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蛋白質的沈澱作用,能使蛋白質發生沈澱作用的因素有:酸 酸性試劑 單寧酸 重金屬離子(汞離子、鉛離子等)咖啡因 嗎啡 中性鹽 有機溶媒 熱,06.2,五蛋白質純化,Ammonium sulfate,Salting out鹽析,五蛋白質純化,等電點沉澱,蛋白質的溶解度,pH值:當pH值在其等電點(pI)時,溶解度最小。鹽濃度:當在低濃度時,蛋白質的溶解度隨著鹽濃度的增加而增加,稱為Salting-in。當鹽濃度高至某一濃度時,蛋白質的溶解度隨著鹽濃度的增加而減少,稱為Salting-out。溶媒的介電常數(Dielectric contant):酒精、丙酮的常數較水小,使蛋白質分子在此溶媒中的斥力較小,溶解度較低。4.溫度:在一限定的溫度(約040)下,大部份的蛋白質溶解度隨溫度的上升而增加。,Ion exchange chromatography,R+A-+B-R+B-+A-,Gel filtration chromatography,Gel filtration chromatography,V0:void volumeVe:elution volume,Affinity chromatography,fusion protein:6-histidine tag,Dialysis,Cellophanenitrocellulosecollodion,