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1、生物安全实验室操作技术规范及个人防护,生物安全实验室操作技术规范,生物安全,（一）实验活动的类型,标本采集处理移液操作生物安全柜 锐器的使用,离心 匀浆、超声 消毒医疗废物,气溶胶,实验室：混匀 离心,（二）防护要求,在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。在处理完感染性实验材料后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。,为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的防护镜。严禁穿着实验服离开实验室工作区域。不得在实验室内穿露脚趾的鞋
2、。禁止在实验室工作区域进食、饮水、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。,办公室,（三）有关操作的指导原则,所有的实验操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。应限制使用注射针头和注射器。,实验室应制订并执行处理溢出物的标准操作程序。出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室负责人报告。实验室应如实记录有关暴露和处理的情况，保存相关记录。污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）。只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实验室,（四）实验室工作区的管理原则,实验室
3、应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。每天工作结束后应清除工作台面的污染。若发生具有潜在危害性的材料溢出应立即清除污染。所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须先清除污染。感染性材料的包装和运输应遵循国家和或国际的相关规定。如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。,（五）生物安全管理的指导原则,实验室负责人负责制订和采用生物安全管理计划以及实验室安全或/和操作手册。实验室应能提供常规的实验室安全培训,并建立制度。实验室负责人（或生物安全负责人）要将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员，同时要求他们阅读生物安全或/和操作手册，并遵循标准的操作程序。实验室内应备
4、有可供取阅的安全或/或操作手册。所有实验室人员必须经过培训，了解所从事工作的危险、掌握有关的管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。,实验室仪器设备的使用,生物安全柜的使用,生物安全柜的定义,主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸.保护操作人员可以保护样品,Class II 生物安全柜,II 级生物安全柜,A型：30排风排到房间 B3型：30排风排到室外 B1型：70排风排到室外 B2型：100排风排到室外,生物安全柜操作步骤,1.将所需物品装入生物安全柜。2.启动生物安全柜让其运行1015分钟。3.使用一片薄纸检查进入气流。4.直接进入生物
5、安全柜完成工作，工作时动作要慢，要有条不紊。5.工作最后，将所有要拿出生物安全柜的物品消毒。6.对生物安全柜内部消毒。7.让生物安全柜运行1015分钟。8.关机。,在生物安全柜上工作,关掉紫外灯，前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风扇.检查出风口是否有障碍物，等待5min。.,开始,在生物安全柜上工作,在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和 所需设备，充分做好准备工作。尽量减少房间内的走动，保证正常气流。,准备工作,在生物安全柜上工作,安全柜只放本次实验所需的物品。出风口不要有障碍物。大物体之间要保持一定距离把前窗降至适当高度。,操作,在生物安全柜上工作,所有物品离前窗至少2英寸，干净和被污染的
6、物品分开放置；,技巧,在生物安全柜上工作,避免使用明火（可用酒精灯），使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理,注意事项,在生物安全柜上工作,干净的物品,理想的工作台摆放,被污染的区域,废弃物托盘,垃圾袋,生物安全柜内感染性材料溢洒的处理,当发生少量溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所以物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套，不论是摘下手套还是更换手套都要洗手。若发生大量溢洒，液体会通过生物安全柜前面或后面的格栅流到下面去，生物安全柜内所有的物品都应该进行表面消毒并拿出生物安全柜，在确保生物安全柜的排水阀被关闭后，可将消毒液倒在工作台面上，使
7、液体通过格栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和/或高压灭菌处理。,个人生物安全防护,实验室生物安全防护内容,1.强烈的生物安全意识2.强有力的管理体系（软件）3.按标准精心设计、建造的实验室、可靠的安全设备（硬件）4.认真的个人防护（硬件）5.训练有素的团队6.科学及时的维护,防护部位,手：针刺、鼠咬、虫叮、污染等头面眼：喷溅、气溶胶沉降呼吸道：气溶胶吸入躯干（包括上下肢）：气溶胶沉降、喷溅、老鼠解剖、菌（毒）液溢洒等足：,个人防护装备,是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质
8、（气溶胶、喷溅物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。,个人防护装备,装备包括：1、帽子 2、眼镜（护目镜）3、口罩、4、防护衣(实验服、隔离衣)5、手套 6、鞋套,个人防护装置选择原则,1.根据生物安全实验室级别，2.根据操作性质，3.根据个人情况，4.根据市场供应情况.,（一）手部防护及其装备 1（手套）,手部防护装备手套 1、手套应在实验室工作时使用。2、在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液时），必须使用手套手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。,手臂防护2 对手套要求,1.手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护
9、。2.对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘 除等培训。3.一次性手套不得重复使用。4.一次性手套必须先消毒后丢弃.,要点3 手套的使用,1.一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1实验室），2.若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2和BSL-3实验室）应该佩戴两副手套。3.在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。4.戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验 服袖口。,要点4 手套的清洗和更换,1.使用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃。2.不得戴着手套离开实验室区域。3.在脱去手套之前消毒。,
10、要点5 手套更换,4.工作人员在完成感染性物质实验,离开生物安全柜之前,应 该脱去外层手套丢入生物安全柜内的高压灭菌袋中。然后用消毒液喷洗内层手套，以避免后来污染门手、电灯开关、电话等（BSL-2和BSL-3实验室）。,要点6 避免触摸不该触摸物,1.戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）2.避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或捏手等3.如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清洗手部4.注意尽量不去触摸工作台面和其他物品,1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖口;,要点7,要点8 脱手套过程及
11、注意要点:,用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；脱下另一只手套。,要点9 洗手,1、应该安装洗手装置。2、洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施，要经常 洗手。a）在处理活体病原材料等生物危害物质后，b）在脱去手套之后和离开实验室之前，c）在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时，d）在继续脱卸其他个人防护设备之前。,（二）眼睛防护（装备）1,安全眼镜和护目镜（物理、化学和生物因素）A）在所有易发生潜在眼睛损伤的生物安全实验室中工作时必须采取眼睛防护措施 B）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度
12、（评估）,眼睛防护2,佩戴侧面带有护罩的安全眼镜就可以达到防护的目的。2.当进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时 必须佩戴护目镜。,警告：不得戴眼镜防护装备离开实验室区域,眼睛防护,洗眼装置 如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15到30分钟。事后必须立即填写事故报告单并立即报告主管领导。,（三）头面部防护装备 1,口罩 口罩仅可以保护部分面部受生物危害物质如血液、体液分泌液以及排泄物等喷溅物的污染,头部防护3 防护帽,在生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质
13、飞溅至头部(头发)所造成的污染。,一次性简易防护帽 覆盖头发,要求：工作人员在微生物实验操作时应佩带防护帽,（五）躯体体防护装备 1,防护服（实验服、隔离衣）1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服2、清洁的防护服应放置在专用存放处3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4、当防护服已被危险材料污染后应立即更换5、离开实验室区域之前应脱去防护服。,躯体防护装备2,实验服（BSL-1 实验室）-前面应该能完全扣住隔离衣（BSL-2和BSL-3实验室）-比实验服将更适合于在微生物实验室以及生物安全柜中的操作工作。禁止在实验室中穿短袖衬衫、短裤或短裙,个体防护的配备原则,BSL2实验室在实验室中应穿实验服。离开实验室时，实验服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤。当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。,个体防护的配备原则,当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜）。,个体防护的配备原则,在使用传染性物质或已被污染的仪器时，需戴手套。,（九）淋浴装置和应急消毒喷淋装置,-应急消毒喷淋装置,1、规定：-BSL-2实验室应有应急喷淋装置 2、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋 装置的摆放位置、培训其操作方法。,
