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1、2024风疹病毒的检测及临床意义风疹病毒(rubellaVirUS)是披膜病毒科(TogaViridae)、风疹病毒属(RUbiVirUS)中的唯一成员,是风疹(又名德国麻疹)的病原体,1962年首次分离成功。风疹病毒经呼吸道传播,人是病毒唯一的自然宿主。生物学形状风疹病毒呈不规则球形,有包膜单股正链的RNA病毒,病毒直径为50-70nm,病毒核酸为+ssRNA,全长9762bp,20面体对称核衣壳,表面有双层包膜,包膜上有包膜糖蛋白E1和E2构成的短刺突,E1具有血凝素活性,能凝集多种动物红细胞,并可刺激机体产生中和抗体,是风疹病毒的主要抗原;E2也能刺激机体产生中和抗体,但抗原性较弱。风疹
2、病毒只有一个血清型,与披膜病毒科的其他病毒无抗原交叉。根据WHO最新的风疹病毒命名标准,目前分为两个大的分支(Cladel和Clade2)、共12个基因型。风疹病毒可在多种细胞中增殖,但许多细胞感染后不出现明显的细胞病变效应(CPE)。但对免肾传代细胞敏感,易出现CPE,通常用于分离该病毒。此外,Vero细胞也常用于风疹病毒培养。风疹病毒对热、脂溶剂和紫外线敏感。56。C加热30min大部分失活,而在-70。C可保存活力2年以上,干燥冰冻下可长期保存。微生物学检验1 .标本采集与处理发病早期采取风疹患者的咽拭子、皮疹液、尿液;胎儿羊水、绒毛膜;先天性风疹综合征患儿的尿、咽拭子、鼻咽吸出物、血/
3、淋巴细胞、脑脊液及死亡婴儿的各种脏器。检测抗体需采集双份血清。2 .分离培养与鉴定将标本经过处理后接种于VeroBHK21RK13等细胞。风疹病毒CPE进展缓慢日较难分辨,常需盲传12代后出现细胞圆化、稍胀大,胞内颗粒增加。出现CPE后收集病毒,中和试验、血凝抑制试验或免疫荧光法进行病毒鉴定。3 .抗体检测用化学发光免疫分析法、ELISA检测患者血液标本(出疹后28天内采集)中的特异性IgM抗体进行早期诊断,也可检测孕22周后的胎儿羊水中或脐带血中IgM抗体用于产前诊断;或通过检测双份血清中病毒特异性IgG抗体,当抗体滴度升高不少于4倍时可辅助诊断。CRS患儿一般出生时血清中就有抗风疹病毒Ig
4、M抗体和从母体获得的IgG抗体。4 .核酸检测用RT-PCR和核酸杂交技术直接检测病毒核酸,必要时进行核酸测序5 .抗原检测用免疫荧光法检测胎儿羊水或绒毛膜中的病毒抗原可以进行产前诊断。临床意义风疹又称德国麻疹或三日疹,是病毒性出疹的感染性疾病,人是风疹病毒唯一的自然宿主。风疹病毒经呼吸道传播,人群普遍易感,但25%不出现症状,以儿童风疹最为常见。在儿童及青少年中通常为亚临床或轻微表现通常在2周左右的潜伏期后,出现发热和轻微的麻疹样皮疹,伴耳后和枕下淋巴结肿大等症状,患者症状一般较轻,不需特殊治疗。成人感染风疹病毒时一般症状较重,除出疹外,还可以有关节炎和关节疼痛、血小板减少、出疹后脑炎等。风
5、疹病毒感染最严重的危害是妊娠期感染,尤其是在孕期前18周内感染风疹病毒对胎儿危害最大。通过垂直传播引起胎儿先天性感染,可造成流产或死胎、胚胎体积变小、器官发育不全称为先天性风疹综合征(congenitalrubellasyndromezCRS)胎儿出生后即发现先天性心脏病、先天性耳聋、白内障等畸形,以及黄疸性肝炎、肺炎、脑膜脑炎等临床表现。早期检测风疹病毒感染相当重要。目前常用的方法是血清学试验如ELISA法等检测血清中特异性IgM和IgG抗体。初次感染风疹的患者IgG和IgM抗体的出现与临床症状和体征的出现相关。IgM抗体在症状和体征出现后几天即可检测到,71Od达到峰值。在之后的四五周,这
6、些抗体的浓度迅速下降,直至临床上检测不到的水平。而在之后的721d,IgG抗体迅速生成,然后保持稳定或逐渐下降。被动免疫的IgG的半衰期约为1个月,因此人出生后的头35个月总体IgG水平下降,之后,婴儿开始产生自己的IgGJgG水平就又会升局Jo患者血样中出现IgM抗体说明最近感染过风疹病毒,在多数情况下,感染就发生在上个月。与出生后感染风疹的患者相比,受感染的婴儿可持续数月产生特异性IgM抗体,后者成为此期间的主要抗体。建议同时检测新生儿及其母亲的血样。新生儿血清中出现IgM抗体才能考虑为胎传感染。另外,如果婴儿的确是胎传感染,则其IgM与IgG抗体水平会持续或升高;若抗体来自母亲,其抗体水平的下降会与其半衰期相一致。检测不到风疹病毒IgM抗体并不能排除最近或目前的风疹病毒感染,应在57d后再次采样,重新测定。对免疫抑制患者的ELISA结果必须慎重解释。另外,某些抗核抗体会导致假阳性反应。育龄妇女及学龄前儿童应接种风疹疫苗。一般感染一次后能获得终身免疫,约95%以上的正常人血清中具有保护性抗体,孕妇血清中抗体可以保护胎儿免受风疹病毒感染。但也并非所有IgG抗体均可维持终身成为保护性抗体。血液中风疹病毒IgG抗体检测是目前多数医院开展的优生优育检测项目,抗体阴性者最好选择重新接种风疹疫苗。