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1、第3章 消毒灭菌,教学要求,1、掌握消毒、灭菌、防腐和无菌的基本概念。高压蒸气灭菌的机理、应用范围及注意点。紫外线杀菌法、滤过除菌法机理、应用范围及注意点。2、理解其它热力灭菌的种类、原理及应用范围。3、了解常用化学消毒剂的的种类、杀菌机理及应用。影响消毒灭菌效果的因素。,消毒灭菌常用术语,灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物 消毒（disinfection）：杀死物体上病原微生物防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖清洁（cleaning）：除尘埃和污秽减少微生物数量 无菌（asepsis）：无活菌，灭菌的结果。无菌操作:防止细菌进入人体或其它物品的操作技术
2、,第一节 物理消毒灭菌法,一、热力灭菌法 最常用（一）原理 蛋白质变性；核酸断裂（二）干热灭菌法 1.焚烧：病理性废弃物或动物尸体,第一节 物理消毒灭菌法,一、热力灭菌法（二）干热灭菌法 2.烧灼：接种环、试管口 3.干烤：干烤箱，160-170，2h 耐高温、不蒸发的物品。玻璃、瓷器 4.红外线：电磁波、在表面好 所需温度和时间同干烤箱 医疗器械和食具,烤箱,烧灼,第一节 物理消毒灭菌法,一、热力灭菌法（三）湿热灭菌法 最常用 在同一温度下，湿热比干热效力大（1）菌体蛋白易凝固变性（2）穿透力大（3）蒸汽有潜热。,第一节 物理消毒灭菌法,一、热力灭菌法（三）湿热灭菌法1.巴氏消毒法：61.1
3、-62.8，30min；71.7，15-30s。牛乳、酒类等液体低温杀灭病菌。2.煮沸法：1005min（繁殖体）2h（芽孢）。食具、刀剪、注射器。加NaHCO3提沸点到1053.流动蒸汽消毒法：蒸汽100 15-30min（繁殖 体），类似蒸笼。,第一节 物理消毒灭菌法,一、热力灭菌法（三）湿热灭菌法 4.间歇蒸汽灭菌法：反复多次加热灭菌。不耐高热的含糖，牛奶等的培养基。5.高压蒸汽灭菌法（1）最常用，最好（2）103.4kPa，121.3，15-20min，杀 所有微生物（3）常用于耐高温、耐湿物品 一般培养基、生理盐水、手术敷料等。,高压蒸汽灭菌器,第一节 物理消毒灭菌法,二、辐射杀菌法
4、1.紫外线杀菌（1）波长：240-300nm杀菌，265-266nm最强（2）杀菌机制：DNA中形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA的复制与转录。（3）杀菌作用特点 穿透力弱，用于空气及物品表面的消毒 只杀繁殖体，不能杀芽孢 对人皮肤、眼睛有损伤，注意防护。（4）适用范围：手术室、传染病房、无菌实验室的 空气消毒，或不耐热物品的表面消毒,第一节 物理消毒灭菌法,二、辐射杀菌法 2.电离辐射（射线、射线）用途：干扰DNA合成，大量的一次性医用塑料制品 食品、药品、生物制品，不破坏营养。3.微波 用途：产生热效应。非金属器械、食品、食具、检验室用品、药杯等。,第一节 物理消毒灭菌法,三、滤过除菌法1.用
5、物理阻留的方法 除去 液体或空气中的细菌，达到无菌。2.细菌不能过孔径，可除去，不能除去病毒。3.用于不耐高温的血清、毒素、抗生素除菌4.液体除菌用滤菌器，空气除菌用生物洁净技术。,滤菌器和层流室（生物洁净室）,第一节 物理消毒灭菌法,四、干燥与低温抑菌法 1.干燥：水分逸出 生命停止。保存食物。2.低温：代谢减慢 影响生长。保存菌种。3.冷冻真空干燥法：保存菌种最好 保存数年-数十年。,第二节 化学消毒灭菌法,一、原理1.蛋白质变性或凝固2.干扰酶系统和代谢3.损伤细胞膜,第二节 化学消毒灭菌法,二、种类（一）高效消毒剂：杀死芽孢 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂；3.醛类消毒剂；4.环氧
6、乙烷（二）中效消毒剂 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂（三）低效消毒剂 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾,次氯酸钠,三氯异氰尿酸,过氧化氢消毒液,二氧化氯,戊二醛消毒液,甲醛溶液,环氧乙烷灭菌箱,第三节 消毒灭菌的运用,一、医疗器械物品的消毒灭菌（一）高危器械物品 需进入无菌组织 应该灭菌。（二）中危器械物品 不进入无菌组织 但接触黏膜。消毒即可。（三）低危器械物品 只接触未损伤皮肤 不进入无菌组织和不接触黏膜。用后清洗、消毒即可。（四）快速周转的医疗器械 牙钻、牙科手术器械等 用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂,第三节 消毒灭菌的运用,二、室内空气消毒灭菌 1.物理消毒法：紫外线照射最常用
7、；滤过除菌：空气通过孔径小于0.2 m的高效过滤装置除去细菌和带菌尘埃。2化学消毒法：化学消毒剂喷雾和熏蒸：过氧乙酸；过氧化氢；二氧化氯溶液喷洒；中草药点燃烟熏。三、手和皮肤的消毒 手上有暂住菌和常驻菌 用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。,第三节 消毒灭菌的运用,（四）黏膜的消毒 口腔-过氧化氢（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 粪、尿、痰、脓液-次氯酸钠、漂白粉（六）病人污染物品的消毒 煮沸，化学消毒剂擦洗、喷洒等（七）饮水的消毒 自来水-氯气，少量饮用水漂白粉（八）环境的消毒 病人住过的房间、地面-过氧乙酸、含氯消毒液 厕所、阴沟生石灰（有效成分是氢氧化钠）,第
8、四节 影响消毒灭菌效果的因素,一、微生物的种类 二、微生物的物理状态 三、微生物的数量 四、消毒剂性质、浓度与作用时间 五、温度 六、酸碱度 七、有机物,第五节 病原微生物实验室生物安全,一、病原微生物的分类 根据传染性和危害分四类：其中一类和二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级 根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平（BSL）及实验室生物安全国家标准，实验室分一、二、三、四级。三、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动。,1.杀灭芽胞最常用和最有效的方法是：_。a.紫外线照射 b.煮沸5min c.巴氏消毒法 d.流通蒸气灭菌法 e.高压蒸气灭菌法2.灭菌方
9、法错误的是_。a.手术室空气-紫外线b.排泄物-漂白粉c.饮水-氯气d.含血清培养基-高压蒸气灭菌e.温度计-75%酒精3.下述不可能杀灭细菌芽胞的方法是：_。a.煮沸法 b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法 d.干热灭菌法e.高压蒸气灭菌法,4.关于紫外线，说法错误的是_。a.其杀菌作用与波长有关b.可损坏细菌的DNA构型c.265-266nm杀菌作用最强d.其穿透力弱，故对人体无损害e.紫外线适用空气和物体表面的消毒5.常用于空气或物体表面的消毒_。a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法 6.常用于基础培养基灭菌_。a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法,7.常用于手术器械的灭菌_。a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法8.常用于血清的除菌_。a.高压蒸气灭菌法 b.滤过除菌法c.紫外线照射法 d.巴氏消毒法 e.干烤法 9.将牛奶加热6230分钟的目的是_。a.使牛奶中的蛋白质变性，易于吸收b.杀灭牛奶中的所有微生物 c.杀死牛奶中的病原菌d.使牛奶不含活菌 e.防止或抑制微生物在牛奶中生长和繁殖10.乙醇消毒剂常用的浓度是：_。a.100 b.95 c.75d.50e.30,
