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1、1,检测细胞色素P450 1A酶的 高选择性比率双光子荧光探针,文献出处：DOI:10.1021/jacs.5b09854 J.Am.Chem.Soc.2015,137,1448814495,2,Contents,Introduction,1,2,Experimental section,1,2,3,4,Results and Representation,3,1.Introduction,CYP1A,抗干扰差成像效果差毒性大,人体药物新陈代谢酶，对致癌物质活性有重要影响,活性腔中有丰富的羟基氨基酸，氢键和-相互作用可能对基底的组成产生作用,传统单显微镜荧光探针,NCMN的设计依据:CYP1A
2、d的底物偏好 对位有较强的脱烷基化作用,2.Experimental section,3.表征,结论：NCMN作为检测CYP1A的探针可行,肉眼色比,112nm红移,机理,3.表征,结论：NCMN的脱甲基化具有良好的反应性和理想的动力学行为，有潜能对复杂生物体中的CYP1A进行定量测定。,表征 人肝微粒体中CYP1A的量化,结论：(a)(b)(c)确定了NCMN的高选择性(d)(e)(f)表面NCMN可以作为CYP1A调节器的筛选和表征,活细胞成像应用,11,2,单光子,双光子,未加抑制剂,加CYP1A抑制剂,结论：荧光响应是由于CYP1A调节NCMN所致。NCMN可以用单光子、双光子激发成像
3、来检测活细胞中CYP1A的活性。,NCMNe在完整细胞和细胞匀浆内检测CYP1A的量,正常,1nMTCDD,10nMTCDD,结论：NCMN可以被用于筛选有效的CYP1A诱导剂，并检测活细胞中生 成的CYP1A的酶活性,小鼠肝组织中CYP1A的三维深度成像,放大图,结论：NCMN组织渗透力强，组织中的CYP1A适合用双光子深度荧光成像,15,3.Results and discussion,CYP1A2,CYP1A1,亚铁血红素,铁原子,结论：三条H-bond表明-COOH在识别和对接CYP1A中的重要作用 催化效率CYP1A2大于CYP1A1,16,Thank you for your attention!,
