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1、临床微生物标本的采集和运送,2015年9月16日,60%以上实验误差发生在分析前,1997年，一位意大利著名检验专家就对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示，约有68.2%的检验误差发生在检验前期，而来自于检验中期和检验后期的误差率分别为13.3%和18.5%。2007年，这位检验专家又进行了类似统计，结果显示，检验前期的误差发生率仍高达61.9%。,一、临床微生物检查标本送检的意义,正确采集、转运与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养的正确性与阳性率，是从临床微生物检验获得正确结果的最关键一步。,血标本采集时存在的问题,1.血培养瓶存放于冰箱，取出后立即采血进行培养，过低的温
2、度抑制细菌生长。采血前把血培养瓶从冰箱拿出后，待恢复至室温后采集，采集后切勿放回冰箱。2.血液标本采集后放置于冰箱，低温抑制细菌生长。3.血液标本采集后，放于机外时间过长，细菌生长已达衰老期。4.标本采集量少，儿童少于1ml，成人少于3ml，会明 显降低阳性率。5.标本采集时机不合适，未抓住菌血症时期，或在刚使用抗生素不久。采血最好在：体温升高前半小时，使用抗生素前，或停用抗生素24小时。6.标本消毒时消毒酒精未完全挥发。,血培养的指征：,1.当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养2.怀疑患者有血流感染的症状有：（1）不明原因的发烧(38)或体温过低(36)（2）白细胞增多（10,000/u
3、l），粒细胞减少（1,000ul）（3）休克，寒颤，僵直（4）严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，)（5）心率异常加快（6）低血压或高血压（7）呼吸频率加快,采集血培养样本的最佳时间,1.尽可能在患者寒战或开始发热时采血2.在患者接受抗生素治疗前采血3.如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养。,基本概念,1.成人“一套血培养”应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫“一份”。注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。2.儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部位采集多次。特殊患者考虑厌氧培养。,应该采集几套血液标本？,1.每位患者采血
4、最少2套，3套更好2.初发患者，绝不能只采1套标本3.多个穿刺部位采血。因多部位同时发生污染的几率较小，便于对结果进判断,标本间隔多久采集？,1.对于非持续性菌血症，同时或短时间内采集23套血培养，因为体内巨噬细胞吞噬系统会在1530min内清除掉进入人体内的细菌。2.可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养。3.可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h采集1套，连续采集3套标本。如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养。,应该采多少血量？,采血量是影响灵敏度最关键因素1.成人一
5、份标本2个培养瓶（需氧厌氧），每瓶810ml，共20ml；要求至少采两份标本，即40ml。2.儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集血量1总血量下，一般为13ml。3.采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染。,采各种血液标本的先后顺序？,血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。所以要最先采集血培养标本。污染率的指标是 3%,皮肤消毒程序：,推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消 毒剂。碘町作用1min 碘伏作用1.5-2min 洗必泰作用时间与碘町一样（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）,培养瓶的消毒程序：,1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。2.75
6、%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。3.自然待干。4.将标本注入培养瓶内。5.颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。,保存血培养标本瓶：,1.未用的：不需冷藏，更不能冷冻。保存在1525的室温即可。2.采集好的标本：存在室温即可不能冷藏也不能放入35 的温箱。过夜不会对检测造成影响，但仍需尽快送检。,采集血标本的基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的7.不可以从静脉留置针处采血，除非是采集留置针相关感染目的的标本,痰标本的采集方法,自然咳痰：采集标本
7、前，应冷开水漱口刷牙，然后用力从气管深部咳出痰液，放入痰杯内。下呼吸道肺泡灌洗，支气管刷洗，气管抽吸：将抽吸物或灌洗液直接放入痰杯内，刷出物放入1ml无菌生理盐水的痰杯中。诱导咳痰：刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口，借助喷雾器使患者吸入约25ml 3%5%的无菌盐水诱导咳痰。,痰培养的送检次数,对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。,痰培养的运送和保存,尽快（2h）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于4，但放置时间不可超过2
8、4h。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。,尿培养的指征：,有典型的尿道刺激症状肉眼脓尿或血尿尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性（几个+号）不明原因的发热，无其他局部症状留置导尿管时间超过48h的患者出现发膀胱排空功能受损 泌尿系统疾病手术前。,尿标本的采集方法,尽量取早晨第一次尿液 弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿 详细告知病人以下操作步骤女性病人：收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗尿道区域，排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人：清洗后排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿,导尿管尿
9、液,导尿管尿液,集尿袋内的尿液不能用作培养；导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中,尿标本的运送,收集中段尿液5-10ml，及时送检。室温保存下不得超过2小时，否则应置于4冰箱保存，保存时间不得超过24h。,你知道吗？,诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3
10、天采集晨尿。多次收集或24小时尿不能用作培养。申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。,粪便培养标本采集与运送,粪便标本采集指征：,当病人出现以下一种情况时应该采集粪便标本进行细菌培养：1.粪便涂片白细胞5个/HP；2.体温38;3.重症腹泻；4.脓血便；5.未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人；6.来自肠道传染疫区的患者。,粪便标本的采集方法,自然排便采集标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部份的粪便13g（花生米大小）。液体粪便则取絮状物，一般取13
11、ml，直接装入粪便容器或运送培养基中送检。直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂、水和70%酒精，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门超越肛门括约肌约2-4cm，与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉拭子置于运送培养基中送检。,粪便标本的运送,一般粪便标本装于无菌封闭广口塑料杯；直肠拭子置于肠道运送培养基。做霍乱弧菌检查的粪便标本置于碱性蛋白胨水试管中。粪便标本：室温1小时内送至。直肠拭子：室温1小时内送至。高度怀疑霍乱弧菌感染的标本室温1小时内送至，运送必须符合特殊标本的安全要求。有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血便或液状便的效果最好。,脑脊液标本采集与运送,采集：按脊椎穿刺操作
12、规程，采集约3-5ml脑脊液于3支无菌试管中，每支试管至少1-2ml，然后马上将第2支（或第1支）送至实验室。做脑脊液培养时，建议同时做血培养。腰穿时必须作彻底消毒和无菌操作。运送：常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。,穿刺液标本采集与运送,采集：2%碘酊消毒要穿刺的皮肤后，由临床医生穿刺采集标本（2ml左右），装入无菌密封容器立即送检。运送：采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。保温立即送检，保证在15min内送至实验室，实验 室收到标本后应立即接种。为提高阳性率，像胸腹水等标本，可接种到血培养瓶中送检。,手术切口感染标本的采集与运送,采集方法：先用无菌生理盐水彻底冲洗切口表
13、面，去除表面的渗出和碎屑，再用拭子深入伤口的基底部或者伤口与正常组织边缘采集，放入无菌试管中，运送：及时送检。,软组织感染标本采集与运送,采集方法：未破裂脓肿：不能用拭子。消毒覆于脓肿表面的皮肤，用注射器将脓肿内容物吸出。然后切开脓肿、引流，取部分脓肿壁送检。用于厌氧培养。开放病灶和脓肿：尽量去除表面菌群，用拭子采集病灶及底部或边缘的标本，置于需氧培养基中。开放病灶不能做厌氧培养。脓疱或水疱：酒精消毒使之干燥，对于患儿用23号针头挑破脓疱，拭子采集脓疱液和基底部标本运送：迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。,注意事项,不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶活动区域或基底部采集标本。,谢谢大家 聆听！,
