”或“杀螨剂”字样和红色带表示。杀菌剂：如多菌灵、代森锰锌、井冈霉素等在标签上用“杀菌剂”字样和黑色带表示。除草剂：如草甘膦、百草枯、莠去津、烯禾啶、敌稗等，在标签上用“除草剂”字样和绿色带表示。植物生长调节剂：如芸苔素内酯、多效唑、赤霉素等，在标签上用“植物生长调节剂”字样和深黄色带表示。杀鼠剂：如杀鼠醚、溴敌隆等，在标签上用“杀鼠剂”字样和蓝色带表示。植物生长调节剂等,四、农药的品种,1.杀虫剂：按组成成分的分类A 有机磷类 磷酸酯、一硫代磷酸
7、酯、二硫代磷酸酯、膦酸酯、磷酰胺、硫代磷酰胺、焦磷酸酯B 氨基甲酸酯类 N甲基氨基甲酸酯类、二甲基氨基甲酸酯C 有机氮类 脒类、沙蚕毒类、脲类D 拟除虫菊酯类 光不稳定性拟除虫菊酯、光稳定性拟除虫菊酯E 有机氯类F 有机氟G 无机杀虫剂 是以天然矿物质为原料的无机化合物H 植物性杀虫剂I 微生物杀虫剂J 昆虫生长调节剂K 昆虫行为调节剂,四、农药的品种,2.杀菌剂：按组成成分的分类A 有机磷类 二硫代氨基甲酸盐类、氨基磺酸类、硫代磺酸酯类、三氯甲硫基类B 有机磷酸酯类C 有机砷类D 有机锡类E 苯类F 杂环类 苯并咪唑类、！噻英类、嘧啶类、三唑类、吗啉类、吩嗪类、吡唑类、哌嗪类、喹啉类、苯并噻
8、唑类、呋喃类G 无机杀菌剂H 微生物杀菌剂,四、农药的品种,3.除草剂：按组成成分的分类A 酰胺类B 二硝基苯胺类C 氨基甲酸酯类D 脲类E 酚类F 二苯醚类G 三氮苯类H 苯氧羧酸类I 有机磷类J 杂环类K 磺酰脲类L 咪唑啉酮类M 选择性除草剂N 灭生性除草剂,四、农药的品种,4.杀鼠剂：按组成成分的分类A 有机磷酸酯类B 杂环类C 脲类、硫脲类D 有机氟E 无机化合物F 急性杀鼠剂G 抗血凝杀鼠剂,五、常规检测蔬菜品种,监测蔬菜品种监测的蔬菜种类应是当地生产量和消费量较大，能代表当地蔬菜生产和消费基本情况。原则上，蔬菜品种在番茄、辣椒（青椒）、茄子、黄瓜、苦瓜、结球甘蓝（包菜）、生菜、萝
9、卜、大白菜、普通白菜（青菜）、花椰菜（青花菜、白花菜）、芹菜、韭菜、菜豆、豇豆、蕹菜、菠菜中选择。如所抽生产基地没有以上品种，可根据当地实际情况作适当调整，调整幅度控制在15%以内。,六、今年省检测的40种农药药残名称,甲胺磷、氧乐果、甲拌磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲基异柳磷、水胺硫磷、乐果、毒死蜱、乙酰甲胺磷、三唑磷、丙溴磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊脂、氯氟氰菊脂、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、联苯菊酯、氟胺氰菊酯、氟氰戊菊酯、三唑酮、百菌清、异菌脲、腐霉利、乙烯菌核利、涕灭威、地虫硫磷、氟虫腈、啶虫脒、哒螨灵、苯醚甲环唑、嘧霉胺、咪鲜胺、阿维菌素、多菌灵、甲基硫菌灵、吡虫啉。,
10、国家明令禁止使用的农药,国家明令禁止使用的农药（23种）六六六，滴滴涕，毒杀芬，二溴氯丙烷，杀虫脒，二溴乙烷，除草醚，艾氏剂，狄氏剂，汞制剂，砷、铅类，敌枯双，氟乙酰胺，甘氟，毒鼠强，氟乙酸钠，毒鼠硅，甲胺磷，甲基对硫磷，对硫磷，久效磷，磷胺。,在蔬菜、果树、茶叶、中草药材上不得使用和限制使用的农药,在蔬菜、果树、茶叶、中草药材上不得使用和限制使用的农药（19种）禁止氧乐果在甘蓝上使用；禁止三氯杀螨醇和氰戊菊酯在茶树上使用；禁止丁酰肼（比久）在花生上使用；禁止特丁硫磷在甘蔗上使用；禁止甲拌磷，甲基异柳磷，特丁硫磷，甲基硫环磷，治螟磷，内吸磷，克百威，涕灭威，灭线磷，硫环磷，蝇毒磷，地虫硫磷，氯
11、唑磷，苯线磷在蔬菜、果树、茶叶、中草药材上使用。,七、常用速测仪器,南京绿星深圳安鑫宝深圳市守门神北京诺亚飞河南云飞广州绿州洪泽使用的速测仪器是南京绿星,八、检测原理,有机磷和氨基甲酸酯类农药是我国目前使用量最大的农药，而且多为禁止在果品、蔬菜上使用。该类农药在生物体内可以与乙酰胆碱酯酶结合，并且不易分离，即抑制了乙酰胆碱酯酶的活性，使神经传导中的乙酰胆碱不能水觧而积累，神经过度兴奋，出现中毒症状甚至死亡。基于这一毒性原理，利用有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活力有抑制效果，进而抑制了胆碱酯酶与底物及显色剂发生的化学反应来检测蔬菜样品中是否有这两类农药的残留。农药残留越少，反应后的液体呈现
12、黄色越浓；如果反应后的液体为无色，那么酶活性完全丧失，表明有机磷或者氨基甲酸酯类农药严重超标。所以，快速检测法，又称为“酶抑制法”。,九、农残分析的基本过程,1、样品采集样品的代表性采样量应满足测定的要求认真填写采样记录,九、农残分析的基本过程,2、采样前的准备根据江苏省农业委员会农产品质量安全监督抽查实施细则，抽样人员要2人，且要出具证件。确定好采样区域和采样点（根据县农业委员会2013、16号文）样品的类型，根据检测要求而定，蔬菜类采集食用部分。样品适宜上市期，采集合适的样品根据分析方法确定采样量和分析方法采样器材的准备,九、农残分析的基本过程,3、采样方法类型随机抽样。类型抽样，也叫分层
13、抽样，在各层中再随机抽取。等距抽样。整群抽样分比例抽样,九、农残分析的基本过程,4、采样方法根据不同条件和地点，采样一般分为田间、野外采样；加工过程采样；口岸边码头采样等。植物样本的采集：采集作物或蔬菜时不能采集田埂池边及离田埂2米以内的样品，水生植物更要离开污染物排放口。,农药残留检测植物分类及采样部位和推荐采样量,农药残留检测植物分类及采样部位和推荐采样量,九、农残分析的基本过程,5、样品的处理对于水果蔬菜类样品，如果有泥沙，先用水洗，然后除去表面附着的水分，取食用部分，沿纵轴剖开，切成四等份，取相对的两块，切碎，混匀，取部分置于捣碎机内捣成匀浆,九、农残分析的基本过程,6、样品的传递与保
14、存采集的样品要用干净、惰性材料包装好，写好标签，样本及有关样本的资料要尽快送实验室。运到实验室的样本应在1-5下储存并尽快进行分析。实验室对接受的样品必须进行缩分，其中一份应在合适的条件下保存半年，保存期自检验完毕开始计算。,九、农残分析的基本过程,7、定性和定量方法农药残留量分析包括定性、定量、确证。8、分析质量保证,十、速测的具体检测方法,1、样品采集采样时必须准备干净的塑料袋和小刀，叶菜类采集200克、果菜类采集300克以上，去掉泥土，一个样品用一个样品袋，避免交叉污染。,十、速测的具体检测方法,2、试剂配制：快速技术使用了四种试剂，即：缓冲液（提取试剂）、酶试剂、底物、显色剂。由深圳安
15、鑫宝公司供应的检测试剂盒，包含了以上四种试剂。其中，酶试剂可以直接使用，其余三种试剂都应该在测试前配制好，放在温度为0-4度的冰箱冷藏室内保存。,十、速测的具体检测方法,3、配制方法是：缓冲液（提取试剂）：把1袋提取剂倒入1000毫升的小口瓶，充分混匀。底物：每瓶底物内加入3.1毫升蒸馏水溶解、混合均匀。显色剂：每瓶显色剂内加入10.5毫升提取试剂、混合均匀。,十、速测的具体检测方法,检测的详细步骤1、准备(1)检查仪器、试剂耗材(2)开机稳定仪器(3)检查样品(4)戴手套、每个样品做完更换手套,十、速测的具体检测方法,2、取样(5)从不同植株取样，要求有8片叶片(6)只从一棵植株上取样，代表
16、性很不充分(7)取样要从叶片部位取（黄瓜表皮1-1.5cm）(8)样品取完后是否进行混匀(9)样品处理过程不污染（镊子不清洗、卫生纸放样品）,十、速测的具体检测方法,3、测定(11)天平称量前要归零、称量时要稳定读数(12)称量时用镊子(13)称量后马上记录数值(14)进行编号（样品、烧杯、试管、比色皿、对照溶液）(15)将缓冲液倒在烧杯中再移取(16)记录加入缓冲液体积(17)振荡时间1分钟(18)振荡后要静置10分钟(19)移液器操作要规范（握法、不接触枪尖、枪体相对垂直）,十、速测的具体检测方法,20)记录加入体积(提取液、酶液、显色液)(21)移液器使用后要竖立放置(22)移液器使用后
17、要回到最大量程(23)试管测试液要恒温（对照液、样液）(24)显色反应时间要为10-15分钟(25)要记录加入底物体积(26)被测液体液面要达到比色皿容量三分之二,十、速测的具体检测方法,（27）记录填写不完整、不规范4、整理(28)比色皿使用后要清洗，倒扣在滤纸上(29)废弃样品要清理(30)试验台要收拾干净,十、速测的具体检测方法,农残测定（简单步骤）1、调节室温。实验室要配备空调，实验开始前，开启空调使室温维持在18-25度。2、预热仪器。打开仪器电源，按上或下键选择农药残留检测，按确定键进入农药残留检测的界面，预热30分钟以上。3、称量样品。从样品各部位剪切蔬菜，使用电子天平，称取叶菜
18、类2克、果菜类表皮4克，剪碎成1厘米大小放入200毫升的三角瓶内。,十、速测的具体检测方法,4、添加提取试剂。吸取10毫升的提取试剂加入到三角瓶中。放在漩涡振荡器上振荡2分钟。5、酶反应。样品的比色皿：吸取样品提取液的上清液3毫升，放入比色皿，依次添加100微升专用酶、100微升显色剂，混合均匀，静置10分钟。对照的比色皿：吸取提取试剂3毫升，放入比色皿，依次添加100微升专用酶、100微升显色剂，混合均匀，静置12分钟。,十、速测的具体检测方法,6、在快速检测仪上检测。酶反应完成后，把底物100毫升加入到各个比色皿，摇匀后立即放入快速检测仪器的比色皿槽内，在0通道放入空白样品的比色皿，其他通道（1-7通道）放入样品的比色皿，按样品检测 键，三分钟后仪器上显示检测结果。7、结果判别。抑制率小于50%，为合格；抑制率大于50%，为不合格。出现极端数据，应该分析取样方面和检测过程的原因，应该重新取样从头开始检测。,十、速测的具体检测方法,检测完成后，及时把检测结果记录在农产品快速检测登记薄上，签名盖章。实验室内保持仪器干净、避免阳光直射；要做到均匀抽样，以确保测试结果有代表性。及时汇总统计合格率，最好根据农产品种类，如叶菜类、豆类、茄果类、苔茎类等，分门别类进行统计。对于不合格的农产品，应该立即向上级部门报告，结合不同情况，采取追溯、下架、销毁等措施。,谢谢！,
