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1、检 验 科,血 型 的 鉴 定,1,ABO血型系统,2,ABO血型的鉴定,3,Table of Contents,内 容 大 纲,RH血型系统,4,5,RH血型的鉴定,常见疑难血型的鉴定,血型鉴定在生活中的应用,6,ABO血型系统,O型血,O型血是人类最古老的血型 出现于4万-6万年前,A型血,A型血产生于农耕时代 出现于1.7万年-2.7万年前,B型血,B型血产生于游牧民族 出现于公元前1.7万-1.2万年前,AB型血,AB型血 出现不到1000年,血型传说,不具有AB凝集原,同时具有AB凝集原,只有B凝集原,只有A凝集原,凝集原,B型血,A型血,ABO血型系统抗原,O型血,AB型血,ABO
2、血型系统是根据红细胞表面所含的凝集原不同而命名的。 凝集原：附着在红细胞表面的一种抗原。,ABO血型系统抗体,凝集素(抗体)：存在于血清中，与其同名凝集原会发生抗原抗体反应，导致红细胞凝集。人血清中含有两类凝集素：即抗A和抗B。属于天然抗体，天然抗体多以IgM型为主，不能通过胎盘，而免疫性抗体多以IgG型为主，能通过胎盘。,ABO血型系统,抗A凝集素,抗B凝集素,同时含有抗A和抗B凝集素,不含有抗A和抗B凝集素,B血型的血清中,A血型的血清中,AB血型的血清中,O血型的血清中,ABO血型系统抗原遗传,显性基因：控制显性性状的基因。 隐性基因：控制隐性性状的基因。,ABO 血型系统的基因位点在第
3、 9 对染色体上。人的 ABO 血型受控于A、B、O三个基因。其中A、B为显性基因，O为隐性基因。,AB型,ABO血型鉴定抗原遗传,O型,B型,A型,思考：A、B、AB以及O型血的基因型分别是什么?,AB,BB,AA,Ao,Bo,oo,遗传规律,ABO血型的鉴定,实验方法：血凝试验(玻片法、试管法、全自动微板法)，微柱凝胶试验，流式细胞技术，酶联免疫吸附试验。,ABO血型的鉴定,实验原理：血型抗原与相应的抗体在反应介质中形成免疫复合物，出现肉眼可见的凝集现象。,ABO血型的鉴定,实验用具：载玻片 胶头滴管 棉签 酒精 抗A、B标准血清 一次性采血针,ABO血型的鉴定,实验过程：,ABO血型的鉴
4、定,实验结果：,RH血型系统,人类血型目前发现有30多种，除了ABO血型系统外，还有Rh血型系统等。Rh血型系统根据有无D抗原分为Rh阳性和Rh阴性。,RH血型系统抗原及抗体,Rh血型系统抗原Rh血型系统能识别的抗原共43种，常见的抗原有五种，分别是D、C、 E、c、e。以D抗原的抗原性最强，故常以其存在与否定为Rh阳性或阴性，即凡含D抗原者为Rh阳性，不含D抗原者为Rh阴性。Rh血型系统抗体天然Rh抗体很少，绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG型免疫性抗体。主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种，其中抗D最为常见。在盐水介质试验系统中可检测出某些Rh抗体，
5、表明这些Rh抗体具有IgM的性质可能来自免疫反应抗体形成早期。,Rh血型的鉴定方法及原理,酶介质法 红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，促进Rh抗原与相应抗体间的结合从而产生红细胞凝集。 聚凝胺试验 聚凝胺是带高价阳离子的季铵盐，溶解后产生的正电荷中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，有利于红细胞凝集。如果是由Rh抗体致敏的红细胞产生的凝集，是特异的不可逆凝集。非抗体致敏红细胞凝集则是可逆性凝集。 盐水介质抗D试验 采用免疫球蛋白变性剂处理人源IgG类抗D血清，使小分子的IgG抗体分子增大成为具有大分子的“Ig
6、M”的性质，能在盐水介质中与相应红细胞发生凝集，可用于Rh血型的快速鉴定。,Rh血型的鉴定方法及原理,抗球蛋白试验 又称Coombs试验，是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。不完全抗体多与其相应的红细胞结合，在盐水介质中不出现凝集反应，Coombs试验利用抗球蛋白抗体作为第2抗体，通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体，使致敏红细胞出现特异性凝集。 低离子强度试验 红细胞外围的阴离子是红细胞的稳定因素之一，降低反应介质的离子强度可减少细胞外围的阴离子，促进带正电荷的IgG型Rh抗体与红细胞结合发生凝集反应，从而增加红细胞的凝集强度。,常见疑难血型,定义：疑难血型是指一种血型难以鉴定或判定的现象
7、。特点：正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+（正常凝集3+4+） 正反定性不一致干扰因素：生理因素(年龄、ABO亚型、先天无抗体、冷凝集素) 临床治疗（大量输液、近期输过异性红细胞或血浆） 实验技术原因（标本混淆、试剂质量问题、静脉输液处采样）分类：红细胞抗原减弱或丢失（ABO亚型、白血病、输异性血、急性大出血） 红细胞额外反应（自身抗体、红细胞未洗涤、红细胞上粘附大量蛋白） 混合凝集（近期输异性血、造血干细胞移植） 血型定型减弱或无反应（年龄、先天性ABO抗体缺失）,常见疑难血型的鉴定,分析思路（三步法）第一步：排除人为因素或在技术上可能发生的操作失误； 重新采集血样，核对试剂、器材，规范地复
8、检ABO血型第二步：了解临床资料，分析可能出现的原因；第三步：排除不可能的原因，归纳不能排除的原因，设计验证试验。举例说明红细胞抗原减弱或丢失(ABO亚型、正定型ABO抗原减弱)红细胞额外反应（自身抗体）,常见疑难血型的鉴定,ABO亚型实验结果：正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱解决方法：加抗-AB、抗-H、抗Bc,常见疑难血型的鉴定,正定型AB抗原减弱实验结果：正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱、正定型呈mf样解决方法：加抗-AB,常见疑难血型的鉴定,自身抗体实验结果：抗-A+,抗-B+,Ac+,Bc+,Oc+,直抗+解决办法：37盐水洗涤红细胞至直抗阴性后鉴定血型。,血型鉴定的应用,血型鉴定在生活中的应用,输血,器官移植,新生儿溶血症,THANKS,谢谢观看,
