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1、菊花的组织培养,2、植物组织培养的应用：,（二）植物组织培养,植物组织培养,现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。,（一）细胞的全能性,1、定义：,生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。,2、原理：,生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。,3、差异：,（1）受精卵的全能性最高,4、潜在全能性的原因：,基因的选择性表达,（2）受精卵分化后的细胞中，体细胞的 全能性比生殖细胞的低。,5、例题辨析：
2、,例1、下列有关细胞全能性的含义，正确的是：,A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能,B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能,C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能,D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程,正确答案：,C,例2、在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：,正确答案：,A、细胞丧失了全能性,B、基因的表达有选择性,C、不同的细胞内基因不完全相同,B,科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程
3、，就是植物组织培养。,（二）植物组织培养,1、植物组织培养过程：,离体的植物器官、组织、细胞,愈伤组织,根 芽,植物体,脱分化,再分化,外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段,2、影响植物组织培养的因素,营养：矿质元素：大量元素，微量元素,植物激素：细胞分裂素，生长素,环境条件：适宜光照、温度、PH,外因,内因：,植物种类，同一种植物材料的年龄、保存时间的长短，,有机物：蔗糖、氨基酸等,2、影响植物组织培养的因素,激素的影响植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果,按照不同的顺序使用这两类激素，会
4、得到不同的实验结果。,当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。,一、制备MS固体培养基,1、配制各种母液。配制母液时，大量元素浓缩_，微量元素浓缩 _。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。,实验操作过程,10倍,100倍,2、配制培养基。配制1LMS培养基时，先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖30g,取配制好的母液，依次加入，然后定容至1000mL。调节pH值，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装50或100mL3、灭菌。高压蒸汽灭菌,
5、二、外植体消毒,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上,三、接种,接种前，用体积分数70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼烧灭菌。将外植体插入培养基中应注意方向，不要倒插，每瓶接种6-8块外植体。,四、培养,接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期消毒，温度控制在18-22，并且每天用日光灯光照12h,五、移栽,移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日，然后用清水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中,六、栽培,每
6、天要观察记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花,此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养,在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程,1、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？,2、培养过程中为什么需要进行光照,思 考,？,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,3、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,课题延伸,一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。,3、例题辨析：,例1、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：,正确答案：,C,例2、下列不能作为植物组织培养的材料是：,正确答案：,D,练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。,谢 谢!,
