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1、第三代液基细胞学制片术,韩国派氏E-Prep液基产品,细胞学检测发展史,1917年巴氏细胞学的始祖Papanicolaou发表。1928年Papanicolaou首次发表了用阴道抹片诊断子宫癌的文章。1943年，Papanicolaou与Traut合著阴道涂片诊断子宫癌瘤一书，从此应用阴道脱落细胞筛查宫颈癌的方法受到推广。Papanicolaou的巴氏五级分类法，在一段相当长的时间内作为一种诊断报告方式。,巴氏I级：完全正常.巴氏II级：多见于绝经后或育龄伴有宫颈炎症者,指个别细胞核异质明显,但不支持恶性.巴氏III级：可疑癌,需马上做进一步确诊,大约有10%的几率向癌症发展.巴氏IV级：重度
2、可疑癌,全面检查.巴氏V级：确定癌.,巴氏5级分类法主观因素较多,各级之间无严格的客观标准,巴氏涂片（Pap Smear）,宫颈脱落细胞涂片，是指从子宫颈部取少量的细胞样品，放在玻璃片上，然后在显微镜下研究是否异常。Bethesda由美国国家癌症研究所在地 Bethesda召开会议定制的宫颈和引导细胞病理学诊断报告方法，其中包括涂片满意度的标准和诊断名称的定义。,自60多年前问世以来，巴氏涂片使当时宫颈癌病发率在世界范围 内下降了70%90%。,巴氏涂片弊端,采集细胞数量不够，有效细胞比例更少转移到玻片上细胞不具代表性细胞堆积重叠，影响视线粘液、杂质、血细胞未除去，制片质量差人工操作，漏检率高
3、,传统巴氏涂片有高达55%假阴性,TBS（The Bethesda system）诊断系统是一种描述性诊断，1988年美国由50位病理学家在华盛顿马里兰州Bethesda城开会讨论宫颈/阴道细胞学诊断报告方式。,TBS诊断系统,反映了当代对子宫颈癌及前驱病变的最新认识，提出了统一的诊断术语，旨在代替应用半个多世纪的巴氏5级报告系统；是统一的，可重复的，并且富有灵活性的命名系统；有利于病理细胞检验医生与临床医生的沟通。,反映了当代对子宫颈癌及前驱病变的最新认识，提出了统一的诊断术语，旨在代替应用半个多世纪的巴氏5级报告系统；是统一的，可重复的，并且富有灵活性的命名系统；有利于病理细胞检验医生与临
4、床医生的沟通。,该诊断系统是目前宫颈细胞学最新分类和最权威的诊断标准。,评估并报告细胞学标本的满意度。（满意和不满意两大类）诊断术语标准化，不再采用巴氏分级系统。引用术语：非典型鳞状细胞（ASC）、鳞状上皮内病变（SIL）和非典型腺细胞（AGC）。提出适当的建议，以利对病变进一步评价。,宫颈癌前病变，细胞学和组织学中使用的不同专业术语,CIN：宫颈上皮瘤变，LSIL：低度鳞状上皮内病变，HSIL：高度鳞状上皮内病变，ASC-US：意义未明确的非典型鳞状上皮细胞，ASC-H：非典型鳞状上皮细胞，不排除高度鳞状上皮病变,薄层制片细胞学检验（ThinPrep Cytologic Test,TCT)于
5、1996年获得美国食品与药品管理局（FDA）认证。薄层制片细胞学检验技术是通过标本采集、细胞混匀、细胞的负压过滤膜采集、细胞转移，制成薄层的玻片；然后凉干或烘干，常规巴氏染色。该技术也被定格为膜式技术。具有代表的厂家有美国新柏式TCT,液基薄层制片术（模式）,液基细胞学检验（Liquid-Based Cytologic Test,LCT)于1998年获得美国食品与药品管理局（FDA）认证。液基细胞学检验技术，通过标本采集及保存、细胞混匀、分离提取诊断细胞、全自动制片及染色等过程制作细胞薄片，全过程均在液体状态下完成，故称为液基细胞学技术。该技术为沉降式原理技术。代表公司有美国BD公司的LCT，
6、国产广州安必平公司的LBP.,液基薄层制片术（沉淀式）,液基细胞学制片术优点,相对于巴氏涂片：将采集的细胞保存至保存液中，可收集全部细胞转移到切片上的细胞均匀化，具有代表性细胞平整分布、成薄层，无重叠保存液有效去除粘液、血液、杂质，染色出制片结果清晰，容易诊断,液基细胞学技术的应用,妇科：宫颈疾病诊断应用已非常普遍、1999年进入中国已有十几年历史非妇科：胸水、腹水、心包液、浆膜腔冲洗液、尿液、痰液、纤维支气管镜刷检和组织穿刺相对于妇科应用，开展相对晚，开展不够成熟,液基细胞学制片技术的妇科应用,在全球，女性的恶性肿瘤中宫颈癌的发病位居第二，仅次于乳腺癌，在妇科的恶性肿瘤中发病率最高。在中国，
7、每年有8万女性死于宫颈癌。早期发现，可以改变癌症患者的命运。,HPV（人乳头瘤病毒)感染是导致宫颈癌的罪魁祸首！-哈拉尔德楚尔豪森这一发现已获得2008年度诺贝尔生理学与医学奖。HPV持续感染是宫颈癌的主要致病因素。99.7%宫颈癌患者存在HPV感染。,宫颈癌防治的关键：早预防、早发现、早治疗,子宫颈癌早期治疗的5年生存率接近100%，晚期治疗5年生存率为20-50%。,数据来源：Thomas C.Wright,Jr.,M.D.,Mark Schiffman,M.D.Adding a Test for Human Papillomavirus DNA to Cervical-Cancer Sc
8、reening.The New England Journal of Medicine.2003,490.,肉眼观察子宫颈脱落细胞巴氏涂片薄层液基细胞学涂片法HPV DNA检测阴道镜检查荧光镜检法组织病理诊断,宫颈癌检测方法,美国癌症协会（ACS）、美国阴道镜和宫颈病理学会（ASCCP）、美国临床病理学会（ASCP）宫颈癌筛查最新指南,宫颈癌筛查人群及方法,Modified from Saslow D,Solomon D,Lawson HW,Killackey M,Kulasingam SL,Cain J,et al.American Cancer Society,American Socie
9、ty for Colposcopy and Cervical Pathology,and American Society for Clinical Pathology screening guidelines for the prevention and early detection of cervical cancer.CA Cancer J Clin.2012;62(3):147-72.,HPV检测较细胞学检查更敏感，但特异性较低。不建议对30岁女性进行联合筛查，因为这个年龄组性活跃的女性高危型HPV感染率高，但宫颈癌的发生率很低。对该组人群使用联合筛查将会发现大量一过性没有致癌性的H
10、PV感染。对小于30岁人群，与单独进行细胞学筛查比较，进行联合筛查敏感性增加，特异性降低，将导致更多的检查，但对降低癌症发生没有帮助。,观察性研究发现，CIN与某些危险因素相关。有下列危险因素的女性可能需要更频繁的宫颈细胞学筛查：HIV感染女性免疫抑制女性（例如接受实体器官抑制患者）宫内暴露于乙烯雌酚的女性既往曾因CIN2、CIN3或癌治疗的患者,某些特殊人群是否推荐其他筛查方案？,单独HPV检测能否用作宫颈癌筛查？HPV检测不能单独被用于宫颈癌筛查。有几项研究给出了初步数据，但随访资料尚不充分。这些研究的第一轮资料显示与单独细胞学筛查比较，单独HPV检测有一些益处，尤其是能提高CIN3检出的
11、敏感性。但其最主要的局限即，对于如何进一步评价众多得到HPV检测阳性结果，目前上不明确。,美国癌症协会、美国阴道镜和宫颈病理协会、美国临床病理协会联合建议,筛查结果处理,选自：美国阴道镜和宫颈病理学会(ASCCP).2006 consensus guidelines for the management of women with abnormal cervical cancer screening tests.,筛查结果处理,选自：美国阴道镜和宫颈病理学会(ASCCP).2006 consensus guidelines for the management of women with ab
12、normal cervical cancer screening tests.,30岁或以上女性，如细胞学阴性HPV阳性，应依照下列两种途径之一进行处理：12个月内重复联合检测。如果重复的细胞学检查为LSIL或更高级病变，或HPV仍为阳性，应建议患者行阴道镜。反之，患者应回到常规筛查程序（图1）。2.即刻行针对HPV16，或HPV16/18的HPV分型检测。HPV16或HPV16/18阳性患者应转诊直接行阴道镜。HPV16或HPV16/18检测阴性者，应在12个月时重复联合筛查，对其结果的处理如上（图2）。,（Saslow D,Solomon D,Lawson HW,Killackey M,K
13、ulasingam SL,Cain J,et al.American Cancer Society,American Society for Colposcopy and Cervical Pathology,and American Society for Clinical Pathology screening guidelines for the prevention and early detection of cervical cancer.CA Cancer J Clin.2012;62(3):147-72.）,联合检查中细胞学阴性、HPV阳性患者的处理选择之1。,细胞学阴性和HP
14、V阳性结果的处理选择之2,（Saslow D,Solomon D,Lawson HW,Killackey M,Kulasingam SL,Cain J,et al.American Cancer Society,American Society for Colposcopy and Cervical Pathology,and American Society for Clinical Pathology screening guidelines for the prevention and early detection of cervical cancer.CA Cancer J Clin
15、.2012;62(3):147-72.）,中国液基细胞学市场情况,新柏氏液基细胞学（ThinPrep Cytologic Test,TCT）1996年FDA认证1999年进入中国市场，有十几年时间，在中国品牌基础好，市场占有率较高。美国生产商三路影像公司（TriPath Imaging）LCT-超柏（AutoCyte/PrepStain），即自动细胞学检测系统（autocyto prep cytologic test），又称液基细胞学检测系统（Liquid-based cytologic test,LCT）。1999年通过FDA认证，正式推出美国市场。2001年底在我国注册，进入中国市场。目前
16、有一定市场品牌、市场基础2006年，BD收购TriPath Imaging其他进口品牌，如赛涂、赛立得、cell-prep等品牌进入中国近几年，国产品牌异军突起，湖北孝感病理、安必平、泰普,宫颈癌筛查的适龄人口在3亿左右。（引自目前我国细胞病理现状调查及分析）按适龄人群平均4年检查一次，应在7000万人次/年，其市场规模已经超过了150 亿元。有报告调查研究显示，2008年检查人次不到500万，而美国4000万人次/年（Cytc数据）加上非妇科项目，中国液基项目市场空间巨大。,中国液基细胞学筛查适龄人群,液基细胞学开展项目,妇科医院、综合医院,妇科,开展比较普遍,综合医院、专科医院,非妇科,胸
17、腹水痰液、痰液、尿液、其他体液,妇科开展较早，较非妇科成熟，基本二甲医院已开展。非妇科在综合医院和专科医院开展,液基细胞学项目开展情况,未开展,沿海县级、西部市级,沿海市级、中西部省级,省级综合、专科医院、体检中心,少数西部市级、沿海县级，西部大部分县级医院,大部分开展,几乎已经开展,绝大部分已开展,1000人份/月,500人份/月,200人份/月,无病理科,方法学,方法学各有优劣，不同医生偏好不同。目前沉降式多以全自动制片染色为主。,收费标准,目前大部分省份具有收费标准，收费条码为27080004，详见收费标准文件,韩国派氏E-REP液基细胞处理系统第三代液基制片系统双层过滤膜&沉降式制片,
18、韩国派氏公司2010年成立于韩国2010年获得GMP以及医疗器械生产许可证。主要生产经营产品为液基产品。目前在韩国、中国、东南亚、西欧、南非、俄国等有业务销售*。该公司为新起的新兴公司，品牌价值不高。2011年正式进入中国，并于2011年有产品销售至中国市场。2013年获得仪器和妇科试剂医疗器械注册证。目前在中国有不到10家终端客户，月销售超10000测试*非妇科注册估计于2014年年中通过审批全自动制片机E-Prep已研发完毕，正在报证注册,韩国派氏公司介绍,派氏液基细胞学检测系统（Liquid Based Cytology，LBC）模式制片：双层过滤膜，模式+沉降式半自动制片制片速度：每次
19、2片，1小时/120片孔径20mm细胞数量：不少于5万个细胞。取决于标本的质量，可通过机器调节细胞的薄厚、多少。,派氏液基检测系统组成,仪器：E-prep 1000,细胞保存及输送用液体乙醇成分含血液分离剂保存细胞形态运输检测体时使用,MIF20过滤瓶直径20MM过滤式及沉淀式,试剂耗材：保存分解液+过滤瓶,其他耗材,TCT专用防脱载玻片、盖玻片,专用可卸宫颈刷,染色液,巴氏染色液苏木素(Harris)染液橘黄G 染液EA36 染液或EA50 染液,HE染色液苏木素伊红,其他常规病理科耗材、试剂乙醇、封片液、二甲苯玻璃器皿、玻片架、镊子,液基细胞学操作步骤,采样前处理（妇科震荡即可，非妇科需要
20、消化震荡离心）上载玻片、过滤瓶、加载样本制片固定、染色阅片观察、发布结果,手工,手工,自动,3.上载过滤瓶、载玻片、加载样本（3 ml）,5.固定染色,制片步骤,制片原理（专利双层过滤膜+沉降式）,比较VS进口,比较VS国产,数据比较解读一：制片原理,数据比较解读二：保存基质,临床数据比较：与BD surepath 比较,2种方法的符合率为92.15%。,高度病变以上(HSIL+)的检出率比传统涂片提高了74.8%，低度病变提高89%。检测剩下的标本可以用于HPV检测、免疫组化检测、荧光原位杂交检测、HC2检测,Path液基制片系统总结,制片质量较佳，与进口品牌相当，比国产品牌有一定优势模式&沉降式制片，制片原理先进制片速度快，方便快捷半自动制片、无染色功能,Path液基检测系统技术更新,全自动制片机（过滤式）已经研发成功，准备报证非妇科试剂，正在申请SFDA认证全自动沉降式制片机准备研发结果分析系统持续研发中。,感谢您的聆听！,
