蓝莓组培繁育生产技术改造项目.doc

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1、四川省康蓝农业科技发展有限公司蓝莓组培繁育生产技术改造项目基本情况 编制日期：二0一0年十二月第一章 承建单位基本情况11 项目名称、业主与编制单位111项目名称蓝莓组培繁育生产技术改造项目112建设单位项目承办单位：四川省康蓝农业科技发展有限公司法定地址：四川省甘孜乡城县香巴拉镇法定代表人：袁宁12 企业基本情况1.2.1公司概况 四川省康蓝农业发展有限公司于2008年1月成立注册地为甘孜州乡城县香巴拉镇，注册资金200万元，公司现有资产1000万元。公司现有正式员工26人，其中专业技术人员10人，公司依托西南大学、四川农业大学、四川农科院等科研所，进行现代化农业种植技术指导、技术培训，大力

2、培育镇、村、社三段技术推广服务网络。公司依靠本地丰富的土地资源、人力资源，建成以人为本、诚信经营、效益至上、贡献社会的经营理念。企业规模不断长大、发展成为乡城县最大的水果繁育种植企业。为推动当地农业从传统农业向现代化农业的转变，公司通过引入优新蓝莓品种和先进的苗木繁育技术，实施产业化、规模化开发、推动乡城蓝莓产业的发展，带动和促进当地农业、种植业结构调整，真正把农民带入市场，达到提高农业综合效益和增加农民收入的目的。为此公司正全力投入建设乡城县木雅通蓝莓千亩种植基地建设项目，为保证该项目建设成功，在区域内蓝莓的生产组织按照立体农业的生产方式，使整个区域的能量流动处于优化状态，全程采用无公害技术

3、和管理，使其生产出来的产品达到优质高产，起到现代科技农业种植示范作用。1.2.2公司法人代表简介袁宁：男，现年40岁，硕士，毕业于西南农业大学，毕业后一直从事农业科技开发苗木培育、水果种植，通过多年的不断积累已成为四川省知名的农业科技专家。现为公司的股东和法人代表。第二章 项目提出的背景和建设的必要性2.1项目建设的背景蓝莓，也称越橘，是越橘科越橘属（Vaccinium）灌木或小乔木，蓝莓在分类学上属杜鹃花科（Ericaceae）越橘属(Vaccinium spp.)，是该属多年生落叶或常绿灌木的总称。全世界分布的越橘属植物可达400余种。蓝莓的名称来源于英文blueberry，意为蓝色的浆果

4、之意。原产和主产于美国又被称为美国蓝莓。是目前全球最流行的小果类果树之一，被称为第三代水果的先锋类型，原产于北美 ，在美国大西洋沿岸各州以及加拿大东南部都有分布。蓝莓单果重为0.5g - 5g, 呈兰色、紫色或红色，可食部分为100%，同时营养价值极为丰富，可溶性固形物含量平均12%左右，除常规水果共有的糖、酸外，还含有其它水果所不具备的大量对人体健康有益的物质，如：大量的水溶性酚类色素有15种之多，药理研究发现蓝莓总花色素苷成分具有促进人视网膜上视红素再合成、改善循环、抗溃疡、抗炎症等多种功能。由于野生蓝莓生长在纯天然环境中，属纯粹天然食品。它含有很低的热量但营养成分比较高。其中还有大量抗氧

5、化物质，可以防止白内障、青光眼、静脉曲张、痔疮、胃溃疡、心脏病和癌症。蓝梅还可以帮助缓和中风后的大脑损伤以及减少消化管道的发炎情况-治疗便秘和腹泻。还含有多种人体必须的氨基酸，微量元素和维生素，并且还含有极其丰富的抗氧化成分VC、VE和胡萝卜素等，其果实内天然色素的含量也很高，活色素甘SOD的含量超过其他植物许多倍，经过HNRCA研究发现，消除人体代谢副产物自由基的强化能力，它果实特有的食用花青素、花红素具有改善大脑记忆和智能；减少人体胆固醇积累、改善心血管机能；防止心脏病、防治尿路感染；增强胶原质、调节血糖、改善夜视和治疗腹泻等功能。此外，蓝莓还富含维生素E, A, B，维生素A的含量为12

6、.6 mg/100g, 最高可达19.2mg/100g。蓝莓果实中食物纤维的含量约30%，是一种低卡路里食品。蓝莓果实富含黄酮类化合物和抗肿瘤的多元酚成分，蓝莓果实提取物如花青甙色素、多酚氧化物、绿原酸、黄色槲皮苦素、杨梅酮的黄酮醇配糖体等的开发与利用对科学研究及生产生活都具有极其重要的作用和意义。1999年美国Tuft大学人类营养研究中心发表的报告指出，蓝莓是研究过的40种蔬菜水果中植物性抗氧化成分最丰富的资源。因此，蓝莓被联合国粮农组织推荐为人类5大健康食品之一。蓝莓的栽培种类有三大类，即高丛蓝莓、矮丛蓝莓和兔眼蓝莓。其中高丛蓝莓又分为北高丛蓝莓、南高丛蓝莓和半高丛蓝莓三类。矮丛蓝莓和半高

7、丛蓝莓适宜在温带寒冷地区种植，北高丛蓝莓和一些半高丛蓝莓适宜在暖温带地区种植，兔眼蓝莓和南高丛蓝莓适宜在亚热带地区种植。 蓝莓为多年生落叶或常绿果树，呈灌木，果实为浆果。其栽培历史不到100年，最早始于美国。1906年美国人考维尔(F.V.Coville)首先开始野生蓝莓的选种工作。经过30多年的选种选育，1937年他将选育出的15个蓝莓品种首次进行商业性栽培。到20世纪80年代末，已选育出适合各地气候条件栽培的优良品种100多个，形成了美国南部、东部、北部各洲蓝莓产区。目前，蓝莓已成为美国主栽果树品种之一。继美国之后，世界各国竞相引种栽培蓝莓，其中以欧洲、澳洲、南美洲、大洋洲、日本等发达国家

8、和地区为典型代表，相继进入商业性栽培和生产阶段。近年来，中国和韩国也开始掀起种植热潮。我国蓝莓种植业发展较慢，目前全国蓝莓种植主要分布在辽宁、吉林、山东、江苏、浙江和安徽等。其中以日本企业在山东的种植基地面积最大，约60公顷左右，其产品全部销往日本。据市场调查，2008年日本鲜果4000-6000日元/公斤，冷冻果1500-2500日元/公斤，干果约3500日元/公斤；原汁约2200日元/升。2007年中国国内市场价格：鲜果200元/公斤（零售价），40元/公斤（批发价），加工品（野生）100元/公斤。2008年国际市场蓝莓果实的价格如下：冷冻果（大果）5.0美元/公斤（美国出口价）；鲜果8.

9、0美元/公斤（美国出口价）；加工果（冷冻）4.0美元/公斤（欧洲拍卖价）；浓缩果汁2.5万元/吨 （国际拍卖价）；冷冻果（大果）4.5美元/公斤（中国出口价）；鲜果6.0美元/公斤（中国出口价）；加工果（笃实）3.0美元/公斤（中国出口价）。2.2建设的必要性乡城县位于四川省川西高原甘孜藏族自治州西南部，位于东经992210604，北纬28342939。全县幅员面积500779平方公里。县境内耕地集中分布在海拔2700至3100米左右的峡谷区。乡城属大陆性季风高原气候，干、雨季分明，降水少而集中，年平均气温10.7，极端最高温34.4，极端最低温-14.4； 10积温2979.9，无霜期163

10、天，年降水量447.4毫米，降水集中在69月份。光热资源丰富，年日照时数2066.6小时，日照率为46。太阳有效辐射120150千卡平方厘米。年蒸发量达2362.4毫米，昼夜温差大。 蓝莓为常绿或落叶灌木、小乔木，适宜在较高海拔的坡地进行密植栽培，乡城的气候条件近于蓝莓主产区，适宜蓝莓的经济栽培。优质苗木繁育和苗木基地建设是蓝莓产业发展的首要问题，容器育苗技术目前国内外研究推广的苗木繁育新技术，它是采用用特定容器培育果树幼苗的育苗方式。容器盛有养分丰富的培养土等基质，常在塑料大棚、温室等保护设施中进行育苗，使幼苗的生长发育获得较佳的营养和环境条件。苗随根际土团栽种，起苗和栽种过程中根系受损伤少

11、，成活率高、生长旺盛，对不耐移栽的作物或树木尤为适用。该法还为机械化、自动化操作的工厂化育苗提供了便利。项目通过引入优新蓝莓品种和先进苗木繁育技术，并实施产业化、规模开发，推动乡城蓝莓产业的发展，有利于带动和促进农业种养结构的调整，真正把农民带入市场，让农民与市场紧密联系起来，达到提高农业综合效益和增加农民收入的目的，又可以推动乡城县农业从传统农业向现代市场农业转变，提高其增长质量。2.3市场需求分析2.3.1蓝莓产业发展现状（1）世界蓝莓产业发展现状全球蓝莓栽培现状蓝莓的种植栽培始于美国，目前位于北美洲的美国和加拿大无论从栽培面积、产量、技术研发、产业化水平等方面均居世界前列。欧洲等国引种栽

12、培时间较晚，但发展迅速，如波兰、荷兰都是在20世纪末开始引种进行栽培，且2006年波兰产量已达1、7万t。另外欧洲等国的优势在于其丰富的野生蓝莓资源，为其发展蓝莓加工品奠定了基础。亚洲地区以日本为代表开始进行蓝莓生产栽培。我国栽培蓝莓起步较晚，吉林农业大学于1983年率先在我国开展了蓝莓引种栽培工作，先后引入抗寒、丰产的蓝莓优良品种70余个。并相继开展了组建栽培基地、生产技术推广、产业化生产栽培等工作。截至2006年，国内种植蓝莓总面积已达1 100 hm ，产区主要分布在山东、辽宁、吉林、黑龙江、江苏等地，总产量达350 t，但与世界其他蓝莓生产国还有相当的差距。如表1所示，2004年中国蓝

13、莓产量只有100 t，占世界总产量的005，全部用于鲜果销售。2006年增长速度较快，栽培面积由2004年的300 hm 增加到1 100hm ，增长了267倍，鲜果产量增长了2倍，但也仅占世界总产量的014。 蓝莓产品供给不均衡蓝莓供给不均衡主要表现在，一是产地分布不均衡，从世界范围看，北美洲、南美洲、欧洲的波兰等国家是蓝莓供给的主要地区，其中北美地区的蓝莓供给季节性较强，在盛果期有接近50 的产品用于出口，2007年美国和加拿大总出口量达31万t，占世界总出口量的6080。而南美的智力鲜果大多出口，2007年出口量达12万t，首次超过波兰成为世界蓝莓出12I第3大国。日本是亚洲蓝莓最大进口

14、国，其产品主要来源于美国，但由于美国内需拉动，其进12I量有所下降。中国的蓝莓产品由于产量有限，因此主要用于出口。二是产品种类供给比例不均衡。目国际市场鲜果直接参与销售的比例虽然有所下降，但仍然过高，我国加工品以及鲜果销售比例为1：6，更加不合理。如表1所示，虽然蓝莓国际市场价格一直在稳步上升，但还是源于供需缺口较大，按照产业的长远发展看，应该增加蓝莓初加工以及深加工产品，延长产业链条，提升其产品附加值。（2）我国蓝莓栽培的发展状况早在20世纪50年代我国东北出产的笃斯蓝莓(Vaccini一1111 uliginosum L)已被开发利用于造酒，由于没有对蓝莓的品种、适应性、栽培管理技术等进行

15、系统研究，加之口味、地理条件等因素影响，蓝莓未作为水果广泛种植和利用，野生笃斯蓝莓的驯化与改良工作也没有取得理想的成果。国内对蓝莓的研究始于20世纪80年代初，吉林农业大学郝瑞教授最先对长白山地区的野生笃斯蓝莓资源进行了系统调查。1983年吉林农大李亚东教授率先在我国开展了蓝莓引种栽培工作，1995年，初步选出适宜长白山区栽培的蓝莓优良品种4个，同时，对蓝莓栽培技术、土壤改良工作等也做了大量研究，开始推广；并在1997年，从美国、加拿大、芬兰、德国引入抗寒、丰产的蓝莓优良品种70余个，其中包括高灌蓝莓、半高灌蓝莓、矮灌蓝莓、兔眼蓝莓等四大类型。1999年，吉林农业大学小浆果研究所与日本的环球贸

16、易公司合作，在我国开展了蓝莓的产业化生产栽培工作；此外，还通过技术支持和自主发展，在辽宁省的沿海地区和吉林省的长白山区建立了总计200 hm 的蓝莓产业化生产基地 m31。继吉林农大之后，中国科学院南京植物所于1988年也开始从美国引种蓝莓进行栽培研究，筛选出适合我国南方地区栽培的优良品种从2000年开始，辽宁、山东、黑龙江、北京、江苏、浙江、四川等地相继对蓝莓进行引种试栽。到2006年为止，蓝莓种植已经遍布全国多个省市，总面积已近千公顷，发展速度相当快。吉林、辽宁、山东、浙江、贵州等省发展尤为迅速，在短短5年间种植面积增长了近610倍，超过了世界其他国家的发展速度gJq。我国蓝莓已有20多年

17、的研究、种植历史，已初步解决诸如品种、栽培、育苗等技术问题，为我国蓝莓产业化生产打下了基础。 2009年8月8日，在大兴安岭地区首府加格达奇，旨在推进蓝莓精深加工和合作交流的中国大兴安岭首届国际蓝莓节隆重开幕。老挝、波兰、瑞典驻华使馆官员，俄罗斯、美国等国家和地区的官员和企业界代表、我国20多个省区市代表等1800名多中外来宾出席会议。参加这次国际蓝莓节使包括笔者在内的许多对蓝莓一无所知的来宾大开眼界，也使一批蓝莓生产经营项目开始启动，这将进一步推进大兴安岭地区蓝莓的精深加工。以此为契机，大兴安岭地区将进一步积极推进蓝莓产品的生产标准化、技术现代化、经营产业化、营销品牌化、产出高效化。本届国际

18、蓝莓节由中华全国供销合作总社、黑龙江省人民政府主办，中国农产品流通经纪人协会、黑龙江省供销合作社、大兴安岭地区行政公署、加格达奇区人民政府承办。 蓝莓的推广在山东半岛地区也取得了惊人的成果。截止至2009年春，该地区种植面积都已经位居中国首位。2008年6月，位于青岛胶南市的沃林农业（青岛）有限公司被国家林业部的中国绿色时报评定为中国蓝莓发展之最，其种植面积已将近7000亩，并先后通过JAS认证（通过OMIC认证的日本农业标准规范）、GlobalGAP认证（通过SGS认证的全球良好农业操作规范）及中国有机食品认证（通过中绿华夏认证的中国有机农业生产操作规范）。2009年5月，首届中国蓝莓大会申

19、办委员会在青岛成立。为我国实现蓝莓产业化起到极大的推动作用。（3）本项目的目标市场四川省甘孜州地区重地理气候条件地形地貌和土质情况，特别适于蓝莓的经济规模栽培。通过公司前期的引种、栽培试验收到的良好效果。为此，四川省和甘孜州相关部门已将甘孜州以乡城县为中心的广大区域列为蓝莓产业区。公司目前受条件限制每年能提供的蓝莓种苗元不能满足需求。为此，公司在有关部门的支持下，确定实施蓝莓组培繁育生产技术改造项目，并在乡城县的木雅通建设千亩蓝莓种植基地。为甘孜州地区提供优质蓝莓种苗和向市场提供蓝莓产品。根据市场分析，公司生产的种苗和蓝莓产品是有市场保证的。2.4建设规模项目建成后，每年可提供优质蓝莓种苗10

20、0万株，商品蓝莓200t。2.5主要建设内容2.5.1建设1000亩蓝莓种植培育基地。2.5.2建设各类房屋1250，其中清洗车间100、准备车间150、灭菌车间100，接种车间200、培养车间200、生根车间300、炼苗驯化车间200。2.5.3种植园道路、水利设施建设、土壤整治与改良等2.5.4购置研究试验和生产设备 第三章 项目建设方案3.1木雅通种植园建设公司利用农业生物技术组培的模式，拟实现年繁育无病毒优质苗木100万株。木雅通千亩种植园建设包括：基地道路、水利规划；土壤整治与改良；苗木投资等。与此同时，建立种植管理技术规程，建立标准化生产档案和生产规程。利用公司合作单位西南大学的强

21、大技术支撑，结合公司的实际情况，完成年繁育无病毒优质苗木100万株运营管理规程。建立标准化生产档案和生产记录（包括蓝莓的品种、来源和数量、繁殖情况、种植技能、植物营养来源及消耗情况、淘汰情况、植株发病用药情况等标准化生产档案和生产记录进行严格、规范、及时记录。所有记录公司保存期为3年。）3.1.1种植基地规划建设规模与目标在建中的蓝莓种苗基地计划年生产100万株蓝莓种苗；在建中的蓝莓种植基地1000亩。3.1.2种植基地土壤选择蓝莓幼苗忌积水和通气性不良的土壤，种植园要选择排灌方便、土壤肥力中等、土质较疏松、土壤pH4.55.5，施用大量腐熟的厩肥或土杂肥，经深翻做畦。3.1.3种植基地基础设

22、施建设机耕道（在建中）：供机动车运行，结合村村通道路建设实施。机耕道建设规划设计5000m。便道（在建中）：在园间田块之间依地势修建便道以方便操作管理。设计作业便道4000m。蓄水池与排水沟（在建中）：每10亩配置50m3蓄水池1个。新修整修排水沟3000m，配套30个沉沙凼。3.1.4容器育苗容器育苗操作、搬动和消毒均很方便，有利于控制育苗必需的环境条件，便于肥水管理和充分利用土地。容器育苗根系发达，栽培时不易损伤，不受季节限制，定植后不需要缓苗，成活率高，进入结果期早。这种方法适用于工厂化生产苗木。（1）营养土的配制：以锯木屑、河沙为主，也可用腐殖质搭配。锯木屑必须经过堆积发酵，用尿素2.

23、53千克、溶于100升水中，可淋湿1立方米锯木屑，堆好后用塑料膜盖好，两周后翻动1次又盖好，过两周即可使用。如用34的锯木屑与14的河沙混合，每立方米的培养土中加菜籽饼10千克，过磷酸钙2千克，硫酸钾1.25千克，尿素1千克。（2）育苗容器：以黑色薄膜袋制作为宜。其体积长宽高分别为12厘米12厘米22厘米，底部打直径15厘米的排水孔6个。黑色容器吸热增温效果好，早春土温上升快，根系活力强。（3）组织培养室、育苗大棚：已建成组织培养室200平方米、育苗温室14座，预计蓝莓种苗生产能力为100万株/年。3.2蓝莓组培方案3.2.1研究内容及方法（1）主要研究内容A、研究蓝莓离体繁殖影响因素,如培养

24、的光照、温度和湿度和激素浓度等。B、研究在现有改良的WPM培养基中添加各种激素配比，筛选出乡城蓝莓离体所需最佳启动、增殖和生根的培养基及培养条件。（2）方法采用L9(3)4正交试验筛选最适培养基及培养条件。3.2.2试验研究结果（1）诱导侧芽萌发以改良WPM培养基为基本培养基,具体改良方法:以Ca (NO3 )2 4H2O、KNO3代替原WPM 培养基中的K2 SO4、CaCl2。剪去茎段两端多余部分后,在无菌条件下将单芽茎段接种于WPM (改良) + ZT0. 5mg/L + 20g/L蔗糖+琼脂粉6g/L培养基上诱导侧芽萌发。（2）试管苗分化增殖培养基的筛选待茎段腋芽伸长后,分别转接于以改

25、良WPM为基本培养基,添加6 - BA、ZT两种激素不同浓度的培养基进行增殖培养,筛选优化蓝莓试管苗的增殖培养基配方。以6 - 苄基腺嘌呤(6 - BA) ,玉米素( ZT)为2个因素,每因素设置3个水平。采用L9 ( 34)正交试验设计表进行芽增殖培养基筛选。加蔗糖20 g/L,日产琼脂粉6 g/L, pH值调至5. 8。每个处理2次重复,每个重复接种10瓶,培养35d调查苗高、苗数。表1 因素水平表水平因素(mg/L)6 - BA (A)ZT(B)100.520.51.031.02.0（3）不同培养方式对试管壮苗的影响剪取苗高为1. 5cm左右的分化苗分别转接于WPM (改良) + ZT1

26、.0mg/L + 20g/L蔗糖+琼脂粉6g/L的固体培养基和WPM (改良) + ZT1. 0mg/L +20g/L蔗糖的液体培养基中。每个处理2次重复,每个重复接种10瓶。采用不同培养方式培养35d后统计苗高、茎粗、分化数等指标。（4）不同光照强度对试管壮苗生长的影响将苗高为1. 5cm左右的分化苗转接于WPM (改良) +ZT1. 0mg/L + 20g/L蔗糖+琼脂粉6g/L液体培养基,分别置于阳光+ 2 000Lux (处理) 、3 000Lux (处理) 、2 000Lux (处理)的光照条件下培养35d。每个处理2次重复,每个重复接种10瓶,从培养第2周开始调查苗高、茎粗、分化数

27、、生长状况。（5）试管苗生根培养剪取苗高约2. 0cm左右的单芽茎段,分别转接于以下培养基: 1 /2WPM (改良) +NAA0. 05mg/L; 1 /2WPM (改良) +NAA0. 1mg/L; 1 /2WPM (改良) +NAA0. 2mg/L; 1 /2WPM (改良) + IBA0. 8mg/L; 1 /2WPM (改良) + IBA1. 0mg/L; 1 /2WPM (改良) + IBA1. 5mg/L;进行生根培养。接种后首先放置于暗培养室中黑暗处理20d,然后转移到光照下培养。每个处理2次重复,每个重复接种10瓶。上述生根培养基加蔗糖20 g/L,日产琼脂粉6g/L, pH

28、值调至5. 8,培养50d调查生根状况。（6）培养条件与数据统计培养条件: (除特殊光照处理外) 培养温度白天25 1,夜间20 1,光照强度2 000Lux,光照时间12h /d。采用数据统计软件dps7. 05对试验数据进行方差分析和差异显著性测验( SSR法)。3.2.3结果分析（1）诱导侧芽生长观察试验结果表明,腋芽在初代培养基上培养10d开始萌动,经15d培养节间伸长,小叶片展开,苗高可达1. 52. 0cm。（2）不同激素组合对试管苗分化增殖的影响将伸长的茎梢切成茎段,转入增殖培养基。将不同处理培养35d后的试管苗各性状测量结果进行极差分析(见表2) ,极差大的因素对相应性状影响较

29、大。结果表明,无论苗高还是分化增殖苗数均是RB RA ,即激素B (玉米素)对试管苗的向高生长、苗木分化增殖都起着决定性作用。经方差分析(见表3)明,A、B两因素不同水平间差异极显著(p 0. 01) 。按F值大小分析,与上述分析结果一致。植株上部生长情况的多重比较结果显示(见表4) ,以处理1培养的试管苗向高生长最快,其次是处理8;以处理8培养的试管苗分化增殖倍数最多,并且与其他处理间差异显著( p 0. 05) 。综合上述结果,在保证试管苗增殖率的前提下,应选择苗木较高、生长旺盛的处理,因为选择培养基(即处理8)WPM (改良)+6-BA1.0mg/L+ZT1.0mg/L为蓝莓的分化增殖培

30、养基。（3）不同培养方式对试管壮苗的影响分化幼苗转接于固体、液体两种培养基中,经过35d的培养调查表明(见表5) ,液体培养的试管苗茎秆较粗壮,节间较短,植株直立,上部腋芽与靠近培养基的腋芽均可分化出幼苗,平均分化数可达6. 9个,但经液体培养的试管苗含水量较大,个别出现玻璃化现象,叶片易脱落。经固体培养的试管苗向高生长迅速,但茎秆却较细弱,易产生向光生长而弯曲的现象;并且以靠近培养基的腋芽较易分化,但与液体培养相比分化较少,分化数为6. 2。因此,为培育出高度适中、茎秆粗壮、分化增殖倍数较多的健壮试管苗应采用液体培养方式。这样培养出的蓝莓种苗在乡城地区成活率更高。表2 不同激素对植株上部各性

31、状极差的影响性状因素K1K2K3R苗高( cm)A5. 555. 765. 640. 21B5. 895. 685. 380. 51苗数(个)A6. 236. 416. 600. 37B6. 366. 856. 030. 82表3 不同处理对蓝莓试管苗不同性状方差分析性状变异来源平方和自由度均方F值p值苗高( cm)区组0. 000 110. 000 16 - BA (A)0. 129 220. 064 631. 694 80. 000 2ZT(B)0. 786 220. 393 1192. 795 60. 0001误差0. 016 380.002总和1. 777 9苗数(个)区组0. 004

32、 110. 004 16 - BA (A)0. 414 620. 207 326. 880 60. 000 1ZT(B)2. 036 221. 018 1132. 008 60. 000 1误差0. 061 780. 007 7总和2. 704 7 注: p 0. 05为差异显著, p 0. 5cm表5 不同培养方式下试管苗植株上部的生长状况培养方式平均苗高(mm)平均茎粗(mm)平均分化数(个)生长状况液体培养5.720.816.9植株含水量大,有玻璃化现象,叶片易脱落; 植株直立;上部腋芽与靠近培养基的腋芽均可分化固体培养5.990.696.2叶片为绿色,小而多;苗木较细高;茎秆弯曲有向光

33、生长现象;以靠近培养基的腋芽分化为主（4）不同光照强度对试管壮苗生长的影响现将液体培养的试管苗分别放置于不同的光照条件下,观察不同光照强度与光质对其生长的作用。根据苗木生长动态结果(见表6)可知,经不同处理培养2周试管苗各性状无明显差异,但从第3周开始,显示出不同处理试管苗生长状况的差异,到培养的第5周经处理培养的苗木分化增殖数较多,茎秆粗壮,叶片相对增厚、有光泽,有效地克服了液体培养易出现的玻璃化现象。虽然高度逊于处理,但与它差异不显著。处理培养的苗木长势相对较弱,叶片大而薄,色翠绿、多汁,茎秆向光生长而弯曲,有部分玻璃化现象。处理表现居中。由此可见,液体培养的试管苗适当增加光照强度有利于克

34、服玻璃化现象,利用日光与阳光结合的方式可以培养出高度适中、健壮、生长势强、增殖分化效果好的苗木。表6 各处理不同取样时期试管苗植株上部生长状况性状处理2周3周4周5周平均苗高( cm)1. 85a3. 1a4. 6a5. 5ab1. 86a2. 9b4. 4a5. 4b2. 05a3. 1a4. 6a5. 7a平均茎粗(mm)0. 71a0. 90a1. 00a1. 04a0. 67a0. 70b0. 79b0. 91b0. 70a0. 71b0. 75c0. 81c平均分化数(个)3. 1a4. 0a6. 6a7. 9a3. 0a3. 8b6. 0 b7. 5b3. 0a3. 4c5. 4c

35、6. 9c（5）试管苗生根培养首先接种后的瓶苗放置于暗培养室中进行暗处理20d,然后转移到弱光照下培养。暗培养约17d左右有非常细弱的白色嫩根产生,根系较少,生长较慢,后期转为红色,渐粗壮。将培养50d后生根状况进行方差分析表明(见表7) ,各性状的处理间差异显著。经多重比较(见表8)显示,经处理5培养的苗木生根最长;处理2生根数量较多,其次是处理5;处理6生根率较高,但多为愈伤生根,并且与处理5差异不显著。综合分析生根数据得出:以处理5培养的试管苗生根状况相对好,生根率达46% ,平均生根2. 8条,根长3. 18cm,属于皮层生根,生根较快,根系较粗壮、分支多,有利于移栽成活。即选择1 /

36、2WPM (改良) + IBA1. 0mg/L为蓝莓试管苗的生根培养基。表7 试管苗根系生长状况方差分析性状变异来源平方和自由度均方F值p值1平均根数(条)区组间0.001 210.001 20.4170.547 1处理间2. 925 550. 585 1203. 160. 000 1误差0. 001 450. 002 9总变异2. 941 111生根率区组间0. 003 710. 003 75. 9760. 058 3处理间0. 033 550. 006 710. 8860. 010 2误差0. 003 150. 000 6总变异0. 040 211平均根长( cm)区组间0. 000 81

37、0. 000 80. 530. 499 4处理间5. 965 251. 193758. 2850. 000 1误差0. 007 950. 001 6总变异5. 973 911 注1: p 0. 05为差异显著, p 0. 01为差异极显著。注2:平均根数=生根总数/已生根苗数;平均根长=根长总和/生根数表8 不同处理试管苗生根状况多重比较处理号平均生根数(条)平均生根率(%)平均根长( cm)12. 2c45ab2. 05c23. 1a39bc1. 24e32. 1d40bc1. 49d41. 6e34c2. 33b52. 8b46ab3. 18a62. 3c50a1. 16e（6）试管苗移栽

38、当幼苗形成发达的根系就可以移栽到备好土的营养杯中,移苗前首先将营养杯瓶口塞打开。在自然光下进行抗性锻炼。移栽时洗净沾在根上的培养基,移入土中。用透明罩盖一周,使小苗适应新的环境。去罩后在通风阴凉处每天喷水2 次,大约10 d 左右度过缓苗期小苗生长挺拔,有的长出新叶这时可以移栽到自然光下正常生长、管理。3.2.4试验研究结论(1)对于蓝莓微体繁育而言,玉米素( ZT)是促进其生长分化的主要因素,通过试验筛选出蓝莓的最适增殖培养基为WPM (改良) +6-BA1.0mg/L+ZT1. 0mg/L,分化增殖苗数较多,苗木较高,生长旺盛。(2)蓝莓属于生根较困难的植物,试管内生根研究较少,多采用嫩枝

39、扦插试管外生根的方式。本试验通过单因素随机区组试验设计,筛选出蓝莓试管内生根培养基配方为1 /2WPM (改良) + IBA1. 0mg/L,生根率达46% ,生根较快,根系较粗壮、分支多,且为皮层生根,有利于苗木移栽成活，现在乡城进行大量组织培养快繁种苗就是采用的此方法。(3)通过不同培养方式的研究表明，与固体培养相比,液体培养基培养的试管苗高度适中、茎秆粗壮、分化数较多，降低了培养成本。采用不同光照处理生长动态分析表明,采用不同的光强与光质对植物的形态建成有重要的作用，适当增加日光照射有利于克服玻璃化现象，提高苗木分化增殖数，培养出茎秆粗壮、生长势强的健壮试管苗。3.3研究实验用房为满足种

40、苗培育需建设房屋1250。其中，清洗车间100、准备车间150、灭菌车间100，接种车间200、培养车间200，为一栋建成；生根车间300、炼苗驯化车间200为一栋建成。三栋房屋均为砖混结构，按规模要求进行装修。3.4设备选择本项目拟购各类设备28台（套）。详见新增设备明细表。名称型号单价（元）数量(台/套/个）总计（元）超净工作台CA-B-III单人双面垂直2380020476000高压蒸气灭菌锅DS-B90C1020012122400水处理设备分析型6200001620000电子天平FC2104A208005104000微波炉KAA21B86001086000酸度计PHT-25130081

41、0400冰箱GR-203PA1870010187000实验准备操作台215008172000电热鼓风干燥箱DHB-903046001046000空调7500645000培养瓶6100000600000组织培养架500300150000手推车16001016000人工气候箱800002160000恒温烤箱450005225000太阳能供电系统2000002400000摩尔超纯水器分析性220005110000远程控制灌溉系统1500001150000消毒柜YXQNG-3215000575000立体显微镜CA-3C700023000246000土壤养分检测仪TFS578015780土壤水分速测仪T

42、ZB-IIW6000212000PL水处理设备4200001420000霉菌培养箱10500221000电热恒温鼓风干燥箱3500310500除湿机220012200接种器具灭菌器88043520温控设备750002150000合计4425800第四章 投资估算及资金筹措41 投资估算4.1.1投资估算范围本工程为四川省康蓝农业科技发展有限公司蓝莓组培繁育生产技术项目，投资估算范围为：本项目建设投资1273万元，新建清洗、准备及灭菌车；接种及培养车间；生根剂及生根及炼苗驯化车间，新增生产设备及公用工程设备，完成公用工程配套工程。工程建设的其他费用：建设单位管理费、工程咨询费及设计费用等。4.2

43、 编制依据1项目规划方案及平面布局图2本项目的建设规模及各单项工程的建设内容和工程量3各公用、工艺专业提供的资料。4近期类似工程造价参考指标5有关政策规定及收费标准4.3 编制方法（1）建安工程采用估算指标进行估算。估算指标参照建设工程工程量清单计价规范（GB50500-2008）和四川省建设工程工程量清单计价定额（2009）及四川省建设工程工程量清单计价管理办法。材料价格按四川省造价站颁发的2009年第12期四川省工程资金信息价格计取，缺项的材料价格按市场价格计取。（2）设备购置费根据类似工程相关费用及内容和主要材料表计入（3）工程建设其他费用其他费用依据建设项目概算编制办法及各项概算指标等国家的有关规定计算（环评费和测位费等计入建设单位管理费中），其中预备费按11%估算，价格基年为2009年。其他费用详见下表工程其他费用取费依据及计算式表1工程建设其他费用1.1与项目建设有关的费用1.1.1征地及拆迁费用1.1.2城市建设配套费按新增建筑面积30元/计算1.1.3建设管理费1.1.2.1建设单位管理费国家财政部2002394号文按投资额分段累计计算根据市场调整1.1.2.2工程建设监理费(施工监理）发改价2007670号按计费额计算后根据市场调整1.1.3可行研究费国家计委计价格1999128