《作坊发育生物学》PPT课件.ppt

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1、RNA的生物合成-转录,成员:张 满(0803108059)张 俊(0803108058)张 敏(0803108060)李兆丰(0703108053)肖星星(0803108055),牧医工程学院08级动物检疫二班,多彩的世界,浩瀚的宇宙之中唯有生命最神奇。每一个生命都有自己独特的一面,并且它们将它代代相传。这是为什么呢?我们知道生命有机体要将遗传信息传递给子代,才能在子代中表现出独特的一面。但这个过程只进行DNA的复制是不够的,还必须进行遗传信息的转移,即转录。,转录(transcription):以DNA为模板,在RNA聚合酶(RNA polymerase)的作用下合成mRNA,将遗传信息从

2、DNA分子上转移到mRNA分子上,这一过程称为转录(transcription)。,一、转录是基因表达的中心环节,1.转录是以 DNA为模板合成RNA,并且只是以单股DNA 为模板,因此具有不对称性;2.用以转录的单链DNA,称为模板链,与复制不同,转录是局部的,从启动子开始到终止子结束,为一个转录单位;3.转录不需要引物;4.转录的忠实性相对弱;5.转录首先得到RNA前体,然后再进行加工转变为成熟的RNA.,被转录成单个RNA分子的一段DNA 称为一个转录单位(transcript),生物基因的转录包括模板的识别、转录起始、延伸、终止等四个步骤。下面首先介绍RNA聚合酶的结构与功能以及启动子

3、的结构特点,然后分别介绍上述四个步骤。,分子量48万,4种亚基:全酶=核心酶(2)+因子 亚基决定转录的基因 亚基在53方向上延长多核苷酸链,其方式与DNA 聚合酶相同,原料为NTP,没有纠错的功能。亚基结合DNA模板 因子识别启动子并与之结合,二、RNA聚合酶(RNA polymerase),1.原核的RNA聚合酶,大肠杆菌RNA聚合酶的结构与功能,聚合酶I:转录45S rRNA 聚合酶II:转录mRNA的前体,称为核不均 RNA(hnRNA)聚合酶III:转录tRNA 和5S rRNA 等,2.真核的RNA聚合酶,真核生物RNA聚合酶的结构比较复杂,都是多亚基的,通常有6-10个,并且分子

4、量都在500000u左右。它有3种RNA聚合酶。,真核生物RNA聚合酶的特性,DNA上的转录起始序列,称为启动子,有序列保守性,不仅是转录起始的位置,而且影响转录的活性。,RNA聚合酶结合在启动子上,上游,下游,三、启动子(promoter),注意原核启动子在-35 和-10区域的保守序列,Pribnow box,1、转录开始 由因子辨认并且结合到启动子上,局部解链(10-20bp),拓朴酶等也参与。2、RNA链的延伸 由核心酶催化,以其中的一股DNA 单链作为模板链,以NTP为原料,按照碱基互补配对的原则,通常是由5ppp嘌呤核苷(G 或A)开头向着3延长多核苷酸链,合成开始后,因子从模板上

5、脱离下来(可以重复利用)。核心酶覆盖双链DNA和RNA复合物,向前推进,一边解开螺旋,一边释放出新合成的RNA链,后面已经转录的区域中分开的DNA链又重新形成双螺旋。,四、转录过程及其特点,“转录泡(transcription bubble)”,转录过程中的模板识别、起始和延伸,A.依赖因子的终止 新生RNA上有因子的识别位点。它与聚合酶-DNA-RNA复合物结合,向3端移动,并解开DNA-RNA杂交体,需ATP。B.依赖于特定序列的终止 转录终止区有特殊结构。终止区的上游有GC二重对称区,转录的RNA容易形成多个“发卡”结构,转录产物的3端有polyU序列。这种特殊的二级结构阻止了转录向下游

6、继续推进。,3、转录的终止,A,B,转录的全过程,转录得到的只是初级产物,通常要经过加工,才能转变为成熟的RNA。tRNA 和rRNA的转录后加工比较简单,而mRNA 的转录后加工比较复杂。原核基因是多顺反子(poly-cistron),通常是几个相关的结构基因(编码的)同时转录得到多个mRNA。而真核基因是单顺反子(mono-cistron),又是断裂基因。其结构基因中由编码的外显子(exon)和不编码的内含子(intron)间隔排开。转录得到的是“毛坯”,要在其5端加上鸟嘌呤“帽子”,3端加上polyA的“尾巴”,切除内含子,拼接外显子,才能成为一个成熟的mRNA。,五、RNA转录后的加工(post-transcriptional processing),原核前体RNA的加工,tRNA转录后的加工与修饰,注意稀有碱基,真核rRNA前体转录后的加工,真核mRNA前体转录后加工(以卵清蛋白mRNA的转录为例),外显子,内含子,mRNA的剪切,首、尾部的修饰,1)5端形成帽子结构(m7GpppGp-),2)3端加上多聚腺苷酸尾巴(polyA tail),真核生物mRNA的转录后加工,帽子结构,谢谢!,

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