亚硝酸还原酶测定.docx

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亚硝酸还原酶测定 土壤亚硝酸还原酶 原理: 此方法基于通过NO2-N与格里试剂反应所产生的颜色深浅测定酶促反应前后NO2-N变化用于表征亚硝酸还原酶活性。 试剂: 1 0.5%NaNO2溶液 2. 1%葡萄糖 3. caco3 4. 铝钾矾饱和溶液 5. 格里试剂 A: 0.1% X-萘胺溶液 AB用乙酸相对密度1-04配制 B:0.5%对氨基苯磺酸溶液 使用时AB 等体积混合。 6. NaNO2标准溶液 称取1.500g分析纯亚硝酸纳于烧杯中,加水洗入1 L定量瓶。用时此溶液配成稀溶液 步骤 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 称取1g过1mm筛风干土置于100ml减压三角瓶中,加入20mgcaco3和1ml 0.5%NaNO2,摇匀后加入1ml 1%葡萄糖溶液 抽真空3min,置于培养箱30度,24h 培养结束后,加入50ml水,1ml铝钾矾溶液,摇匀,过滤 取1ml滤液至50ml容量瓶中,加入5ml水和4ml格里试剂混匀,显色,定色至50ml、 在550-600nm处进行比色 根据反映前后NO2-N量的差值,计算酶活性。 以10g土壤24h还原NO2-N毫g数表示土壤亚硝酸还原酶 Mg NO2-N/10g干土 24h=*10/m 无基质对照 无土对照2个。

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