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1、,第三章 中药制剂的鉴别,【目的要求】,掌握中药制剂的常用鉴别方法和鉴别依据熟悉中药制剂鉴别工作的基本程序。了解中药制剂鉴别的目的、意义以及在中药制剂质量控制与质量评价中的作用。,思考题,中药制剂的性状应该如何描述?描述的内容有哪些?中药制剂的显微鉴别与单味药材的粉末鉴别有何异同?下列哪些制剂可以使用显微鉴别法?各制剂相关药味显微鉴别特征是什么?六味地黄丸,口炎清颗粒,归芍地黄丸,牛黄解毒片,小建中合剂,七厘散,思考题,中药制剂常用的鉴别方法有哪些?为什么对一个药品的鉴别试验常采用几种鉴别方法?试阐述中药对照品、对照药材和对照提取物在中药制剂鉴别中的作用和意义。影响中药成方薄层色谱行为的主要因
2、素有哪些?如何考察薄层色谱方法的专属性、重现性和耐用性?,基本概念,中药制剂定性鉴别 利用中药制剂中各单味药材的形态、组织学特征及所含化学成分的结构特征、化学反应、光谱特征、色谱特征及某些物理化学常数来鉴别中药制剂各单味药材的真伪及存在与否的分析方法。,第二节 鉴别,中药制剂的鉴别药味的选取原则如下,单味制剂;复方制剂,按照君臣佐使依次选择药味,药味较多时,应首选君、臣药、贵重药、毒药鉴别,处方中每一药味均鉴别,选择尽量多的药味写入质量标准,不少于处方1/3药味。,生物鉴别,鉴 别 方 法,理化鉴别法,显微鉴别法,化学反应法,微量升华法,毛细管电泳法,光谱法,色谱分析法,性状鉴别法,颜色,形态
3、,形状,气味,其他,Cycle name,Add Your Text,第一节 性状鉴别(Description),一、基本内容,主要中药剂型的性状要求 大山楂丸本品为棕红色或褐色的大蜜丸;味酸、甜。三黄片本品为糖衣片,除去糖衣后显棕色,味苦,微涩。小儿化毒散本品为杏黄色至棕黄色的粉末;味苦,有清凉感。正骨水本品为棕红色的澄清液体,气芳香。金刚藤胶囊本品为胶囊剂,内容物为棕黄色或棕褐色的颗粒,气微香,味苦、涩。,第一节 性状鉴别(Description),折光率,旋光度比旋度,熔 点凝 点,相对密度,反映药物的纯净程度,二、物理常数,第一节 性状鉴别(Description),折光率:20,用钠
4、光谱的D线(589.3nm)测定供试品相对于空气的折光率。区 分不同的油类或检查药品的纯杂程度旋光度和比旋度:20,用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度,除另有规定外,测定管长度为1dm。比旋度 为测得的旋光度 L 为测定管长度dm d 为液体的相对密度 区分或检查药品的纯杂程度,或测定含量,例:薄荷油“折光率 应为1.456-1.466(附录VII F)旋光度 取本品,依法测定(附录VII E),旋光度应为-17至-24”,第一节 性状鉴别(Description),相对密度:比重瓶法(液体)韦氏比重秤法(易挥发液体)熔点:毛细管测定法,毛细管法测定熔点,第一节 性状鉴别(Descri
5、ption),鉴别内容 粉末组织、细胞或内含物等生物学特征由药材粉末直接制成的制剂或 添加有部分药材粉末的制剂主要药味化学成分不清楚或尚 无化学鉴别,第二节 显微鉴别(microscopic identification),显微定性鉴别的特点复杂、相互干扰。重现性差根据制剂特点进行预处理。原中药粉末的显微特征,不一定能作该 制剂的鉴别特征。选择各原料药中较具专属性的显微特征作为 鉴别依据。,第二节 显微鉴别,显微定性鉴别的方法 了解制剂处方,制法及可进行显微鉴别的药材品种,对比分析其中各药味的粉末特征。排除交叉干扰,明确专属特征。要求:显微特征在处方中和处方外均具有专属性,第二节 显微鉴别,牛
6、黄解毒片中大黄的显微鉴别,所用器材显微镜:光学显微镜、电子显微镜、扫描电镜等。注意事项 显微特征明显,易查见,否则可能做出假阴性的判定。取样注意代表性。,第二节 显微鉴别,第二节 显微鉴别,一、制片方法1散剂、胶囊剂 取粉末,直接加水或水合氯醛透化装片。2片剂 用刀片直接从药片断面刮取少量粉末或研碎后取少量样品透化装片。3水丸、锭剂 研成粉末后取少量直接透化装片。4蜜丸 由于蜂蜜粘结药材粉末的细胞核组织,难于观察,需去除粘结使解离,方法有:水洗后离心法。,第二节 显微鉴别,一、制片方法5.解离组织制片(1)氢氧化钾法;(2)硝铬酸法;(3)氯酸钾法。,样品中含有木化组织较多或集成较大群束,不易
7、进行观察。,第二节 显微鉴别,若观察细胞内含物形状,应选用不同试剂制片,淀粉粒 水或甘油醋酸试液;糊粉粒 甘油;水溶性内含物 乙醇或水合氯醛试液(不加热),第二节 显微鉴别,(一)根及根茎类 原生木质部;皮层;维管束;石细胞;淀粉粒;草酸钙结晶。,第二节 显微鉴别,(二)茎木类,第二节 显微鉴别,(三)叶类 1表皮 2气孔 3毛茸 注意毛茸的种类。,第二节 显微鉴别,(四)花类 1苞片及花萼 构造类同叶片,表面上可见到气孔及毛茸 2花冠 上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起而无气孔,下表皮细胞常不呈乳头状,细胞壁微波状弯曲。维管束组织细小。,第二节 显微鉴别,3雄蕊 1)花粉囊内壁细胞的壁不均匀地
8、增厚,呈网状、螺旋状、环纹状及点状等;2)花粉粒具圆形、长圆形或多面形等多种形状。通常具内外两层壁,外壁多数具各种雕纹。4雌蕊 柱头的表皮细胞呈乳头状突起,或分化成绒毛状,第二节 显微鉴别,(五)果实类 1果皮细胞的形状、大小。2外果皮上可能有非腺毛及腺毛。3中果皮内的分泌组织 4内果皮石细胞,大小、细胞壁的厚薄,如为镶嵌层,则应注意其排列形式。,有无分泌组织及细胞的内含物。,细胞大小、形状、壁厚、色泽、细胞内含物,-表皮毛的形状、细胞壁的厚薄、是否木化、有无纹理;石细胞形状、大小、色泽散布及细胞壁的增厚情况。栅状细胞及油细胞。,-细胞形状、厚度、内含物。,种皮,内胚乳,外胚乳,子叶,第二节
9、显微鉴别,(七)种子类,第二节 显微鉴别,应用实例 1 牛黄解毒丸显微鉴别 处方:牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草。,2.九分散显微鉴别处方:马钱子粉、麻黄、乳香(制)、没药(制),第二节 显微鉴别,作业:1.六味地黄丸的显微定性鉴别熟地黄;山茱萸;山药;牡丹皮;茯苓;泽泻。,块 根,果 实,根 茎,皮 类,菌 核,根及根茎,作业,2.银翘解毒片:金银花、连翘、薄荷、荆芥、淡豆豉、牛蒡子(制)、桔梗、淡竹叶、甘草 金银花、桔梗以生药粉投料,可显微鉴别3.蛇胆川贝散:蛇胆汁、川贝母。川贝母粉碎成细粉入药,可显微鉴别4.小儿惊风散:全蝎、僵蚕、雄黄、朱砂、甘草。五味药以生药粉投料,均
10、可显微鉴别。,显微化学鉴别法升华法(Sublimation),(一)原理 利用某些成分的升华性,在一定温度下将其从制剂中升华分离出来,并以升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴别的依据。(二)特点 升华法具有简便、实用等特点,由于升华性仅为少数中药化学成分所具有且升华物纯度较高,故该法专属性亦较好。,升华法(Sublimation),对升华物可:在显微镜下观察其晶形。在可见或紫外光下观察其颜色或荧光。加入一定试剂处理后显出不同颜色或荧光。,升华法-实例,中药制剂中常见的具有升华性的成分有冰片、大黄中蒽醌类成分;牡丹皮中丹皮酚、薄荷中薄荷醇;斑蝥中斑蟊素等。,显微化学鉴别法实例升华法 万应锭中冰片
11、的鉴别:取制剂粉末,进行微量升华,收集冰片升华物,显微镜检升华物的结晶性状后,加入香草醛硫酸溶液,白色结晶发生化学反应呈现紫红色,第二节 显微鉴别,显微化学鉴别法作业,1.牛黄解毒丸中冰片、大黄微量升华鉴别。2.明目地黄丸的升华鉴别。3.养阴清肺膏的微量升华鉴别。,第三节 理化鉴别(Physicochemical Identification),一、理化鉴别的概念和意义 利用制剂所含化学成分的理化性质,通过化学反应法,光谱法和色谱法等分析方法和技术来判断真伪的分析方法。根据中药制剂配伍,首选君药、臣药、毒剧药和贵重药进行理化鉴别。关键:专属、灵敏、快速、准确,第三节 理化鉴别,目前中国药典收载
12、的理化鉴别方法有:化学反应法(多为试管反应)色谱法:薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法毛细管电泳法光谱法:荧光鉴别法、分光光度法(紫外、红外),一、化学反应法(General Chemical Reaction),(一)原理:利用检测试剂与制剂中的所含化学成分(有效成分或指标性成分或成分群)发生化学反应,根据所产生的颜色、沉淀或气体等现象,来判断某些成分或某些药味的有无。一般化学反应法即通常所说的显色反应和沉淀反应等(试管反应)。,一、化学反应法(General Chemical Reaction),特点:专属性差,操作简单。适用对象:多用于中药制剂中矿物药的无机成分、动物的蛋白质类成分以
13、及处方单一或组方简单的制剂中植物性药材成分类群的鉴别。马钱子散中生物碱的鉴别,化学反应法常鉴别的成分,化学反应法主要用于鉴别制剂中的:1.生物碱类;2.黄酮类;3.蒽醌类;4.香豆素、内酯类;5.皂苷类;6.氨基酸、多糖类 7.各种矿物类成分:砷、汞等。,生物碱沉淀试剂,Borntrager反应,盐酸-镁粉反应,Gibbs反应;异羟肟酸铁反应,Liebermann-Burchard反应,-萘酚-浓硫酸反应,(二)前处理提取,酸性乙醇回流提取,检验酚类、有机酸、生物碱等。水室温浸泡提取,检验氨基酸、蛋白质等。60热水浸泡,检验单糖、多糖、皂苷、鞣质及其他苷类成分。乙醚提取,检验醌、内酯、苷元;药
14、渣挥去乙醚后,用甲醇回流提取,检查各种苷类。升华法,用于提取和检查能升华的成分。水蒸气蒸馏法,用于提取和检查挥发性成分。,1.生物碱 1.碘化铋钾反应 产生红棕色沉淀 2.碘化汞钾反应 产生类白色沉淀 3.硅钨酸反应 产生白色沉淀 4.苦味酸反应 产生黄色结晶性沉淀 需在酸性条件下进行,注意事先排除其它成分的干扰。少数生物碱不与上述通用沉淀试剂反应,而具有专属性较强的其它反应。,化学反应法常鉴别的成分,2.黄酮类化合物 盐酸-镁粉反应 呈紫红色。大山楂丸(山楂)抗骨增生丸(淫羊藿)参茸保胎丸(黄芩)等。此外,黄芩提取物采用二氯氧锆-盐酸显色反应进行检识。3.蒽醌类化合物 主要采用碱液反应(Bo
15、rntrager反应),阳性反应呈红色,加酸红色褪去呈黄色。例如大黄流浸膏。,化学反应法常鉴别的成分,4.香豆素、内酯类和酚类 常用的检识反应有:氯亚氨基-2,6-二氯醌-四硼酸钠反应(Gibbs反应),呈现蓝色。异羟肟酸铁反应 呈红色 应用品种有:养阴清肺膏(牡丹皮)、前列舒丸(牡丹皮)等。,5.皂苷 常用的定性鉴别反应有:泡沫反应 样品水溶液振摇后,产生持久性泡沫。醋酐-浓硫酸反应(Liebermann-Burchard)甾体皂苷呈现污绿色,三萜皂苷呈现红、红紫色。浓硫酸反应 呈现红、红紫色。,地奥心血康胶囊(黄山药和穿山龙薯蓣的提取物)养心定悸膏(甘草、红参、麦冬)。,7.矿物药 朱砂、
16、石膏、雄黄等为中成药中常见的矿药。1.朱砂(主含HgS)主要采用铜片反应 天王补心丹等中成药中朱砂的鉴定2.石膏、牡蛎、海螵蛸 此类药物均富含钙盐,主要采用草酸铵反应止咳桔红口服液(石膏)、安胃片(海螵蛸)龙牡壮骨颗粒(牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等),8.挥发性成分 主要使用香草醛-浓硫酸反应检识此类成分,正反应呈红、红紫色。应用品种主要有:万应锭(冰片)、牛黄解毒片(冰片)、养心定悸膏(桂枝、生姜)等。牡荆油胶丸则采用溴-三氯甲烷反应鉴别之。,化学反应鉴别实例1,马钱子散中马钱子鉴定“取本品10g,加浓氨试液数滴及氯仿10ml,浸泡数小时,滤过,取滤液1ml蒸干,残渣加稀盐酸1ml使溶解
17、,加碘化铋钾试液1-2滴,即生成黄棕色沉淀。”浓氨水的作用?稀盐酸的作用?地龙的排除?,牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应,取本品6片(去包衣),研细,加乙醇10ml,温热10分钟,过滤,滤液作如下反应:(1)取滤液5ml,加镁粉少量与盐酸0.5ml,加热,即显红色(2)另取滤液4ml,加氢氧化钠试液,显红色,再加30过氧化氢溶液,加热,红色不消失,加酸或酸性时,红色变为黄色。,化学反应鉴别实例2,黄芩中有大量黄酮,大黄中含有羟基蒽醌,蟾蜍、朱砂、雄黄的定性鉴别反应(牙痛一粒丸),(1)取本品约0.1 g,研细,加氯仿5ml,浸泡1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加醋酐少量使溶解,再滴加硫酸,初显
18、蓝紫色,渐变为蓝绿色。(2)取本品约0.2g,研细,加水湿润后,加氯酸钾的硝酸饱和溶液2ml,振摇,放冷,离心,取上清液,加氯化钡试液0.5ml,摇匀,溶液呈白色浑浊,离心,弃去上层酸液,再加水2ml,振摇,沉淀不溶解。(3)取本品适量,研细,用盐酸湿润后,在光洁的铜片上摩擦,铜片表面即显银白色光泽,加热烘烤后,银白色消失,蟾蜍,雄黄,朱砂,一、化学反应法(General Chemical Reaction),(1)慎重使用专属性不好的分析反应,如泡沫生成反应、三氯化铁显色反应等。(2)分析前对样品进行分离、精制,除去干扰分析反应的物质,借此改善鉴别方法的专属性。(3)采用阴性对照和阳性对照的
19、方式,对拟定的鉴别方法进行反复验证,防止出现假阳性。,一般化学反应法用于中药制剂鉴别应注意:,一、化学反应法(General Chemical Reaction),1.一般化学反应法具有操作简便,适用性较强等特点。2.专属性较差。否定大于肯定,某些一般化学反应法已被专属性较强的薄层鉴别法取代。,2005年版中国药典在鉴别制剂中的大黄。决明子、何首乌等药味时,已不再采用蒽醌类化合物的颜色反应,而收载了薄层鉴别法。,二、光谱法,紫外光谱法荧光法红外分光谱法近红外光谱法,(一)紫外光谱法,问题:为什么可以在紫外光区有特征吸收?哪些化学成分具有紫外光谱特征?紫外光谱鉴别的特点:操作简单,快速,样品用量
20、少;特征性和专属性较差;测定前需作纯化处理。,(一)紫外光谱法,2.比较紫外光谱参数的一致性,3.紫外光谱谱线组法,4.紫外导数光谱法,紫外光谱鉴别法有:,荧光鉴别法(Fluorescence),原理:利用某些具有紫外吸收特征的化学成分,在受激发光照射后可发射荧光的特性进行中药制剂鉴别的方法。特点:1 操作简单、灵敏度高 2 易受拉曼峰和散射光等背景的影响以及受共存组分的干扰,专属性差。,荧光鉴别法(Fluorescence),荧光鉴别法适合检测成分为:黄酮类、蒽醌类、香豆精类、鞣质类、酚酸类和某些生物碱类成分。有的成分本身不具荧光性,但加酸、碱处理后,或经其它化学方法处理后也可产生荧光供鉴别
21、用。检测波长254nm或365nm,实例l天王补心丹中当归的鉴别 彩图(2),红外光谱法,存在问题:中药材目前尚缺乏标准红外光谱图,需要做大量的研究工作。中药制剂的生产 中药制剂经适当前处理,通过与计算机软件连接处理数据,建立模式制剂标准红外图谱。用于中药制剂真伪鉴别和制剂生产过程的快速在线检测。六味地黄丸生产过程的监控。,波长范围0.75-2.5m,该区域主要是含氢基团(、)的倍频和合频吸收。吸收强度低,需样本量大,并且数据难以处理。傅里叶变换光谱学和计算机技术发展。中药的傅里叶变换近红外漫反射光谱包含了样品极为丰富的组成信息。操作简单,无需处理即可 分析,简便快速,完成一次样品采集,即可实
22、现多项性能指标测定。,近红外光谱法(Near-Infrared spectrophotometry),近红外光谱法(Near-Infrared spectrophotometry),三、色谱法(chromatography),(一)薄层色谱法(TLC)(二)纸色谱法(PC)(三)高效液相色谱法(HPLC)(四)气相色谱法(GC),三、色谱法(chromatography),(一)薄层色谱法(TLC)使用本法鉴定中药制剂,通常是在同一块薄层板上点入样品和适宜的对照物,采用同一条件依法层析展开,经显色或用其他方法检出色谱斑点后,将样品与对照物所得的色谱图进行对比,作出鉴定。,薄层色谱法操作方法,薄
23、层板制备 常用固定相材料、颗粒大小 薄层板类型 操作要求,薄层色谱法操作方法,(一)薄层色谱3.显色与检视方法可见光有颜色,直接检视自身有荧光或加入试剂可激发荧光的成分,在365或254nm观察。化学显色:通用型和专属性较好的显色剂薄层色谱-生物自显影法,影响薄层色谱的因素有哪些?,(一)薄层色谱,1.薄层色谱供试品预处理根据主要的检测成分选择提取溶剂常用的预处理方法有:升华法,蒸馏法,溶剂提取法,小型层析柱的柱色谱法、离子交换法等。,(一)薄层色谱,影响因素,固定相选择,硅胶G、硅胶GF254,生物碱:氧化铝,黄酮类、酚类:聚酰胺,1.薄层色谱,(一)薄层色谱1.薄层色谱条件,系统适用性试验
24、,三、色谱法(chromatography),展开系统选择,Rf值0.2-0.8避免拖尾问题配比一致避免边缘效应低毒溶剂温度和湿度,无水乙醇-苯(1:4),苯-三氯甲烷(1:3),丙酮-甲醇(1:1),极性,三、色谱法(chromatography),(一)薄层色谱1.薄层色谱条件,注意问题,(一)薄层色谱2.薄层色谱对照物的选择,对照提取物对照法对照品对照法对照药材对照法阳性对照法阴性对照法,三、色谱法(chromatography),标志着今后以测定一组成分逐渐取代测定单一指标成分,(二)纸色谱法PC,固定相:水流动相:BAW系统(极性比较大)载 体:纤维素鉴别范围:氨基酸、动物类药物、多
25、糖等极性组分。鉴别依据:供试品色谱中,在与对照品、对照药材、对照药材提取物相应的位置显相同颜色的斑点,Rf值来表示。,薄层鉴别应用实例,1.大黄及含大黄的成药 1)供试液制备 取各样品适量,加甲醇20ml浸渍1h,过滤,取滤液5ml,蒸干,加水10ml使溶解,再加HCl 1ml,水浴加热30min,立即冷却,乙醚提取两次,20ml/次,合并乙醚液,蒸干,残渣加氯仿溶解成1ml。2)对照液制备 取大黄对照药材0.1g按供试液制备作为对照药材溶液;另取芦荟大黄素,大黄酸,大黄素,大黄素甲醚,大黄酚对照品,加甲醇制成1mg/ml的溶液,作为对照品溶液。3)薄层板 硅胶H加0.3CMC-Na溶液的自制
26、板;厚度:300um 4)点样 分别点样4uL。,5)展开剂 石油醚(3060)-甲酸乙酯-甲酸(1551)放置后的上层溶液。6)展开方式 上行展开;展距:7cm。7)显色 置紫外光灯(365nm)下检视。8)色谱识别 紫外光灯(365nm)下,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的五个橙黄色荧光主斑点。9)备注 在部分成药样品的色谱中,除大黄的五个蒽醌成分的斑点外,尚有其它荧光斑点,为处方中的其它成分,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 样品:1芦荟大黄素;2大黄酸;3大黄素;4大黄素甲醚;5大黄酚;6大黄(掌叶大黄)对照药材;7
27、大黄(唐古特大黄)对照药材;8大黄流浸膏;9小儿化毒散;10槟榔四消丸;11木香槟榔丸;12枳实导滞丸;13牛黄上清丸;14清宁丸;15一捻金;16牛黄解毒片;17牛黄解毒丸,薄层鉴别应用实例,薄层鉴别应用实例,2.黄连、黄柏及含黄连、黄柏的成药 1)供试液制备 取各品种药粉适量,加甲醇5ml,置水浴回流15min,过滤,滤液浓缩至1ml。2)对照液制备 取盐酸香槟酒小檗碱,硫酸黄连碱,硫酸表小檗碱,非洲防己碱,药根碱,盐酸巴马汀对照品,加甲醇制成每0.5mg/ml的溶液,作为对照品溶液。3)薄层板 硅胶G自制板;厚度:500um 4)点样 分别点样1-2ul 5)展开剂 苯-醋酸乙酯-甲醇-
28、异丙醇-浓氨试液(631.51.50.5);另槽中加入与展开剂等体积浓氨试液。,薄层鉴别应用实例,6)展开方式 展开箱预平衡15分钟;上行展开;展距:8cm7)显色 置紫外光灯(365nm)下检视。8)色谱识别 中国药典黄连项下收载有味连,雅连,云连三种,总体分析黄连可见45个主要的黄色荧光斑点,自下而上,分别为l.非洲防己碱+药根碱(量少);2.巴马汀;3.小檗碱;4.表小檗碱(云连不含,雅连含量低);5.黄连碱(味连含量高)。黄柏主要检出巴马汀及小檗碱,可与黄连区别。,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 样品:1.黄连(味连);2.黄连
29、;3.黄连(雅连);4.黄连(云连);5.黄连(野连);6.黄连(日本黄连);7.小儿化毒散;8.万应锭;9.大补阴丸;10.木香槟榔丸;11.香连丸;12.黄柏;13.非洲防己碱;14.药根碱;15.巴马汀;16.小檗碱;17.表小檗碱;18.黄连碱。,薄层鉴别应用实例,理化鉴别,(三)高效液相色谱法 主要是利用化合物在特定的色谱柱上,在一定条件下的保留值,将某一样品与其对照品在同一条件下,进行保留时间的直接比较作为鉴别依据。对于复杂未知成分,也可以加入对照品,观察被测峰是否增高,以初步作定性结论。对于复杂组分尚可采用联机技术,如本法与质谱联用,先分离后再作定性鉴别。,理化鉴别,(四)气相色
30、谱法 气相色谱法的分离效能高,检测器种类多而且灵敏度高,是混合物鉴别的有效方法。该法目前主要是用于含挥发油和挥发性成分的制剂分析。,(五)、毛细管电泳法(CE),弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。中药分析中可以用CE分析的成分包括生物碱、有机酸、酚类、苷类、黄酮类、醌类、香豆素等。,(五)、毛细管电泳法(CE),(1)毛细管区带电泳(CZE),用以分析带电溶质。(生物碱和酚酸类)(2)毛细管凝胶电泳(CGE),在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶,主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。(3)胶束电动毛细
31、管色谱(MEKC),在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基硫酸钠,形成胶束,被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移,达到分离。本模式能用于黄酮及各种苷类,五、毛细管电泳法(CE),(4)毛细管等电聚焦电泳(CIFE),在充有两性电解质溶液的毛细管两端加直流电压,管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度,从而使不同等电点组分在电场作用下迁移至满足其等电点的pH位置,形成聚集带而分离。主要用于蛋白质、肽类等生物大分子的分离与测定、异构体分离、等电点测定等。,(五)、毛细管电泳法(CE),(5)毛细管电色谱,是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相,以电渗流为流动相驱动力的色谱过程,此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。(6)毛细管等速电泳,采用先导电解质和后继电解质,使溶质按其电泳倘度不同得以分离。,(五)、毛细管电泳法(CE),HPCE在中药鉴别上的应用研究已经积累了较多的资料和数据,如对植物药菟丝子、动物药穿山甲、海马、海龙,菌类药冬虫夏草、红曲基原真菌等的CE鉴别均有报道。,鉴别方法走向,中药制剂的鉴别正在向多药味、多成分,能够标示中药制剂复杂特征的方向发展。,