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1、前 言本试剂盒采用多色荧光标记、多重PCR复合扩增方法对人基因组DNA中STR位点的多态性进行检测，通过分析扩增结果来确定血样、精斑、牙齿、骨骼、毛发、唾液等生物检材的基因型。AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒可以进行11个DNA位点（10个STR位点和1个性别位点）的同步扩增并利用四色荧光技术进行检测。本试剂盒包含的DNA位点有Amelogenin 、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、D8S1179、D21S11、D18S51、vWA、D5S818、FGA。试剂盒规格本试剂盒可供200次样品实验。试剂盒组成扩增前试剂盒Reaction Mix1000l 2支
2、含PCR缓冲液、MgCl2和dNTPsPrimers 10+11000l 1支含11个位点的11对引物热启动酶100l 1支5 U/lControl DNA 9947A200l 1支含0.1ng/l 9947A基因组DNA sdH2O1500l1支超纯水扩增后试剂盒10+1Allelic Ladder50l 1支含11个位点的等位基因（见附表）AGCU MarkerROX-450250l 1支荧光分子量内标实验所需主要仪器设备PCR扩增仪、ABI遗传分析仪（310、3100、3130等）、高速离心机、洁净工作台、微量移液器、冰箱、紫外分光光度计、电炉或恒温水浴锅。试剂盒使用方法(试剂使用前请轻
3、微振荡，并短暂离心)1. DNA提取及定量待检样品先用磁珠法或Chelex-100法提取基因组DNA，提取的样品基因组DNA定量在约0.1ng/l0.5 ng/l。2. PCR反应 按如下过程实验：PCR反应体系 基因组DNA模板 10l（含基因组DNA约2ng） Primers 10+1 5l Reaction Mix 10l 热启动酶 0.5l 总体积 25l 每次实验都要求同时做阴性对照和阳性对照PCR循环参数初始变性热循环终延伸保 温9 9511分钟10个循环：94 1分钟，62 1分钟，72 1分钟20个循环：94 1分钟，60 1分钟，72 1分钟60，45分钟4维持3. 电泳检测
4、取2l PCR产物或10+1 Allelic Ladder分别与0.5l AGCU Marker ROX-450和15l去离子甲酰胺混合，95变性5分钟后立即冷却用于电泳检测。（Matrix标准品由FAM、HEX、TAMRA、ROX组成，位点基因分型数据软件由我公司免费提供）附表. 11个DNA位点信息位 点荧光标记10+1 Allelic Ladder中的等位基因9947A基因型AmelogeninFAMX,YX ,XD3S1358FAM12,13,14,15,16,17,18,1914,15D13S317FAM8,9,10,11,12,13,14,1511,11D7S820FAM6,7,8
5、,9,10,11,12,13,14,1510,11D16S539FAM5,6,8,9,10,11,12,13,14,1511,12D8S1179HEX8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,1913,13D21S11HEX24,24.2,25,26,27,28,28.2,29,29.2,30,30.2,31,31.2,32,32.2,33,33.2,34,34.2,35,35.2,36,3730,30D18S51HEX10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,2615,19vWATAMRA11,12,13,14,15
6、,16,17,18,19,20,2117,18D5S818TAMRA7,8,9,10,11,12,13,14,1511,11FGATAMRA18,19,20,21,22,23,24,25,26,26.2,27,28,29,3023,24注意：l 本试剂盒有效期为一年，生产日期及批号见产品包装。l 收到试剂盒后请保存于-20，试剂盒请不要反复冻融。l 建议用量少的用户小管分装后冻存。试剂盒的详细使用说明请查阅AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒用户手册。 AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒产 品 说 明 书生产商：无锡中德美联生物技术有限公司 地 址：无锡市惠山区文惠路18-1号2层 邮 编：214174 电 话：0510-83598210，83598208 传 真：0510-83598211 E-mail：sales
