淋球菌培养及鉴定课件(模板).pptx

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1、什么是淋球菌?,共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛 触酶试验(+) 氧化酶试验(+)不同点:对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合成酶,淋球菌即淋病奈瑟菌,属于奈瑟菌属。,淋球菌形态,淋球菌,是一种革兰阴性双球菌,呈卵圆形或肾形,成对排列,直径约0608m,常位于多形核白细胞的胞浆内,慢性期则在细胞外。生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。,淋球菌形态,致病性,传染方式:成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染 致病物质:菌毛 外膜蛋白PI:中性粒细胞受损 外膜

2、蛋白PII:黏附 外膜蛋白PIII:阻抑抗体活性 IgA1酶:破坏粘膜局部抗体,所致疾病,男性急性淋菌性前尿道炎 女性淋菌性宫颈炎、尿道炎 初生婴儿脓漏眼 发展:男性后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、附睾炎等 女性子宫内膜炎、输卵管炎等 后遗症:不育、不孕、异位妊娠,淋球菌感染,淋病是由奈瑟淋球菌所致的泌尿生殖系统感染。不仅可引起男性尿道炎、女性宫颈或尿道炎,还可经血行播散引起菌血症。临床表现因感染的人群不同,部位不同而有差别,实验室鉴别淋球菌,直接涂片:取尿道或宫颈脓性分泌物涂片,作革兰染色,镜下可见大量多形核白细胞,细胞内可见数量不等的革兰阴性双球菌。涂片对女性检出率低,有假阴性,必要时应作培养

3、。细菌培养:标本在选择性培养基上培养,可出现典型菌落,氧化酶试验阳性,镜检可见到革兰阴性双球菌,还可用检测淋球菌DNA,直接免疫荧光试验协助确诊。,外膜蛋白PII:黏附共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.5或低于30便生长不良。5或低于30便生长不良。目前国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂。国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-

4、Lewis(ML)培养基等。淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。淋球菌药敏试验,测定药物抑菌或杀菌能力,以便准确有效利用药敏进行治疗。涂片对女性检出率低,有假阴性,必要时应作培养。不同点:对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合成酶生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。男性后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、附睾炎等 女性子宫内膜炎、输卵管炎等男性急性淋菌性前尿道炎奈瑟菌属与布兰汉菌属的鉴别国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NY

5、C)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等。淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。后遗症:不育、不孕、异位妊娠可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性),淋球菌培养,淋球菌是淋病的病原菌,为实验室确诊淋病提供依据。(培养法为确诊淋病的金标准)淋球菌药敏试验,测定药物抑菌或杀菌能力,以便准确有效利用药敏进行治疗。,淋球菌培养条件,淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。目前国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂。国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis

6、(ML)培养基等。,T-M培养基,T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌增菌剂,使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌菌落长得较大,在乎皿中几乎呈纯培养,从而大大提高了由子宫颈、尿道,尤其是咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。,淋球菌培养条件,淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。因此,为了保证培养有足够的成功率,取材后应立即接种,标本离体时间越短越好。培养的最适温度为3537,超过38.5或低于30便生长不良。因此,孵育的温度要恒定。淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二

7、氧化碳环境培养。,淋球菌培养关键,取材部位准确女性病人标本:取宫颈内膜分泌物 男性病人标本:取尿道口脓性分泌物培养基预温立即接种最好床边接种合适的培养基CO2培养,淋球菌鉴定,分泌物,直接涂片染色,分离培养,可疑菌落,涂片染色,生化反应,初步报告,生长特性,平板生长特性,经24h48h的培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落,似露水珠,易乳化,直径为0.5mm 1.0mm。,平板生长形态,镜检形态,从菌落上取材作涂片,革兰染色后可见到菌的大小及染色的深度有差异,排列也不一致,呈典型革兰阴性双球菌。,镜检形态,镜检形态,来自泌尿生殖道符合初步鉴定标准的分离株,一般可诊断为淋球菌

8、,准确率达98%。对于菌落形态不典型的分离株,来自咽部、眼睛或其他泌尿生殖道外部位的分离株,应作确诊试验。,男性急性淋菌性前尿道炎淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.氧化酶试验(+)淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.可疑菌落(菌落形态、

9、阴性双球菌、氧化酶阳性)可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)传染方式:成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)淋球菌药敏试验,测定药物抑菌或杀菌能力,以便准确有效利用药敏进行治疗。5g/ml和制霉菌素12.从菌落上取材作涂片,革兰染色后可见到菌的大小及染色的深度有差异,排列也不一致,呈典型革兰阴性双球菌。5或低于30便生长不良。淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。淋球菌即淋病奈瑟菌,属于奈瑟菌属。5g/ml)和淋球菌增菌剂,使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌菌落长得较大,在乎皿中几乎呈纯培养,从而大大提高了由子

10、宫颈、尿道,尤其是咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。经24h48h的培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落,似露水珠,易乳化,直径为0.生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落,鉴定试验,氧化酶试验糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖)30过氧化氢试验,鉴定依据,形态染色典型:革兰阴性球菌培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落生化反应:氧化酶阳性、仅分解葡萄糖(麦芽糖、乳糖、蔗糖、果糖均不分解),奈瑟菌属鉴定,奈瑟菌属与布兰汉菌属的鉴别注意:d:表示不

11、定,分泌物,男性确诊女性(其他标本),直接涂片染色,分泌物培养(巧克力色平板),可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性),涂片染色,生化反应,革兰阴性细胞内双球菌,未见革兰阴性细胞内双球菌,DNA检测,免疫荧光,小结,淋球菌培养条件,淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。目前国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂。国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等。,T-M培养基,T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、

12、粘菌素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌增菌剂,使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌菌落长得较大,在乎皿中几乎呈纯培养,从而大大提高了由子宫颈、尿道,尤其是咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。,淋球菌培养条件,淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。因此,为了保证培养有足够的成功率,取材后应立即接种,标本离体时间越短越好。培养的最适温度为3537,超过38.5或低于30便生长不良。因此,孵育的温度要恒定。淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。,淋球菌培养关键,取材部位准确女性病人标本:取宫颈内膜分泌物 男性病人标本:取尿道口脓性分泌物培养基预

13、温立即接种最好床边接种合适的培养基CO2培养,镜检形态,5或低于30便生长不良。可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛传染方式:成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染奈瑟菌属与布兰汉菌属的鉴别共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛后遗症:不育、不孕、异位妊娠5或低于30便生长不良。生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml

14、、粘菌素7.还可用检测淋球菌DNA,直接免疫荧光试验协助确诊。共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛男性急性淋菌性前尿道炎可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。经24h48h的培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落,似露水珠,易乳化,直径为0.淋球菌,是一种革兰阴性双球菌,呈卵圆形或肾形,成对排列,直径约0608m,常位于多形核白细胞的胞浆内,慢性期则在细胞外。淋球菌即淋病奈瑟菌,属于奈瑟菌属。经24h48h的培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落,似露水珠,易乳化,直径为0.5

15、g/ml和制霉菌素12.因此,孵育的温度要恒定。,生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。5g/ml和制霉菌素12.5g/ml和制霉菌素12.生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。从菌落上取材作涂片,革兰染色后可见到菌的大小及染色的深度有差异,排列也不一致,呈典型革兰阴性双球菌。男性后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、附睾炎等 女性子宫内膜炎、输卵管炎等5或低于30便生长不良。淋球菌对外环境

16、变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.男性确诊女性(其他标本)5g/ml)和淋球菌增菌剂,使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌菌落长得较大,在乎皿中几乎呈纯培养,从而大大提高了由子宫颈、尿道,尤其是咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。男性急性淋菌性前尿道炎T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.

17、淋球菌,是一种革兰阴性双球菌,呈卵圆形或肾形,成对排列,直径约0608m,常位于多形核白细胞的胞浆内,慢性期则在细胞外。涂片对女性检出率低,有假阴性,必要时应作培养。淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等。外膜蛋白PI:中性粒细胞受损淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。,淋球菌即淋病奈瑟菌,属于奈瑟菌属。传染方式:成

18、人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)生长适宜温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛5g/ml和制霉菌素12.来自泌尿生殖道符合初步鉴定标准的分离株,一般可诊断为淋球菌,准确率达98%。男性确诊女性(其他标本)生长适宜

19、温度为3738,淋菌不耐热,干燥环境存活12小时,555分钟立即死亡,附着在衣裤和卧具上的淋菌最多只能生存24小时,一般消毒剂易将其杀死。淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。5或低于30便生长不良。可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)男性确诊女性(其他标本)共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛还可用检测淋球菌DNA,直接免疫荧光试验协助确诊。国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等。共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无

20、芽孢、无鞭毛、有菌毛涂片对女性检出率低,有假阴性,必要时应作培养。,因此,为了保证培养有足够的成功率,取材后应立即接种,标本离体时间越短越好。共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛淋球菌是淋病的病原菌,为实验室确诊淋病提供依据。直接涂片:取尿道或宫颈脓性分泌物涂片,作革兰染色,镜下可见大量多形核白细胞,细胞内可见数量不等的革兰阴性双球菌。男性确诊女性(其他标本)淋球菌即淋病奈瑟菌,属于奈瑟菌属。淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛共同点:革兰阴性球菌、单

21、个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛涂片对女性检出率低,有假阴性,必要时应作培养。细菌培养:标本在选择性培养基上培养,可出现典型菌落,氧化酶试验阳性,镜检可见到革兰阴性双球菌,T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.细菌培养:标本在选择性培养基上培养,可出现典型菌落,氧化酶试验阳性,镜检可见到革兰阴性双球菌,可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性)传染方式:成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染传染方式:成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染细菌培养:标本在选择性培养基上培养,可出现典型菌落,氧化酶试验阳性,镜检可见到革兰阴性双球菌,还可用检测淋球菌DNA,直接免疫荧光试验协助确诊。传染方式:成人 性接触 初生婴儿 患病母亲产道感染可疑菌落(菌落形态、阴性双球菌、氧化酶阳性),鉴定试验,氧化酶试验糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖)30过氧化氢试验,

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