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1、实验23&24,胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响,掌握血糖(blood sugar)的测定方法及 激素(hormone)对血糖浓度的影响。了解血糖测定的临床意义。,实验目的与要求,机体的血糖水平受多种激素的调节而维持稳定影响血糖的激素分为两类：降低血糖的激素：胰岛素(insulin)升高血糖的激素：肾上腺素(adrenaline)、胰升糖素、糖皮质激素和生长激素,血浆(plasma)：全血经抗凝处理后得到的液体成分，含有凝血因子、纤维蛋白原等血清(serum)：全血凝固后析出的液体，不含纤维蛋白原,血样,实 验 原 理,620 nm测定待测血样的吸光度(A)与同样处理的葡萄糖标准溶液比较(
2、标准管法)即可求得血样中葡萄糖的含量。,酸性、加热,-3 H2O,羟甲基糠醛,邻甲苯胺,醛亚胺（蓝色）,葡萄糖(glucose),邻甲苯胺法测定血糖浓度,2、血样的采集 1）心脏内取血5ml，加入抗凝剂（草酸钠）【胰-1、肾-1】2）皮下注射 胰岛素0.5ml/kg（2U/kg），1小时后 1%肾上腺素0.4ml/kg，半小时后 3）心脏内取血5ml，加入抗凝剂【胰-2、肾-2】,1、动物的准备 家兔两只，禁食一晚。标记后，测量体重并记录。,实 验 步 骤,4、邻甲苯胺法测定血糖浓度 1）取大试管，按Page78表格添加试剂 2）混匀各管，沸水浴中加热10min后取出，流水冷却。3）用空白管校
3、正吸光度零点，读取各管620nm的吸光度。,3、血浆的制备 血样采集后，2000rpm离心5min，取上清。,数据,G胰-1 G胰-2G肾-1 G肾-2,A测定：m胰-1、m胰-2、m肾-1、m肾-2,实 验 结 果,A测定 m标准 A标准血糖浓度=1000 V测定 180 g/mol,1、邻甲苯胺试剂中含冰乙酸，谨防腐蚀分光光度计2、分光光度计的使用方法3、微量移液器的使用4、离心机使用前必须配平：质量配平&位置配平5、电磁炉使用前10min打开；绝对不可干煮；加热完成后，用夹子取出试管，绝对不可用手拿6、兔子的抓取、固定、心脏采血、皮下注射方法,注 意 事 项,1、打开电源，调节旋钮至需要
4、的波长，预热2030min2、1档（空白管），T模式下调100%，显示“Blank”、“100”3、拉杆拉至1.5档，T模式下调0%，显示“0.00”4、换到A模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度,拉杆，0-4档,样品池,读数,波长,毛面,光面,1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光线从光面通过2、用溶液润洗2-3次，装至2/3至4/5体积3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面,比色杯,分光光度计的使用,血糖升高 1、糖尿病 2、内分泌疾病：甲亢、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤、胰高血糖素瘤 3、妊娠高血糖 4、胰腺疾病：坏死性胰腺炎、胰腺手术、原发胰腺癌 5、应激性高血糖血糖降低 1、胰岛细胞瘤或增生 2、内分泌疾病：垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减低 3、肝源性低血糖，各种肝病致肝功能衰竭,血糖测定的临床意义,快速血糖测定仪,测试时间：515 秒测试范围：1.133.3 mmol/L试纸条自动吸血(110 l)自动显示血量是否合适试纸条芯片自动识别试纸编码温度范围：1035,
