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1、生药学实验,中药鉴定教研室 刘薇,中药鉴定常用实验技术、大黄的鉴定,实验一,内容提要 显微镜的使用 粉末制片法 组织简图、粉末图的绘制法 实验报告的格式 大黄的鉴定,目的要求： 掌握粉末制片方法；掌握大黄的组织、粉末鉴别特征和理化鉴别方法。 熟悉生物显微镜使用方法、显微作图方法及实验报告的书写格式。,一、显微镜的使用,显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。,照明系统：包括光源和聚光器。光学放大系统：由物镜和目镜组成， 是显微镜的主体。机械装置：用于固定材料和观察方便， 包括载物台、推动器、
2、调节 器和物镜转换器等。,普通生物显微镜,光学显微镜的构造：,使用显微镜的操作步骤及注意点,观察前的准备工作正确拿放显微镜 检查各部件是否完整和正常 对各部件进行必要的清洁。低倍镜的操作方法 调视野（对光） 装片 调节焦距 （粗调节轮找到物象，细调节轮调节物象清晰）高倍镜的操作方法 低倍镜下选择物像，移至视野中心，换转高倍镜，转动细调节轮使物象清晰。 （若高、低倍镜视野中心不重合，需进行校正。）光源的调节调节反光镜（或直接调节光线的明暗） 、升降聚光器 、调节光栅等。注意事项养成双眼观察的习惯；观察标本先低倍后高倍；保持显微镜干燥、清洁。,瞳距调节,屈光调节,二、粉末制片法,粉末的制备 方法：
3、粉碎 过筛 混合均匀备用细度：中药材通过药典45号筛（孔径0.170.25mm） 中成药通过药典6号筛（孔径0.15mm）要求：样品具有代表性；全部过筛；混合均匀。粉末制片一般装片：取粉末少许，用蒸馏水或甘油醋酸试液装片。可观察细胞中的不溶性物质如淀粉粒、脂肪油滴、色素颗粒等。凡含淀粉粒的粉末进行鉴定时，必须先按此法进行装片。水合氯醛处理装片：取粉末少许 ，用水合氯醛试液反复加热处理，然后滴加稀甘油封片。水合氯醛试液可除去细胞中的淀粉，油脂等，增加细胞壁的折光率，还能使萎缩的细胞壁膨胀，从而使细胞的形态更加清晰。,粉末制片是鉴定中药材最常用的方法之一，简便快速，主要鉴别细胞的形态特征。,三、显
4、微图的绘制,目的：补充文字记述的不足,显微摄影：准确真实，但需设备，且主次不分、视野有限， 使用局限。显微绘图：突出主要鉴别特征，可将所有特征集中表示，表 达清晰，易于记忆。,组织简图的绘制,组织简图是用来表示在低倍镜下所见各种组织和某些特征的位置、分布情况和比例关系的组织构造图。用各种不同的符号代替各种组织和某些特征。观察简图能清晰地了解该器官组织构造的全貌。,绘制组织简图的一般原则：一切结构均用线条来表示。所有结构线条不能用尺或其他圆规或曲线板等工具代画，必须徒手作图，以表示生物的自然形态。显示立体结构可用透视线条来表示。各部位应先画出引线再注文字。图下需注明图的名称、部位和放大倍数。徒手
5、绘图法的步骤：选择最典型的标本或结构。仔细观察各部位的形状、结构和之间的比例关系。用较淡的铅笔(2H) 画出各部位的比例关系和轮廓草图，反复对照修改，再用较浓的铅笔(HB)绘出修改图。画引线，注字。,薄荷(茎)横切面简图 1.表皮 2.厚角组织 3.皮层 4.内皮层 5.形成层 6.髓部 7.木质部 8.韧皮部 9.橙皮苷结晶,粉末图的绘制,粉末图是用来表示高倍镜下所见细胞及内含物的特征的详图。要求细胞的形状、壁的厚薄、纹孔和层纹等都要尽可能的绘清楚、准确，并将显微镜下观察的主要特征按类别画出来。,番泻叶粉末图(1040) 1.表皮细胞及平轴式气孔 2.非腺毛 3.晶鞘纤维 4.草酸钙簇晶,图
6、的注解：在靠近各类组分图的附近标上番号；图下注明图的名称、放大倍数；按图中番号注字，番号下角用缩写符号“.”,四、实验报告的书写格式,实验次数及名称学生姓名 年级及专业 学号 日期一、材料来源二、实验内容（根据所做实验，选好如下内容） 1性状鉴定：注意描述次序，主要鉴别特征或对比主要鉴别特征，文字要精简，重点要突出。 2显微鉴定组织：注意由外到内的观察和描述，各部的比例，结构特征及内含物的情况等。粉末：首先观察记录粉末的颜色、气味，有的还需注意质地。显微镜下需注意各组分的特征，如形状、颜色、大小、多少等，并绘图表示。 3理化鉴定：着重记录反应条件，反应中发生的现象及产生的结果。,五、大黄的鉴定
7、,（一）材料来源：大黄：蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L. 的根及根茎（二）实验内容1.组织（根茎横切面）：注意韧皮部、形成层、木质部的特征，黏液腔的分布，详细观察髓部异型维管束的构造。 韧皮部散有黏液腔，木质部导管稀少，髓部大，其内散生内韧式的异型维管束，射线呈星状射出。薄壁细胞含淀粉粒及大型草酸钙簇晶。2.粉末：黄棕色，气特异。 大型草酸钙簇晶，棱角多短钝。 大型的网纹导管，非木化或微木化（木化染色：间苯三酚 + 盐酸红色）。 众多的淀粉粒，单粒呈圆球形或长圆形，脐点多星状，复粒由27分粒组成。3.理化鉴别（检查蒽醌类成分） 荧光试验：大黄乙醇浸液于滤纸上 45%乙醇扩散 365nm紫外光灯下观察不得显持久亮紫色荧光。 加碱试验：大黄粉末少许 + 加氢氧化钾（钠）试液 紫红色。 微量升华：粉末加热 由低温至高温收集升华物镜检 依次见菱形、针状、羽毛状黄色结晶 加碱溶解并显红色。,作 业,记录大黄的组织、粉末特征，绘制大黄粉末图。记录大黄理化鉴别结果。,
