组织学与胚胎学histologyandembryology.ppt

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1、组织学与胚胎学(histology and embryology),上篇,组织学,第1章 组织学绪论,目的要求 1、掌握嗜酸性、嗜碱性、电子密度高、电子密度低等概念。2、熟悉组织学与胚胎学的基本研究方法。3、了解组织学与胚胎学的范围、内容和其 它研究方法。4、了解组织学与胚胎学的发展。,组织学(histology):研究机体微细结 构及其相关功能的科学。它是以显微镜观察组织切片为基本方法,又称显微解剖学。,一、定义:,二、内容:,1、基本组织(总论):,2、器官、系统(各论):,细 胞 组织 器官 系统细胞外基质,三、组织学常用计量单位,mm=1000m,m=1000 nm,四、组织学研究方法

2、,(一)一般光学显微镜术(简称光镜,LM)镜下结构称光镜结构,放大倍数1500倍,分辨率0.2m,观察时,须将组织制成薄片,以利光线通过。,石蜡切片-最常用制片过程:1、取材 2、固定 3、脱水 4、透明 5、浸蜡包埋 6、切片:57微米厚度 7、展片 8、脱蜡 9、染色 10、脱水 11、封片,还有冰冻切片(酶组织化学染色),涂片(血液),铺片(疏松结缔组织),磨片(牙和骨)等制作切片的方法。,染色:是用染料使无色组织切片着色,增加对比度,便于镜下观察。染色方法很多,但没有一种能使细胞全部结构同时着色。常用酸性染料(伊红、坚固绿、橙黄G),碱性染料(苏木精、亚申蓝、甲苯胺蓝、碱性品红)、硝酸

3、银等进行染色。最常用:,H.E,1、嗜碱性:细胞和组织的酸性物质或结构与碱性染料(如苏木精)亲合力强,称嗜碱性。2、嗜酸性:碱性物质或结构与酸性染料(如伊红)亲 合力强,称嗜酸性。3、中性:若与两种染料的亲合力均不强的。4、亲银性:银染法中有些组织结构可直接使硝酸银还 原而显示,称此为亲银性。5、嗜银性:有些结构无直接还原作用,需加入还原剂 方能显色,称此为嗜银性。,名词:,(二)电子显微镜术(简称电镜,EM)镜下结构称超微结构,可放大几万倍至几十万倍。,1、透射电镜:观察组织、细胞内部超微结构。分辨率0.2nm。标本制备:1、固定(戊二醛等)2、包埋(环氧树脂)3、切片(50-80nm)4、

4、染色(醋酸铀和柠檬酸铅等重金属盐)标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。电子密度高、电子密度低:被重金属浸染呈黑色的结构,称电子密度高;反之,浅染的部分称电子密度低。,2、扫描电镜:用于观察组织表面的立体结构。分辨率5-7nm,(三)组织化学术,为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位地显示某种物质的存在与否、以及分布状态。一般组织化学术:主要显示糖类(如PAS反应)、脂类、核酸和酶类。免疫组织化学术:应用标记的特异性抗体和组织中相应的肽或蛋白质结合,然后通过显微镜观察标记物,而获知该肽或蛋白质的分布部位及相对含量。此法特

5、异性强,敏感度高,应用广泛。原位杂交术:即核酸分子杂交组织化学术,用于检测基因(DNA片段)的有无、及在转录水平检测基因的活性(mRNA)。,(四)放射自显影术,通过活细胞对放射性核素或其标记的物质的摄入,以显示该细胞的功能状态、或该物质在组织和细胞内的代谢过程。(五)图像分析术 应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析,从而获得立体的组织和细胞内各种有形成分的数量、体积、表面积等参数。根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建,可以获得组织微细结构的立体模型,这部分内容称体视学。,(六)细胞培养术和组织工程,细胞培养术:是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。组织工程:是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。组织工程研究包括四个方面:生长旺盛的细胞,也称种子细胞;细胞外基质,可用生物材料(如牛胶原)和无毒、可被机体吸收的人工合成高分子材料;构建组织或器官,即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状;将构建物移植机体的方法。,五、组织学学习要点,1、平面与立体 的关系 2、结构与功能的联系3、静态与动态的关系4、分析比较,纵横联系,思考题,组织学的主要研究内容是什么?组织和器官分别是如何构成的?人体有哪几种基本组织?何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、电子密度高、电子密度低?组织学有哪些常用方法和技术?,

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