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1、细菌学各论,了解各种细菌的形态、培养特性、致病因子及微生物学诊断。,李丹毒，白结核，芽孢球菌除淋膜，若问芽孢菌有何，炭肿气疽破三梭，这些细菌均阳性，其他细菌阴性多。,第一章 革兰氏阳性球菌,第一节 葡萄球菌属 Staphylococcus,广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。,分 类,（1）金黄色葡萄球菌(S.aureus)：多数致病（2）表皮葡萄球菌(S.epidermidis)：偶可致病（3）腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)：不致病,金黄色葡萄球菌S.aureus,一、形态 球状，排列成葡萄串状，无芽孢和鞭毛，个别形
2、成荚膜。,一般特征：圆形，排列成葡萄串状，在脓汁或液体培养基中成双球或短链排列，用青霉素可诱导成L型，无芽孢，无鞭毛，某些菌形成荚膜或粘液层，G+需O2兼性厌氧，接触酶+，氧化酶，不运动，营养要求不高，不在麦康凯上生长，致病株产生金黄色色素。,二、培养及生化特性,普通培养基上生长良好：湿润，隆起的圆形菌落，直径1-2mm，有时达4-5mm。菌落颜色依菌株而异，初为灰白色，继而为金黄色，白色柠檬色。,2.血平板上生长更佳，菌落较大，明显溶血，溶血菌株多为致病菌。,3、普通肉汤：均匀沉浊，管底有絮状沉淀，培养23天后，产生菌环，管底形成多量粘稠沉淀。,4.高度耐盐5.分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产
3、气，致病菌株能分解甘露醇。,高盐培养基 糖发酵试验,三、抗原性,1.多糖抗原：磷壁酸中的核糖醇残基是一种半抗原，具有型特异性。据多糖抗原将葡萄球菌分3个型：A型多糖抗原：来自致病菌。（金葡萄球菌）磷壁酸中的核糖醇残基B型多糖抗原：来自非致病菌。（表皮葡萄球菌）甘油残基 C型多糖抗原：致病菌非致病菌同有。,2.蛋白质抗原：细胞壁的一种表面蛋白人源菌株含SPA（Staphylococcus protein A),能与许多动物血清中的IgG分子的Fc段非特异性结合，结合后的IgG仍能与相应抗原进行特异反应。这一现象已广泛用于免疫学及诊断技术。,四、抵抗力,抵抗力较强，能在干燥脓汁或血液中存活数月，8
4、0 30min可杀死，煮沸迅速死亡，对多种抗生素产生耐药性。,五、致病性和毒力因子,侵袭性疾病：主要引起化脓性炎症。通过各种途径 侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。毒素性疾病：由葡萄球菌产生的外毒素引起。,毒力因子主要包括酶和毒素，可引起两类疾病：,1.溶血素4种毒素(Alphatoxin)损伤细胞膜的毒素，对多种哺乳动物红细胞有溶 血作用，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用。,毒素：引起绵羊、牛红C溶解，兔、鸡、马红C不溶解，与乳腺炎有关，具有热冷溶血现象（37溶血，移至4时溶血）。动物分离株多产生毒素。毒素：引起多种动物红C溶解。型：培养时CO
5、2浓度增加时出现溶血现象，引起各种动物红C溶解。,2.肠毒素(enterotoxin)按抗原性不同，分为A、B、C1、C2、C3、D和E 7个血清型，均可引起急性胃肠炎即呕吐为主要症状的食物中毒。,3.凝固酶 能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。（1）游离凝固酶:使液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。（2）结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。,凝固酶试验,+-,4.耐热核酸酶、纤维蛋白溶酶、透明质酸酶等 利于细菌扩散。,耐热核酸酶试验,-+,六、微生物学诊断,标本的采集 化脓性病灶采取脓汁、渗出液；败血症采取血液；脑膜炎采取脑脊液；
6、食物中毒则分别采集剩余的食物、呕吐物和粪便。直接涂片检查分离培养 普通平板培养、血液琼脂平板、高盐培养基。,生化实验葡萄糖+，麦+，乳+，蔗+，甘露醇+，靛基质，接触酶+，硝酸盐还原+,动物致病性试验家兔皮下接种1ml，24h肉汤培养物，可引起局部皮肤溃疡坏死；静脉接种，于接种后24-48h死亡，剖检可见脏器有大小不等脓肿。,致病性葡萄球菌有以下4大特点：（1）产生金黄色色素；（2）明显溶血；（3）甘露醇发酵；（4）凝固酶+,肠毒素的检查：发生食物中毒时将呕吐物离心取上清10030min破坏其它毒素注入幼猫静脉或腹腔15min-2h内出现急性肠炎症状，表明有肠毒素存在。,第二节 链球菌属 St
7、reptococcus,链球菌属细菌是化脓性球菌中的另一大类常见细菌，广泛分布于自然界，多数不致病，有些可导致人或动物各种化脓性炎症、肺炎、乳腺炎、败血症。,一、分类,（一）根据抗原结构分,1.属特异性抗原（P抗原）：核蛋白抗原2.群特异性抗原（C抗原）：多糖抗原3.型特异性抗原：蛋白质抗原，又称表面抗原。多与菌体毒力与免疫力有关。,兰氏（Lancefield)用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同，又分不同型。,兰氏分群法,型溶血性链球菌 菌落周围有不透明溶血环。多为条件性致病菌。型溶血性链球菌 菌落
8、周围形成完全透明的无色的溶血环。致病力强。,（二）根据溶血现象分类,型链球菌不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为不溶血性链球菌。无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔引起感染。,二、形态,圆形或卵圆形，排列成链状或成双排列，肉汤中生长链较长，G+无芽胞，无荚膜（肺炎链球菌有荚膜），除个别D群外均无鞭毛，接触酶（葡萄球菌+）,三、培养特性,大多数兼性厌氧，少数专性厌氧营养要求复杂，需补充血液、血清、葡萄糖等。血平板上形成灰白色、光滑，湿润，露珠状，针尖大小的小菌落，致病菌株多有溶血能力。,血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀。,四、生化特征 葡萄糖+、蔗糖+、大多数发酵乳糖、接触酶+,五、毒素和
9、酶致病性链球菌产生多种毒素和酶，引起多种动物发病。1溶血素：有溶解红C，杀死白C和神经C，毒害心肌作用，分为对氧敏感和对氧稳定即O和S两种。溶血素O（SLO）：为蛋白质，对氧敏感，耐热，遇O2发生氧化失去溶血力，遇还原剂可恢复溶血作用,抗原性强。溶血素S（SLS）：含糖的小分子肽，对氧稳定，对热和酸敏感，无抗原性。,2.致热外毒素（旧称红疹毒素）：A群产生的一种 外毒素，皮内注射引起局部或全身红疹，有抗 原性。3DNA酶4溶纤维蛋白酶5细胞壁上的脂磷壁酸：使细菌吸附于粘膜上皮 上，其荚膜成分、M蛋白具有抗吞噬作用。,致病物质：脂磷壁酸（LTA）：重要的粘附素 M蛋白：抗吞噬作用 一旦病菌大量繁
10、殖则产生链球菌溶血素、致热外毒素 等毒性物质，透明质酸酶、链激酶、DNA酶等侵袭性物质。,六、致病性,所致疾病：可引起多种动物发病,猪链球菌病,猪链球菌（Streptococcus suis）2型,S.equi subsp ATCC35246,S.suis type 2 HA9801,五、微生物学诊断,取材：采集适当的标本渗出液、脓汁、乳腺炎 乳液、脑脊髓液、尿液和感染组织。涂片镜检：可直接涂片，革兰氏染色镜检。分离培养:接种血平板，观察菌落形态和溶血情况。生理生化试验动物致病性试验：小白鼠腹腔注射0.2-0.5ml 24h肉汤培 养物，24h 48h死亡。分群定型：必须作血清学试验,几种重要
11、的链球菌 1无乳链球菌，停乳链球菌，乳房链球菌。都是引起牛，山羊，绵羊乳房炎的病感体，凡是有乳牛地方，有本菌存在。CAMP试验：Christie,Atkins,Much-peterson三个人名的缩写。在血平板上先接种一条金色葡萄球菌的划线，与此线垂直接种乳汁或分离培养物（但不接触），原来不溶血或溶血不明显的无乳链球菌在有金色葡萄球菌产物存在时，产生明显型溶血。此实验可以区分无乳链球菌与其它链球菌。,CAMP试验不是特异的，C、F、G群中有些链球菌也可产生CAMP 现象。猪放线杆菌也有CAMP现象。（了解）原因：无乳链球菌产生CAMP因子，这种因子可接合于被葡萄球菌神经磷脂酶C改变了的红细胞膜
12、上，引起红C大量溶解。,2马链球菌兽疫亚种（旧称兽疫链球菌）引起马的创伤感染，败血症、子宫炎、流产；牛乳房炎、子宫炎。猪：败血症，关节炎，流产；羊：败血症，心肌炎，腹膜为，肺炎。鸡：败血症。3马链球菌马亚种（旧称马腺疫链球菌）引起马的腺疫，存在于马下颌淋巴结的脓灶，鼻液及脓汁中，主要侵害0.5-5岁的马。,4肺炎链球菌：引起人的大叶性肺炎或脑膜炎，引起动物的败血症或肺炎。形态：排列为双球状，菌体呈卵圆形，矛头状或爪 子仁状，有明显荚膜。5猪链球菌：引起猪的脑膜炎，关节炎，肺炎，心肌膜炎，流产和局部脓肿，由于败血症突然死亡。猪链球菌2型可致人的脑膜炎，败血症，心，内内膜炎并可致死，多发于从事屠宰业或与猪肉打交道的人。,1.金黄色葡萄球菌可产生的毒素、酶及其致病作用。2.链球菌产生的毒素、酶及其致病作用。3.链球菌在血液琼脂培养基上的溶血表现。4.如何从污染的病料组织中分离致病性葡萄球菌？,复习思考题,
