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1、第六章,尿液分析仪检验,第六章,尿液分析仪检验,第六章,尿液分析仪检验,尿分析仪检验质量控制,尿有形成分分析仪,尿干化学分析仪,本,章,内,容,第六章,尿液分析仪检验,第一节,干化学尿液分析仪检验,第六章,尿液分析仪检验,干化学尿液分析的发展史,法国,Maumene,采用羊毛纤维作为试,带，检测尿液中葡萄糖。,1850,美国人用单试纸条检测尿蛋白和葡,萄糖，开创了干化学法。,1956,干化学尿液分析仪已能在,1,条试带,上同时测定,8-14,个项目，检测更迅,速，结果更准确。,目前,第六章,尿液分析仪检验,5,干化学尿液分析的自动化程度,第六章,尿液分析仪检验,干化学尿液分析仪组成,第六章,尿
2、液分析仪检验,将待检的试带传送到检测区，仪器检测后将试带,传送到废料盒内或手动取下试带,机械系统,第六章,尿液分析仪检验,8,图,7-1-1,光电系统检测原理图示意图,光线照射到试带反应,物表面产生反射光,反射光的强度与反应,颜色成反比,不同强度的反射光再,经光电转换器件转化,为电信号进行处理,光源,单色处理,光电转换,光学系统,第六章,尿液分析仪检验,图,7-1-2,电路系统工作简图,将光信号转换成电信号放大，经模,/,数转换，再,用电脑进行数据分析，打印结果,电路系统,第六章,尿液分析仪检验,干化学尿液分析仪试带结构,图,7-1-3,干化学尿液分析仪试带结构图,单项试带,发展初期基本形式,
3、多项试带,含同一试带上多种检测项目的试,剂模块，可同时检测多个项目。,第六章,尿液分析仪检验,膜结构,主要作用,尼龙膜层,保护作用，防止大分子物质污染反应,绒制层,包括,试剂层和碘酸盐层,。试剂层含有试剂成分，主要,与尿液中的化学物质发生反应，产生颜色变化。碘酸,盐层可防止维生素,C,等物质的干扰,吸水层,使尿液均匀快速渗入，并抑制尿液渗透到相邻反应区,支持层,支持作用，由尿液不浸润的塑料片制成,尿液干化学法试带多层膜结构组成及主要作用,第六章,尿液分析仪检验,干化学尿液分析仪检测原理,图,7-1-3,干化学尿液分析仪试带结构图,试带中各试剂模块与尿液中相应成分进行独立,反应，显示不同的颜色。
4、,颜色的深浅与尿液样本中的各种成分的浓度成,正比。,第六章,尿液分析仪检验,影响,+,试带上的,各检测试剂块,尿液中,相应成分,产生颜色,发生,化学反应,颜色深浅,与光的吸收与反射相关,尿液中相应的,被检测成分成比例关系,+,吸收光值越大,反射光值越小,被检成分的浓度越高,尿液本身的颜色,空白试剂,(,补偿垫,),采用球面积分仪接受,双波长,反射光的方式,测定试带上的颜色变,化进行半定量测定。,双波长的作用：消除背景光,和杂散光,测定波长：被测试剂块,的灵敏特征波长,620nm,：蛋白质、葡萄糖、,pH,、维生素,C,、隐血,550nm,：胆红素、尿胆原、,亚硝酸盐、酮体,参考波长：被测试剂块
5、不敏感的波长，,用于消除背景光和其他杂散光的影响,720nm,第六章,尿液分析仪检验,将测定的每种试剂区反射光的光亮,值与空白块的反射光量值进行比较,，通过计算求出反射率,仪器根据反射率确定尿液中,生化成份的含量,1,2,?,R,反射率；,?,Tm,试剂块对检测波长的反射强度；,?,Ts,试剂块对参考波长的反射强度；,Cm,Ts,Cs,Tm,=,%,R,）,（,反射率计算公式如下,：,?,Cm,空白块对检测波长的反射强度；,?,Cs,空白块对参考波长的反射强度。,第六章,尿液分析仪检验,干化学尿液分析仪检测参数及原理,第六章,尿液分析仪检验,参数,英文缩写,反应原理,参考区间,pH,pH,酸碱
6、指示剂法,随机尿：,pH 4.58.0,比重,SG,多聚电解质离子解聚法,1.0151.025,蛋白质,PRO,pH,指示剂蛋白质误差法,阴性,葡萄糖,GLU,葡萄糖氧化酶,-,过氧化物酶法,阴性,胆红素,BIL,偶氮反应法,阴性,尿胆原,URO,醛反应、重氮反应法,阴性或弱阳性,酮体,KET,亚硝酸基铁氰化钾法,阴性,亚硝酸盐,NIT,亚硝酸盐还原法,阴性,隐血或红细胞,BLD,血红蛋白亚铁血红素类过氧化物酶法,阴性,白细胞,LEU,酯酶法,阴性,维生素,C,VitC,吲哚酶法,阴性,尿液干化学分析仪主要检测参数及原理,第六章,尿液分析仪检验,尿液干化学分析仪试带及结果判断,第六章,尿液分析
7、仪检验,干化学尿液分析法方法学评价,优点,标本用量较少,适用于大批量标本的筛检,速度快，项目多，重复性好，,准确性较高,第六章,尿液分析仪检验,局限性：,与含硝酸盐还原酶的某些细菌反应，对于假单胞菌属和,革兰氏阳性菌等无反应，易出现尿道感染漏诊。,NIT,尿蛋白,只对白蛋白敏感，对球蛋白不敏感，对本周蛋白不反应；,易造成对,IG,型肾病、骨髓瘤漏诊；,RBC,对完整,RBC,及,HGB,均有反应；不稳定酶、肌红蛋白、菌尿,会引起假阳性；高渗性红细胞易漏检。,WBC,只测脂酶，对中性粒细胞有反应，对淋巴细胞无反应；,容易漏诊肾移植早期排异反应。,不能代替病理性尿液标本的显微镜检查，对白细胞、管,
8、型和结晶的检测属于间接检测。,形态检查,第六章,尿液分析仪检验,Vit C:GLU,、,ERY,假阴性；,青霉素：,LEU,、,PRO,假阴性。,药物影,响,SG,比重膜块只能反映尿中阳离子多少与比重计结果不,一；对婴儿等低比重尿则不敏感。,BIL UBG,胆红素及尿胆原膜块灵敏度比,Harrison,手工,法低得多。,KET,酮体膜块对乙酰乙酸最敏感，丙酮次之对,-,羟丁酸,不反应。,GLU,只对葡萄糖产生反应,对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖,不反应。,第六章,尿液分析仪检验,只做尿干化学分析可能造成：,我们是仪器,做的，你的,尿检正常,昨天在另家,医院手工做,说有问题？,？,RBC,、,WBC
9、,易,出现,假阳性,或假阴性,有病理意义,的尿有形成,分漏检,前后结果,不一致,结果不可,通用性,尿干化学应,为初筛试验！,第六章,尿液分析仪检验,参数,假阳性,假阴性,比重,尿蛋白,尿素,10g/L,、尿液,pH6.5,蛋白质,喹宁、嘧啶、聚乙烯、吡咯酮、,氯已定、磷酸盐、季铵类消毒剂、,尿液,pH9.0,，,大量青霉素尿、尿液,pH3.0,葡萄糖,强氧化性清洁剂污染、,H,2,O,2,左旋多巴、大量水杨酸盐、维生素,C,（,500mg/L,）、氟化钠、高比,重尿、尿酮体（,0.4g/L,）,胆红素,吩噻嗪类或吩嗪类药物,维生素,C,（,500mg/L,）、亚硝酸,盐、光照,尿胆原,吲哚、吩
10、噻嗪类、维生素,K,、磺,胺药,亚硝酸盐、光照、重氮药物、对氨,基水杨酸,尿液干化学分析仪检测假阳性、假阴性常见的原因,第六章,尿液分析仪检验,参数,假阳性,假阴性,酮体,酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物,试带受潮、陈旧尿液,亚硝酸盐,陈旧尿液、亚硝酸盐或偶氮剂,污染、含硝酸盐丰富的食物,尿胆原、尿液,pH6.0,、维生素,C,、尿,量过多、食物含硝酸盐过低、尿液,在膀胱中贮存,4h,隐血或红,细胞,肌红蛋白、菌尿、氧化剂、易,热性触酶,蛋白质、维生素,C,（,100mg/L,）,白细胞,甲醛、毛滴虫、氧化剂、高浓,度胆红素、呋喃妥因,蛋白质、维生素,C,、葡萄糖、头孢氨,苄,尿液干化学分析仪检测假
11、阳性、假阴性常见的原因,第六章,尿液分析仪检验,第二节,尿液有形成分分析仪检验,第六章,尿液分析仪检验,尿液有形成分分析发展史,1983,年,美国一家公司推出以电视摄像模,式获取尿中有形成分图像并进行,分析的尿液有形成分检查工作站,1995,年,日本将,流式细胞术和电阻抗技,术结合,起来，研制了新一代全,自动尿液有形成分分析仪,第六章,尿液分析仪检验,尿液有形成分分析发展史,2000,年,尿液有形成分数字影像拍摄系,统则开启了数字图像尿液有形,成分分析的先例,现,今,全自动尿液有形成分分析仪已,普遍用于临床，且大多数可连,接或合并干化学分析仪,第六章,尿液分析仪检验,尿液有形成分分析仪分类,第
12、六章,尿液分析仪检验,（一）流式细胞技术尿液有形成分分析仪,流式细胞技术尿液有形成分分析仪,结合半导体激光技术、鞘流技术和核酸荧光染色技,术以及电阻抗原理为一体,第六章,尿液分析仪检验,流式细胞通道,前向散射信号放大器,荧光信号放大器,电极,氩离子激光,尿液标本,电导,率感应,器,鞘流,液试剂,电阻抗信号,电阻抗检测,电导率,荧光,电阻抗信号,电阻,Flw,Fl,Fscw,Fsc,体积,染色部,位长度,染色,敏感度,长度,大小,散点图,尿液电导率,染色,稀释,RBC,WBC,上皮,细胞,管型,细菌,类酵母细胞,精子，结,晶，小圆上,皮细胞，病,理管型,Fac,直方图,RBC-MFsc,RBC-
13、MFl,等,WBG-MFsc,检测器,流式细胞技术尿液有形成分分析流程,第六章,尿液分析仪检验,光学检测,第六章,尿液分析仪检验,信号检测,第六章,尿液分析仪检验,信号处理,2019/9/5,第六章,尿液分析仪检验,核酸荧光染色染料,菲啶,核酸成分染色,羧花氰,与细胞膜,核膜和线粒体的脂层成分结合,第六章,尿液分析仪检验,流式细胞技术尿液有形成分分析仪的检测参数,分类,参数,分析参数,红细胞（,RBC),、白细胞（,WBC,）、上皮细胞,（,EC,）、管型（,CAST,）、细菌（,BACT,）,标记参数,病理性管型（,P-CAST,）、小圆上皮细胞（,SRC,）、,类酵母细胞（,YLC,）、结
14、晶（,CRYSTAL,）、精子,其他参数,红细胞信息和红细胞分析参数、白细胞分析参数、,电导率、散点图、直方图等,第六章,尿液分析仪检验,散点图,S1,散点图,S2,散点图,第六章,尿液分析仪检验,散点图,S3,散点图,B1,散点图,FLW,FSCW,第六章,尿液分析仪检验,RBC-Fsc,WBC-Fsc,直方图,第六章,尿液分析仪检验,红细胞,信息,RBC-P70Fsc,100ch,，且,RBC-Fsc-,DW,50ch,，提示为,非肾小球性血尿,70ch,RBC-,P70Fsc,100ch,，且,RBC-Fsc-DW,50ch,，,为混合性红细胞,红细胞信息主要提示,红细胞的均一性，对,鉴
15、别血尿来源有一定,过筛作用,70%RBC-P70Fsc,70ch,，且,RBC-Fsc-DW,50ch,，提示为,肾小球性血尿,第六章,尿液分析仪检验,（二）流动式数字影像拍摄技术分析仪,第六章,尿液分析仪检验,分析仪工作原理,第六章,尿液分析仪检验,高速频闪光源和显微摄像的光学,系统每标本摄取,500,个视野的图片,电脑处理将每一个画面中的,单独的微粒的图像分割开,自动颗粒识别分析技术（,APR,TM,）,对单个有形成分图像归类,第六章,尿液分析仪检验,自动颗粒识别分析技术（,APR,TM,）,根据颗粒的大小、对比度、形状、质地四个,条件对其进行分析，得到一系列描述该粒子,特征的相应数值。,
16、第六章,尿液分析仪检验,27,项可进一,步分类参数,结晶体、病理管型、上皮细胞,、酵母及毛滴虫、脂肪滴、异,性红细胞等,12,项自动分,类参数,红细胞、白细胞、白细胞团、,鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细,胞、透明管型、病理管型等,APR,TM,识别的有形成分,第六章,尿液分析仪检验,（三）静止式数字影像拍摄技术分析仪,第六章,尿液分析仪检验,参,数,红细胞,白细胞,上皮细胞,管型,结晶,粘液丝等,电导率,第六章,尿液分析仪检验,（三）方法评价,显微镜检查是尿液有形成分检查的金标准。,2019/9/5,第六章,尿液分析仪检验,第三节,尿液分析仪检验的质量控制,第六章,尿液分析仪检验,质量控制,分析中
17、,质量控,制,分析后,质量控,制,分析前,质量控,制,第六章,尿液分析仪检验,?,患者告知,?,非正确采集方法对检验结果的影响,?,尿液样本必须新鲜,指从医生工作站申请至将尿液送到检,验科的质量控制，包括标本的采集运,送和保存等环节,（一）分析前质量控制,第六章,尿液分析仪检验,52,尿液标本放置过久对尿液干化学分析仪检验结果的影响,项目,结果,原因,pH,升高,细菌繁殖产氨,葡萄糖,降低,细菌繁殖分解利用糖,酮体,假阴性,酮体挥发,胆红素、,尿胆原,假阴性,胆红素阳光照射变为胆绿素；,尿胆原氧化成尿胆素,亚硝酸盐,假阳性,体外细菌繁殖,蛋白质,假阳性或假阴性,尿液,pH,改变时尿液过碱或过酸
18、,隐血,假阴性，,尿试带阳性而镜检阴性,过氧化物酶活性减弱,红细胞破坏,细胞,假阴性，,尿试带阳性而镜检阴性,白细胞酯酶失活,粒细胞破坏，特异性酯酶释放入尿液,第六章,尿液分析仪检验,（二）分析中质量控制,第六章,尿液分析仪检验,1.,性能评价,评价指标：,符合率,精密度,线性,携带,污染率,相关性,生物参考,区间验证,第六章,尿液分析仪检验,2.,结果验证和显微镜复检,泌尿系统疾病患者、糖尿,病患者、应用免疫抑制剂,患者及妊娠妇女等,医生提出显微镜检查要求,尿液有形成分分析仪结果,异常或仪器报警等情况,显微镜,复检原则,第六章,尿液分析仪检验,尿液有形成分分析仪结果异常或仪器报警,尿干化学与
19、有形成分分析仪结果,不相符合或者,RBC,、,WBC,的结果相,差量级,2,级以上时,尿有形成分分析仪各项结果有报,警信息时,应分析结果之间的关联性，注意,临床诊断和检查结果的符合性,第六章,尿液分析仪检验,显微镜复核注意事项,以镜检结果为诊断依据或观察疗效时不,宜使用干化学过筛,要结合临床表现判断结果，绝对不可只,看干化学结果，忽略镜检结果,当尿液外观异常时，应注意显微镜检查,干化学试带的质量、稳定性及质量控制,与过筛的准确性密切相关,每个检测系统都应建立自己的筛选标准,，筛选规则使用之前，必须经过验证,第六章,尿液分析仪检验,参数,干化学,显微镜,镜检法,原因,白细胞,+,尿液在膀胱中贮存
20、时间过长，致白细胞破,坏、粒细胞酯酶释放,+,尿液以淋巴细胞或单核细胞为主，见于肾,移植患者,红细胞,+,尿液红细胞被破坏，释放,Hb,，尿液中含易,热性触媒，肌红蛋白尿（将尿液煮沸冷却,后再检测可以排除酶的影响）,+,少见，见于维生素,C100mg/L,或试带失效时,干化学尿液分析仪法和显微镜镜检不符合情况与原因,第六章,尿液分析仪检验,3.,室内质控,每工作日至少检测,1,次，任意一个试剂块的,检测结果与,“靶值”偏差不超过,1,个等级,每天用质控物尿液进行质量控制监测,超过或结果在“正常”与“异常”之间,波动均视为失控,第六章,尿液分析仪检验,干化学,尿液分,析仪室,内质控,第六章,尿液
21、分析仪检验,尿有形成,分分析仪,室内质控,参照临床实验室定量测定,室内质量控制指南进行；,应至少使用,2,个浓度水平（正,常和异常水平）的质控物,每检测日至少检测,1,次，应至,少使用,1-3s,、,2-2s,失控规则。,第六章,尿液分析仪检验,4.,室间质评,通过阅读有形成分图片的方式进行，卫,生部临检中心通过提供尿液有形成分图片,考核实验室的形态学水平，一年,2,次,第六章,尿液分析仪检验,与其他实验室比对的方式确定检验结果的,可接受性时，应满足如下要求：,规定比对实验室的选择原则,样品数量：至少,5,份，包括正常和,异常水平,频率：至少每年,2,次,判定标准：应有,80%,结果符合要求,第六章,尿液分析仪检验,包括系统性的评审、规范格式和解释、授权发,布、结果的报告与传递、检验样品的储存等,（三）分析后质量控制,对于结果的报告与审核，实验室应做好人员培,训工作,正确分析检测结果之间的关联性,；形态学检验,项目应只报告筛查后的最终唯一结果,注意临床诊断和检验结果的符合性，如有明,显矛盾应及时联系临床医师共同探讨原因,2019/9/5,总,结,1.,尿液干化学分析仪检测原理及优缺点,2.,尿液干化学试剂带结构及各层膜作用,3.,干化学试剂带检测参数,缩写及原理,4.,尿液有形成分分析仪分类,5.,尿液有形成分分析仪检测局限性,6.,显微镜复检原则,
