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实验四 革兰氏染色法,一、细菌抹片及染色的目的 由于细菌个体微小,基本上无色透明,故将其用适当染料染色观察,方能显示它的形态、大小、构造及染色特性等,在细菌鉴别上有重要意义。,二、原理,细菌的等电点较低,约 在pH 25之间,故在中性、碱性或 弱 碱性溶液中,菌体蛋白质电离后带负电荷,易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合,使细菌被染成紫色或红色。,四、细菌革兰氏染色法的步骤及结果,1、加草酸铵结晶紫染色液 1-2min,水洗;2、加革兰氏稀碘液 1-3min,水洗;3、加95%酒精脱色 0.5min,水洗;4、10倍稀释石碳酸复红液复染 10-30s,水洗;5、结果 蓝紫色:革兰氏阳性菌 红 色:革兰氏阴性菌,五、作业,1、制备细菌染色标本片时应注意哪些事项?2、涂片固定的意义何在?固定时应注意什么问题?3、试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。4、绘出镜检图。,