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1、实验性呼吸衰竭的发生与治疗,机能综合实验II,【实验目的】,1.复制油酸性急性肺水肿动物模型，并探讨急 性呼吸衰竭的发病机制。,2.观察吸氧对急性呼吸衰竭的治疗作用。,【实验原理】,定义：呼吸功能不全指外呼吸功能障碍，使PaO2 下降，伴有或不伴有PaCO2 升高的病理过程。呼衰是其严重阶段。,2.临床分类：I 型，PaO2降低，不伴有PaCO2升高。II 型，PaO2降低，伴有PaCO2升高。,3.急性呼吸窘迫综合征（ARDS）：急性肺损伤(ALI)引起的急性呼吸衰竭，以进行性呼吸困难和顽固性 低氧血症为特征。,油酸致肺损伤-呼吸窘迫综合征机制,致病因子：油酸,直接或间接作用于肺泡-呼吸膜,
2、大量中性粒细胞和巨噬细胞在趋化因子作用下聚集于肺,释放自由基、蛋白酶和炎性介质,肺泡-毛细血管膜损伤,肺泡-Cap膜通透性,渗透性肺水肿,弥散障碍,肺泡II型细胞受损,表面活性物质减少,肺不张,炎性介质,支气管痉挛,肺内功能性分流,炎性介质和DIC,肺血管收缩,死腔样通气,低氧血症（PaO2）,急性呼衰，呼吸变浅、变快,【实验对象】,【实验器械和药品】,家兔,计算机、显微镜、动物手术器械一套、兔台、气管插管、注射器、氧气袋、张力换能器、血细胞计数器、量筒等。25%氨基甲酸乙酯、油酸、生理盐水、白细胞稀释液、考马斯亮蓝试剂、蛋白标准液等。,【实验步骤】,1.称重、麻醉(25%氨基甲酸乙酯 4ml
3、/kg)、固定。2.描记正常呼吸曲线，记录正常呼吸频率和幅度。3.取外周血测WBC计数，耳缘静脉取20ul加入0.38 WBC 稀 释液中，光镜下计数WBC。4.家兔气管插管。5.分组。实验组：耳缘静脉注射油酸（0.2ml/kg),如症状不明显，30min 后追加0.2ml。对照组：注射等量生理盐水。6.观察家兔一般情况及呼吸频率与深度，描记呼吸运动曲线。7.呼吸变深变浅时吸氧、观察效果。,8.注射油酸30-60min后，气管内可出现粉红色泡沫痰，提示肺水肿形成，再次耳缘静脉采血，镜下测定外周 血WBC计数。9.处死家兔，打开胸腔，取气管-支气管-肺组织。观 察肺组织表面变化，两肺称重，测肺体
4、积，计算肺 体积比及肺系数。10.收集支气管-肺泡灌洗液（BALF）。器官内注入 10ml 生理盐水和空气，反复抽吸后，吸出BALF，用BALF行WBC计数、蛋白含量测定。,（肺系数：肺重量(g)/体重（kg）,（肺体比：肺体积(ml)/体重（kg）,【实验结果】,【注意事项】,气管插管前把气管内清洗干净。取肺组织前用线结扎气管，防治肺组织内渗出液流失。如肺组织内BALF抽吸困难，可变换肺标本位置。,【思考题】,1.什么是呼衰？I、II型呼衰的区别有何不同？2.油酸造成急性肺损伤的机制是什么？,【实验方法附录】,1.WBC计数,白细胞数（个/mm3)=Yx(10/4)x20=Yx50(Y,四个大方格中的白细胞总数）,2.家兔耳缘静脉刀片切割取血,3.家兔气管插管步骤,4.BALF蛋白测定：见152页表6-7,BALF的蛋白质测定（考马斯亮蓝法）,空白管,标准管,测定管,生理盐水,蛋白标准液,待测液,考马斯亮蓝液,0.1ml,0.1ml,0.1ml,5ml,5ml,5ml,谢 谢！,
