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1、小亚基,大亚基,tRNA,核糖体,原核70S核糖体和真核80S核糖体的结构和组成,核糖体有4个基本功能1.容纳mRNA,并能沿着mRNA由53 移动,由tRNA解读其密码;2.氨基酰位点(A位点),可结合氨基酰-tRNA(AA-tRNA);3.肽酰基位点(P位点),可结合肽酰基-tRNA(肽-tRNA);4.肽酰基转移酶中心,是形成肽键的位点等。,所有参与合成多肽链的氨基酸都要激活,并由数十种高度专一的氨基酰-tRNA合成酶催化。该酶由两个识别位点,它们能识别特定的氨基酸和选择其所对应的tRNA,使两者连接起来(利用ATP)。反应如下:氨基酸的羧基与tRNA 的3端CCA-OH 以酯键相连,因
2、此其氨基是自由的。,2、蛋白质的生物合成过程,2.1、氨基酸的活化,氨基酸与tRNA的 连接方式,翻译起始时,第一个氨基酸一般是蛋氨酸,其氨基要甲酰化,予以保护。,甲酰FH4,甲酰基,Met,tRNAfmet,fMet-tRNA合成酶,fMet-tRNA,酯键,首先IF3、IF1帮助30S小亚基与mRNA结合,IF2和GTP帮助甲酰甲硫氨酸-tRNA与AUG配对,接着IF3脱离,形成30S起始复合物。50S大亚基进入,IF1和IF2脱离,形成50S起始复合物,需要GTP。甲酰甲硫氨酸-tRNA处于P位。,2.2、起始复合物的形成,起始密码AUG上游的S.D序列与16S rRNA3端互补结合有利
3、于30S起始复合物的形成,一个嘌呤丰富区 起始密码,2.3、肽键的形成和延伸,(注意新的AA-tRNA如何定位,第一个肽键如何形成,核糖体如何移动),氨酰基tRNA进入A位,新的氨基酸-tRNA的进位依赖EF-Tu和Ts因子的协助,肽键的形成,肽键的形成由肽酰基转移酶催化(此酶具有核酶的活性),原核生物肽链的延长,核糖体沿着mRNA 53方向移位EF-G因子和GTP参与空载的tRNA从E位点离开,氨基酸进位,肽链形成和延伸,核糖体沿着mRNA的53 方向移位,循环往复,新合成的肽链由氨基端向着羧基端不断延长,直至mRNA上出现终止密码,相应的肽链释放因子RF1(对应UAA、UAG),RF2(对
4、应UAA、UGA)占据A位。肽链的合成终止,并从核糖体上释放。核糖体大、小亚基解聚,并进入下一轮合成。,2.4、肽链的终止,蛋白质合成的终止,翻译的全过程,多个核糖体结合在同一条mRNA上,由53进行翻译,形成多核糖体(polyribosome),翻译速率得以提高,3.多肽链的修饰和加工,(1)N端修饰 原核生物修饰时是由肽甲酰基酶除去甲酰基,多数情况甲 硫氨酸也被氨肽酶除去,真核生物中甲硫氨酸则全部被切除。(2)多肽链的水解切除 水解切除其中多余的肽段,使之折叠成为有活性的酶或蛋白质。如酶原激活(3)氨基酸侧链的修饰 氨基酸侧链的修饰包括羟化、羧化、甲基化及二硫链的形成等。(4)糖基化修饰
5、糖蛋白是细胞蛋白质组成的重要成分。它是在翻译后的肽链上以共 价键与单糖或寡聚糖连接而成。糖基化是在酶催化下进行的。,信号肽(signal peptide)未成熟蛋白中,可被细胞识别系统识别的特征性氨基酸序列。,本 章 结 束,动物生物化学练习(3)1无论是在DNA复制、还是RNA的转录或者是蛋白质翻译的过程,我们都能看到碱基互补配对的原则贯穿在遗传信息从DNA传递到蛋白质的各个环节。请做简要地介绍并评价其生物学意义。2.DNA的复制包括哪些主要阶段?为什么复制具有半保留性?为什么说子链的合成是半不连续的?3.转录的终止出现在DNA分子中特定的碱基顺序上。原核DNA转录的终止顺序有明显的结构特点,请予描述。除此以外,还有什么其它的终止转录的方式?4.关于多肽链的生物合成,请你说明:氨基酰-tRNA合成酶的特点;图示原核70S 起始复合物;解释延伸因子Tu的作用;并指出肽酰基转移酶何时起作用。5.为了克隆某个真核细胞的蛋白质的基因,研究人员更愿意先从组织中分离它的mRNA,这样得到这个基因就不难了。为什么?,