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1、ABO血型鉴定和交叉配血实验ABO血型鉴定和交叉配血实验 实验目的 观察红细胞凝集现象。 学习ABO血型鉴定方法,掌握血型鉴定原理。 实验原理 ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型,存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B凝集素相遇时,会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素,B型标准血清中含有抗A凝集素,因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应,以确定其血型。 同种动物不同个体的红细胞凝集称为同族血细胞凝集作用。不同动物的血液互相混合有时也可产生红细胞凝集,称为异族血细胞凝集作用。对于动物
2、的天然血型抗体了解不多,而且免疫效价也很低,所以同种动物第一次输血,一般不会引起严重后果。但第二次输血就必须进行交配试验,才能决定是否能相互输血。 实验对象 正常人。 实验药品 A型B型标准血清。 仪器器械 双凹玻片,采血针,竹签,75%酒精棉球,干棉球,玻璃蜡笔,尖头滴管,显微镜。 实验方法与步骤 1.ABO血型的鉴定: 取双凹玻片一块,在两端分别标上A和B,中央标记受试者的号码。 在A端和B端的凹面中分别滴上相应标准血清少许。 图6.9-1 ABO血型鉴定示意图 75%酒精棉球消毒无名指端,用采血针刺破指端,用消毒后的尖头滴管吸取少量血,分别与A端和B端凹面中的标准血清混合,放置12 mi
3、n后,能肉眼观察有无凝血现象,肉眼不易分辨的用显微镜观察。 根据凝集现象的有无判断血型。 2.交叉配血实验: 分别对供血动物和受血动物消毒、静脉取血,制备成血清和红细胞悬浮液。红细胞悬浮液是将受检者的血液一滴,加入装有生理盐水约1 ml的小试管中,即为2%的红细胞悬浮液。加盖备用。 取双凹玻片一块,在两端分别标上供血动物和受血动物的名称或代号,分别滴上它们的血清少许。 将供血者的红细胞悬浮液吸取少量,滴到受血者的血清中;将受血者的红细胞悬浮液吸取少量,滴入供血者的血清中,混合。放置1030 min后,肉眼观察有无凝集现象,肉眼不易分辨的用显微镜观察。如果两次交叉配血均无凝集反应,说明配血相合,能够输血。如果主侧发生凝集反应,说明配血不合,不论次侧配血如何都不能输血。如果仅次侧配血发生凝集反应,只有在紧急情况下才有可能考虑是否输血。 注意事项 1.指端、采血针和尖头滴管务必做好消毒准备。做到一人一针,不能混用。使用过的物品均应放入污物桶,不得再到采血部位采血。 2.精消毒部位自然风干后再采血,血液容易聚集成滴,便于取血。取血不宜过少,以免影响观察。 3.采血后要迅速与标准血清混匀,以防血液凝固。 4.在进行交叉配血实验时,一定要防止将主侧配血和次侧配血搞混了。 实验结果 报告你的血型。