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1、实验八 切花保鲜及逆境造成的生理生化变化,植物生理学实验,【实验原理】,切花指从花卉植株上剪切下来、带有较长茎部的花枝或花序。,切花衰老的原因,水分平衡失调,乙烯加速衰老,能源缺乏,其它还有温度、湿度等。,保鲜剂应具有以下几个条件：,能源：糖,乙烯抑制剂：Ag+,杀菌剂：8羟基喹啉,水：pH,植物激素：细胞分裂素、多效唑等,形态学观察 逆境生理生化指标的测定,逆境生理生化指标的测定,质膜透性变化 电导率法膜脂过氧化丙二醛含量的测定渗透调节物质的变化脯氨酸含量的测定,植物在逆境伤害和衰老过程中，发生脂质过氧化作用而产生丙二醛（MDA），其含量高低可用来说明脂质过氧化的程度。,丙二醛含量的测定,硫
2、代巴比妥酸（TBA）丙二醛,酸性,3,5,5-三甲基噁唑2,4-二酮,532nm,硫代巴比妥酸（TBA）糖类物质,MDA-TBA反应产物,糖类物质-TBA反应产物,MDA、糖类物质与TBA反应产物的吸收光谱图,1：糖类物质-TBA反应产物3：MDA-TBA反应产物,a：MDA-TBA反应产物b：糖类物质-TBA反应产物,a,b,Lambert-Beer定律 A KLC A吸光度 K吸收系数 C浓度,A532=KaCa+KbCb,A450=KbCb,Ka532：15500Kb532：7.40Kb450：85.40,A532=15500Ca+7.4Cb,A450=85.4Cb,Ca=6.45A53
3、2-0.56A450,Cb=11.71A450,(mol/L),(mmol/L),实验仪器：离心机、分光光度计 实验试剂：8-HQ、蔗糖、PP333、KCl、H3BO3、柠檬酸、磷酸缓冲液、三氯乙酸 溶液、硫代巴比妥酸溶液 实验材料：康乃馨,【器材与试剂】,【实验步骤】,挑选颜色、开放程度相对一致的康乃馨12支，分三组。,2.取广口瓶3只，分别作以下处理：,对照：蒸馏水100ml,基本配方：150ppm 8-HQ（50ml）2%蔗糖（20ml）H2O 100ml,配方2：150ppm 8-HQ（50ml）2%蔗糖（20ml）50ppm PP333（5ml）10ppm KCl(1ml)10ppm H3BO3(1ml)+H2O 100ml,其中，用1000ppm柠檬酸调节PH至4.5,3.切花培养3周，观察记录切花衰老的程度。,4.MDA提取：花瓣0.5g，加4ml磷酸缓冲液及少量石英砂研 磨，匀浆以8000r/min 离心20min取其上清，上清液即为MDA提取液。,5.取四个试管,7.结果计算：,C6.45A5320.56A450,丙二醛含量,C提取液体积（4ml）,W（0.5g）,（mol/g FW）,6.取上清液在532nm和450nm波长下，测定A值（以空白对 照调零）。,(mol/L),
