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1、,Loading,蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）,【2017衡水三模】利用PCR技术扩增目的基因的前提是：有一段.（什么）基因的核苷酸序列农杆菌可用来将基因表达载体导入受体细胞，从分子角度分析，其具有特点是：其TI质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体DNA上构建.（什么）基因表达载体时没有设计标记基因，其可能的原因是：无标记基因表达产物，有利于食品安全,【2017广州二模】A 基因上碱基排列顺序是如何决定
2、阿黑皮素原的氨基酸顺序的？按碱基互补配对原则，以A基因的一条链为模板经转录合成相应mRNA，在翻译过程中，mRNA上3个相邻碱基组成一个密码子决定一个氨基酸.PCR技术:高温变性：在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA，作为PCR扩增的模板。退火复性：使DNA解链，使引物与模板链相应序列互补结合。延伸：在Taq酶的作用下，从引物的5端3端延伸，合成与模板互补的DNA链,【模拟卷】基因治疗的思想：将正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能。【练兵三】调查该退耕地植物不同物种的分层，可获得群落的垂直结构。群落具有这样特征的意义：一是提高了对阳光等环境资源的利用能力二是为动物创造了栖息空间和食
3、物条件,【2017揭阳一模】将种子的胚划伤,简称划胚。请说出农杆菌将bar基因导入划胚细胞的过程。伤口处的胚细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，使bar基因随Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【16高考1卷】胞吞胞吐共同点：1.运输过程中形成囊泡2.需要消耗能量3.能运输生物大分子,【2017.揭阳学业】与白细胞相比较，红细胞在分化过程中，细胞结构发生什么独特的变化，以适应其运输氧气的功能？1.合成丰富的血红蛋白（可携带更多的氧气）；2.细胞体积小，相对表面积大（有利于提高气体交换效率）；3.无细胞核（易于变形通过狭小的毛细血管）；4.无细胞器（减少耗氧，为血红蛋白的合成腾出空间）；
4、5.细胞呈双凹圆饼形，增大了与环境的接触面积。,【2017.揭阳学业】在毛细血管壁细胞的核糖体上合成P选择蛋白的过程中，mRNA上的碱基序列是如何翻译为P选择蛋白的氨基酸序列的？mRNA上的密码子与携带特定氨基酸的转运RNA上的反密码子互补配对生物学观点：1.结构与功能相适应2.生物与环境相适应3.局部与整体相统一4.生命活动的相对统一,哈代温伯格定律的五个条件：1.种群足够大2.个体之间随机交配3.没有突变产生4.没有个体迁入迁出5.没有自然选择“激素”特点：微量高效通过体液运输只作用于靶细胞和靶器官,免疫系统功能：防卫 监控 清除二次免疫特点：速度快产生抗体多持续时间长,高中生物常见易错点
5、：1.秋水仙素作用于萌发的种子或幼苗（未作用的部位，如根部仍为二倍体）；秋水仙素的作用原理：有丝分裂前期抑制纺锤体的形成；秋水仙素能抑制植物细胞纺锤体的形成，对动物细胞无效。秋水仙素是生物碱，不是植物激素。2.遗传病患者不一定含有致病基因，如21三体综合征患者（染色体异常遗传病）3.细胞膜上的蛋白质有糖蛋白（识别功能，如受体、MHC等），载体蛋白，水通道蛋白等。4.没有纺锤丝的牵拉着丝点也会断裂，纺锤丝的作用是使姐妹染色单体均分到两极。故“秋水仙素抑制着丝点断裂”是错的,5.光合作用常用术语：黑暗中CO2释放量呼吸速率光照条件下CO2吸收量净光合速率固定CO2的量总光合速率6.卵细胞属于高度分
6、化的细胞，但全能性较大、无细胞周期7.哺乳动物无氧呼吸产生乳酸，不产生二氧化碳；酵母菌兼性厌氧型能进行有氧呼吸和无氧呼吸。植物无氧呼吸一般产生酒精、二氧化碳特例：马铃薯的块茎、玉米的胚、甜菜的块根,8.产生新物种判断的依据是有没有达到生殖隔离；判断是否为同一物种的依据是能否交配成功并产生可育后代。9.细胞分化的实质是基因的选择性表达，指都是由受精卵分裂过来的细胞，结构、功能不同的细胞中，DNA相同，而转录出的RNA不同，所翻译的蛋白质不同。10.线粒体、叶绿体内的DNA也能转录、翻译产生蛋白质。11.免疫活性物质有：淋巴因子（白细胞介素、干扰素）、抗体、溶菌酶。12.呼吸作用与光合作用均有水生
7、成，均有水参与反应,13.语言中枢位于大脑皮层小脑,有协调运动的作用;呼吸中枢位于脑干。下丘脑为血糖，体温，渗透压调节中枢。下丘既是神经器官，又是内分泌器官。14.基因重组只发生在减数分裂过程和基因工程中。（三倍体、病毒、细菌等不能基因重组）15.双缩脲试剂不能检测蛋白酶活性，因为蛋白酶本身也是蛋白质。16.洋葱表皮细胞不能进行有丝分裂，必须是连续分裂的细胞才有细胞周期。17.抗生素（如青霉素、四环素）只对细菌起作用（抑制细菌细胞壁形成），不能对病毒起作用。,18.浆细胞是唯一不能识别抗原的免疫细胞。吞噬细胞能识别抗原、但不能特异性识别抗原。19.免疫异常有三种：过敏反应、自身免疫病、免疫缺陷
8、病。20.建立生态农业（桑基鱼塘），能提高能量的利用率，而不是提高能量传递效率。人工生态系统（农田、城市）中人的作用非常关键。21.血红蛋白不属于内环境成分，存在于红细胞内部，血浆蛋白属于内环境成分。22.基因工程中CaCl2能增大细菌细胞壁通透性，对植物细胞壁无效。,专题1 基因工程（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：产生黏性末端和平末端。,2.“分子缝合针”DNA连接酶(1)
9、两种DNA连接酶（EcoliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）相同点：都缝合磷酸二酯键。区别：EcoliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2)DNA连接酶与DNA聚合酶作用的区别：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。,3.“分子运输车”载体（1）载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存。具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常
10、用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒,(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用 方法有反转录法和化学合成法。3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至9095DNA解链；第二步：冷却到5560，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至7075，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。,第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基
11、因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2.组成：目的基因启动子终止子标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。,第三步：将目的基因导入受体细胞1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：农杆菌
12、转化法 基因枪法 花粉管通道法将目的基因导入动物细胞：显微注射技术（此方法的受体细胞多是 受精卵）将目的基因导入微生物细胞：Ca2+处理法原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是 大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca2+处理细胞，使其成为 感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。,第四步：目的基因的检测和表达1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 D
13、NA分子杂交技术。2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3.最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原抗体杂交。4.有时还需进行 个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。,（三）基因工程的应用1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。,（四）蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）,
