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1、中草药抗鸽毛滴虫的功效研究开题报告,报告人:何胡兰 生命科学系07级01班指导教师:杨海博士,一、选题的目的、意义及国内外研究动态:,1.选题的目的:找到一味或几味治疗鸽子毛滴虫病的较好的中草药,通过实验验证其疗效,为新药品的开发提供理论依据。,目前,治疗毛滴虫病的药物大部分是硝唑类药物,这类药品在大量的动物临床实验中发现有致畸和致癌的副作用。若长期使用硝唑类药物或对其使用不当,很容易对动物造成不利的影响,甚至导致动物的死亡。此外,由于长期使用甲硝唑类和二甲硝类药物,许多种类的禽毛滴虫对这些药物产生了抗药性。本课题拟对抗鸽毛滴虫的中草药进行筛选及研究,为更好地治疗鸽毛滴虫病奠定理论基础,提供一
2、定的实践依据。,此课题中我们采用植物分类的方法进行研究,能够为今后的研究者提供一条可行的方法,还能为日后更进一步的研究奠定基础。同时本项目还可以为进行人类阴道毛滴虫病研究的科研人员提供一定的理论依据,具有一定的实用价值和较高的研究意义。,中草药的药性温和,不易产生副作用,对提高毛滴虫病的治愈力,降低药物成本具有重要的药用价值和实际意义。通过本项目的研究,可以找到一味或几味治疗鸽毛滴虫病的中草药,从而降低鸽子养殖户的成本,提高产量。,2.选题的意义:,3.国内外现状分析:,1836年Donn首次描述了毛滴虫的特征,但直到20世纪才真正开始对它的研究。20世纪80年代免疫和分子生物学技术的发展为研
3、究滴虫致病机制及免疫学特性提供了可能,但这仅仅是个开始7。1986年,两王氏(Wang AL和Wang CC)发现一种经初步研究确认它是一个原虫病毒的物质,并命名为毛滴虫病毒1。,鸽毛滴虫隶属于肉足鞭毛门(Phylum Sarcomastigop-hora)动鞭纲(Class Zoomastigophorea)毛滴虫科(Trich-omonadidae)的禽毛滴虫(Trichmonasgallinae)2。鸽毛滴虫病是由鸽毛滴虫引起的一种侵害消化道上段的原虫病,其特征是在口腔、食道、嗉囊、前胃出现坏死性溃疡,常常造成上消化道和呼吸道阻塞,妨碍进食及正常呼吸,引起其食欲差,精神不振,消瘦,生长发
4、育缓慢,进而引起饥饿造成宿主死亡2、3。而鸽滴虫病在鸽群中普遍存在,极易传播,如幼鸽能从父母鸽那里直接通过喂食受到感染,或接触到有病虫的鸽子分泌物感染等。目前世界各地均有鸽患病的报道,毛滴虫首先感染鸽的上消化道,引起其溃疡,然后从溃疡处进入循环系统,引起肝脏等重要器官的病变4。,为了减少鸽子养殖户的损失,帮助增产,研究人员大量开发其防治的药品,而目前市场上大部分治疗鸽毛滴虫病的药品是灭滴灵(甲硝咪唑),该药口服后可出现于口腔、食道、嗉囊、前胃、生殖道等毛滴虫可能寄生的地方,故对鸽毛滴虫感染有良好疗效。通常采用2g一剂疗法5。常见的甲硝唑海绵栓和普通灭滴灵栓对体外阴道毛滴虫有明显的杀伤作用,随药
5、物浓度加大、作用时间延长,虫体死亡率增高,但是同一药物浓度、同一作用时间,甲硝唑海绵栓组虫体死亡率明显高于灵栓组6。但该药品毒性及副作用较大,如长期使用可能造成食欲不振、呕吐、恶心、黑尿、腹泻、白细胞减少等不利影响,甚至还可以致癌7。为了减低甲硝唑的用量,方菁等8以小白鼠为试验动物,作阴道毛滴虫感染的动物模型,对阴道栓剂抗鼠体内阴道毛滴虫疗效进行了研究,结果栓剂治疗组滴虫清除率为50%和90%时,其剂量低于甲硝唑原粉治疗剂量,两者比较具有显著性差异,而栓剂中杀淋球菌药环丙沙星原粉单独使用不能杀灭阴道毛滴虫。可见,甲硝唑与环丙沙星配伍使用产生了一定的协同作用,减少了甲硝唑原粉的用量。除此之外还有
6、其他的药品如:Carnidazole、甲硝哒唑、塞克硝唑、塞克硝唑/罗硝唑二合一、罗硝唑、二甲硝哒唑、替甲硝唑等西药制品对治疗此病有效果。但这类药品不宜长期使用,主要原因是毛滴虫对它极易产生抗药性。,为了在它产生抗药性之前找到有效的方法治疗鸽毛滴虫病,在1963年时,就有人提出了生态疗法,虽然生态疗法已在纠正消化道菌群失调方面取得显著的效果,但把生态疗法运用到治疗禽毛滴虫还没有做过更多研究。且此项研究进展缓慢,所需的工艺较多,成本相应较高9。因此对鸽毛滴虫分子生物学方面的研究,充分利用现代分子生物学技术开展鸽毛滴虫的生理、生化,特别是安全有效的中草药药方的研究是今后的一个重要研究方向。,时间已
7、经过了很久,但在其他各方面的研究突破并不明显。基于对国内环境和研究条件的考虑,许多研发人员将目标转向中草药。我国是中草药大国,早在2000多年前就有神龙尝百草之说,之后又陆续出现了扁鹊、华佗等著名的医生,他们为后代留下不少经典中草药方面的著作。这为我们更好的研究奠定了夯实的基础。目前就有许多研发人员研究中草药治疗毛滴虫病的药方并取得了一定的成绩。如刘善庭等12观察了S951(一种中草药)的疗效与甲硝唑比差异无显著性。邵素霞等13证明花叶总丹宁对阴道毛滴虫有很强的杀灭作用,其杀灭滴虫的速度比甲硝唑快数倍。吴杰等14证明雀石蕊(一种地衣类植物)在试管内有杀滴虫的作用。刘永春等15体外试验证明常山、
8、花椒、仙鹤草、白头翁、青蒿、苦参、黄柏和蛇床子对滴虫有杀灭和抑制作用,其中前5种效果较好。花椒、常山、白头翁、青蒿两种复方药效果较好,可用于滴虫性阴道炎的局部治疗,治愈率达90%。许红霞等16证明高浓度(1:1)仙鹤草在体外有杀虫作用,12h可杀灭全部滴虫,当药液稀释浓度大于1:2时,对滴虫有抑制作用,但24h仍不能完全杀灭滴虫,提示高浓度仙鹤草煎剂可用于滴虫性阴道炎的局部治疗。范秀淑等17用山药、芡实,辅以黄柏、车前子、白果仁内服,百部、苦参、银花外用,治疗滴虫性阴道炎68例,治愈率为92.65%,总有效率为100%疗效显著。,目前研究人员已发现有近100种中草药对毛滴虫有抑制或杀灭的作用,
9、有些中草药虽作用不及部分西药,但我国资源丰富,价格低廉,属纯天然,无明显毒副作用,总而言之相对于用硝唑类药品治愈后产生的副作用要好。且目前所知的中草药是否全部有效还需要进行精确地实验进行证明。由于治疗禽毛滴虫的中草药的研究起步不久,所以还未将其进行系统的分类及研究,本课题的研究正好完善了该系统,为以后的研究提供了理论依据和现实的参考。,毛滴虫是禽类养殖过程中一种常见的疾病,对禽类养殖造成很大的损失。本项目主要从抗鸽毛滴虫的中草药入手,用所学的知识找出新的能较好抑制或消灭毛滴虫的中草药,为医药的研发提供新的依据。1.通过已有的报道和已学植物学的知识找到与已有抗鸽毛滴虫的中草药同科、同属的植物进行
10、药性分析,从而找出可能的新药。对市场已有的抗毛滴虫中草药进行系统分类。初步确定符合条件的中草药类型。,二、主要研究内容、创新之处:,主要研究内容:,2.在找出可能的新药中,进行体内和体外抗虫实验,找出可以治疗毛滴虫病的中草药并进行比较分析,得出治疗此病的最佳单剂或复方。对鸽子进行体内毛滴虫的诱导。将鸽子体内毛滴虫进行体外活体培养。选定好的中草药进行体外实验,得出杀虫效果较好的3-5味中草药。将得到的3-5味药进行鸽子体内实验,比较其在禽类的治疗效果。最终选出效果最好的药品。,1.利用植物分类学知识将所研究的药品进行系统的归类,相对于其他研究方法而言,该课题采取了较新颖的研究方法。2.同时从鸽体
11、内和体外两方面进行考虑,而其他有关这方面的研究只从单方面进行,本项目在范围考虑上较全面,此乃该课题的又一大特色。,创新之处:,本次课题采取的方法有:植物分类法、对比实验法、实验分析法、数据统计法等。,三、研究方法、设计方案或论文提纲:,研究方法:,0.前言1.毛滴虫的知识及其研究综述2.目前市场上已有的中草药在治疗鸽毛滴虫病方面的 应用3.实验验证筛选出的几味中草药在鸽子体内体外分别进行的实验4.所选中草药在治疗鸽毛滴虫病的效果分析5.参考文献,论文提纲:,2010年12月-2011年1月:对目前市场已有的中草药进行资料的整理,归类(包括植物的科、属,药性等)。找出同科、同属并有相似类型的中草
12、药,并整理。2011年1月-2011年2月:对已找出的药品进行理论分析,确定其可行性。2011年2月-2011年4月:选出几味药进行体内外的实验,对其疗效进行分析。2011年4月-2011年5月:整理数据、分析。2011年5月:撰写论文,反复修订,定稿,答辩。,四、完成期限和预期进度:,1 赵月平,张西臣,刘晓峰,宫鹏涛.阴道毛滴虫病毒研究进展*,中国病原生物学杂志J.2008;5(3):396-397.2 肖建春,伦照荣.毛滴虫氢化酶体的起源、功能与生物学特性的研究进展,中国寄生虫与寄生虫病杂志J.2005;5.3 罗锋,陈泽华,苏遂琴等.鸽毛滴虫病的研究进展,中国兽医寄生虫病J.1998;
13、3.4 郭宝珠,张富夏,王慧云等.蚯蚓提取物体外杀精及抗阴道毛滴虫作用的实验研究,中医药研究.1997;13(4):39-40.5 金有豫.药理学(第5版)M.北京:人民卫生出版社,2001.6 刘爱芹,孙秀琴,舒晶,等.两种剂型甲硝唑对体外阴道毛滴虫杀伤作用比较研究J.哈尔滨医科大学学报,1995,29(1):13-14.,五、主要参考资料:,7 RC康拉迢,怎样更好的治疗鸽子毛滴虫病,RCConrsdie.Pigeon ClinicJ.环球赛鸽科技.55-56.8 方菁,吴少廷,冯友仁,等.阴道栓剂治疗阴道毛滴虫感染小白鼠的实验研究J.寄生虫与医学昆虫学报,1995,2(1):6-8.9
14、张秀昌,陈瑞华,姬宏宇.阴道毛滴虫的生态疗法探讨,张家口医学院学报.1997;14,(5):90-91.10 朱晓燕,谢辉,王雅静.阴道毛滴虫铁氧还原蛋白与甲硝唑抵抗的研究进展,四川动物J.2007;26,(3):721.11 石小玲.中医治疗滴虫性阴道炎近况,甘肃中医.2003(07).12 刘善庭,李秀英,李建美,等.S951抗阴道毛滴虫效果的实验观察J.中国寄生虫病防治杂志,1997,10(1):37-38.,12 刘善庭,李秀英,李建美,等.S951抗阴道毛滴虫效果的实验观察J.中国寄生虫病防治杂志,1997,10(1):37-38.13 邵素霞,刘延泽.花叶总丹宁对阴道毛滴虫及淋球菌
15、的杀灭作用研究J.中国寄生虫病防治杂志,1998,11(1):79-80.14 吴杰,张敏如,丁东宁,等.雀石蕊体外杀阴道毛滴虫作用J.中国原生虫学与原生虫病杂志,1995,13(2):126-129.15 刘永春,郭永和,秦剑.中草药体外抗阴道毛滴虫试验及临床应用研究J.中国寄生虫病防治杂志,2001,14(4):277-279.16 许红霞,任慧青.仙鹤草体外杀灭阴道毛滴虫的试验研究J.中国寄生虫病防治杂志,1998,11(4):355.17 范秀淑,吴彩霞,王建辉.中药内服外洗治疗滴虫性阴道炎68例J.宁夏医学杂志,2001,23(3):183.18 万红娇,马佩莲,马明良,罗洁.二十种中草药体外阴道毛滴虫作用的研究,中国中医药科技.1998;5,(4):218-219.,