《HPLC 仪器验证方案.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《HPLC 仪器验证方案.docx（8页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、HPLC 仪器验证方案中国国际制药股份有限公司 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案 中国国际制药股份有限公司 检验仪器OQ&PQ文件 WATERS2695高效液相色谱仪验证 验证或使用设备 设备名称：高效液相色谱仪 设备型号： 2695型 出厂编号： 设备/计量编号： 设备厂商：美国WATERS公司 使用部门：质量检验部 配套设备：打印机、微机工作站 计划开始实施日期 计划完成日期 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案审批 验证小组负责人 相关/接收部门确认人 负责部门经理审批 相关部门经理审批 质量保证部审批 管理者代表审批 - 部门/姓名 签名 日期 文件页码 共 页 注：以
2、上人员签字后方可实施本草案 文件编号： 中国国际制药股份有限公司 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案目录 1.0再确认目的 2.0再确认项目及结果 2.1 仪器各单元开机性能确认 2.2 四元泵的确认 2.2.1 泵流量的确认 2.2.2 梯度准确度的确认 2.3自动进样器确认 2.3.1进样器精密度的确认 2.3.2进样器线性的确认 2.4检测器确认 2.4.1波长准确度测试 2.4.2 检测器线性的确认 2.4.3 最小检测浓度的确认 第1页 共5页 中国国际制药股份有限公司 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案 WATERS269
3、5高效液相色谱仪再确认方案 1.0再确认目的 通过验证来确认此台仪器各项性能是否符合要求。 2.0再确认项目 2.1仪器各单元开机性能确认 项目 泵及进样器 开关功能键 打开电源开关，泵及进样器进行自检，并显示置主画面。 打开电源开关，检测器灯打开，并进行自检约6min，氘灯在三个内置波长257、检测器 521、656处的校准，若偏差小于1nm，自检通过，若大于1nm，出现自检错误提示。 2.2 四元泵的确认 2.2.1 泵流量的确认 2.2.1.1 测试条件： 流动相：超纯水 色谱柱：4.6mm250mm 温度：室温 2.2.1.2 测试方法： 启动仪器，以水为流动相，待压力稳定后，在流动相
4、出口处用称重过的10ml容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5分钟流出的流动相，精密称定，每个流速测定3次，记录测试温度，按下式计算流量设定值误差Ss和流量稳定性误差SR。 SS=(Fm-FS)FS100% SR=(Fmax-Fmin)Fm100% 式中：FmFm=/，流量实测值，ml/min； W2容量瓶流动相的质量，g； W1容量瓶的质量，g； 试验温度下水的密度，g/ml； t 收集流动相的时间，min； Fm同一组测量值的算术平均值，ml/min； Fs流量设定值，ml/min； Fmax同一组测量中流量最大值，ml/min； 第2页 共5页 中国国际制药股份有限公司 WATERS2
5、695高效液相色谱仪验证方案 Fmin同一组测量中流量最小值，ml/min。 2.2.1.3 测试标准： Fs Ss 允许误差 SR 2.2.2 梯度准确度的确认 2.2.2.1测试条件： 0.500 5% 3% 1.000 3% 2% 1.500 3% 2% 流动相：0.3%丙酮-水 检测波长：254nm 流速：1.000ml/min 柱温：30 2.2.2.2 测试方法： 按下表设置梯度洗脱程序，以两通代替色谱柱连接管路，先用超纯水冲洗系统，待基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。测定三次，取各梯度级高度的平均值，由曲线图测量100%B梯度级平均高度计算各梯级实际体积%，每个梯级的
6、理论体积%和实际体积%之差即为梯度准确度，以最大差值为梯度准确度误差。 梯度洗脱表 时间 0.00min 3.00min 6.00min 9.00min 9.01min 12.00min 12.01min 15.00min 15.01min 18.00min 18.01min 21.00min 21.01min 24min A通道：超纯水 100% 100% 0% 0% 20% 20% 40% 40% 60% 60% 80% 80% 100% 100% B通道：0.3%丙酮水溶液 0% 0% 100% 100% 80% 80% 60% 60% 40% 40% 20% 20% 0% 0% 2.2
7、.2.3 测试标准：梯度准确度误差1% 2.3 自动进样器的确认 2.3.1 进样器精密度的确认 第3页 共5页 中国国际制药股份有限公司 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案 2.3.1.1 测试条件： 流动相：乙腈-水 对照品：25g/ml咖啡因对照溶液 色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm 进样量：10l 流速：1.000ml/min 柱温：40 2.3.1.2 测试方法： 对照品置于进样瓶中，共进样6针，记录峰面积，求6针RSD。 2.3.1.3 测试标准：RSD1.5% 2.3.2 进样器线性的确认 2.3.2.1 测试条件： 流动相：乙腈-水 对照品：25g/ml咖啡因
8、对照溶液 色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm 进样量：l 流速：1.000ml/min 柱温：40 2.3.2.2 测试方法： 对照品置于进样瓶中，不同进样量各进一针，记录峰面积，求进样浓度与峰面积的相关系数。 2.3.2.3 测试标准：相关系数r0.999 2.4 检测器的确认 2.4.1波长准确度测试 以水流过流通池时作一空白扫描，然后，以手动方式将咖啡因标样5)用水稀释10倍后注入流通池，扫描200nm300nm范围内的紫外吸收图谱。记录咖啡因最大吸收和最小吸收处的波长，其205nm处的最大吸收波长与205nm比较，其273nm处的最大吸收波长与273nm比较， 最小吸收波长与2
9、45nm比较，三波长处的差值|均应2nm。 波长检查表 选择波长 205 (max.) 245 (min.) 273(max.) 实测波长 误差 第4页 共5页 中国国际制药股份有限公司 WATERS2695高效液相色谱仪验证方案 2.4.2 检测器线性的确认 2.4.2.1测试条件： 流动相：乙腈-水 对照品：g/ml咖啡因对照溶液 色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm 进样量：10l 流速：1.000ml/min 柱温：40 2.4.2.2 测试方法： 5个浓度对照品置于不同进样瓶中，各进一针，记录峰面积，求样品浓度与峰面积的相关系数。 2.4.4.3 测试标准：相关系数r0.999 2.4.3 最小检测浓度的确认 2.4.3.1 测试条件： 流动相：乙腈-水 对照品：110/ml咖啡因对照溶液 色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm 进样量： 5l 流速1.000ml/min 柱温：40 2.4.3.2 测试方法： 以流动相冲洗系统至基线平稳，进样，记录色谱图，由色谱图峰高及基线噪音，按下式计算最小检测浓度CL -7CL=2NdCH式中：CL最小检测浓度，g/ml； Nd基线噪音峰高，mAU； C标准溶液浓度，g/ml； H标准溶液色谱峰高，mAU。 2.4.3.3 测试标准：110 g/ml咖啡因溶液 第5页 共5页 -7
